激素因子对铁皮石斛离体培养开花诱导的效应

[目的]筛选铁皮石斛离体培养开花诱导的适宜激素因子。[方法]采用铁皮石斛茎段离体培养的试管苗为试验材料,以MS为基本培养基,进行单因子激素处理（PP333、TDZ的不同浓度梯度）和多因子激素处理（PP333、TDZ、6-BA以及NAA的不同组合）的比较试验,研究激素因子对铁皮石斛离体培养开花诱导的效应。[结果]单因子激素处理中,PP333、TDZ的适宜浓度和其诱导的花芽形成率分别为0.2 mg/L和8.5%、0.06 mg/L和15.5%;多因子激素处理对开花诱导的效应依次为：PP333＋6-BA＋NAA＋TDZ组合处理〉PP333＋6-BA＋NAA组合处理〉PP333＋6-BA组合处理和PP333＋NAA组合处理;适宜的激素组合为PP3330.3 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.5mg/L＋TDZ 0.06 mg/L,其花芽形成率和花开放率高达80.4%和90.3%。[结论]PP333和TDZ对铁皮石斛离体培养开花诱导具有重要影响,TDZ的效应大于PP333。适宜的TDZ浓度与其他激素的合理配比,有利于花芽的形成。     

蔓性千斤拔组织培养中种子灭菌和芽增殖的研究

[目的]研究蔓性千斤拔组织培养中种子灭菌的方法,筛选适宜芽增殖的外植体及激素组合。[方法]用乙醇、次氯酸钠和升汞的不同组合对种子进行灭菌,然后比较顶芽和带腋芽的茎段作为外植体进行继代增殖的效果,探讨不同激素组合对芽增殖的影响。[结果]较好的种子灭菌方法为:75%乙醇30 s+10%NaClO10 min+0.1%HgCl25 min;带腋芽的茎段为较好的继代增殖外植体。6-BA对芽增殖有显著促进作用;KT对芽的增殖效果不如6-BA;芽增殖的最佳激素组合为6-BA2.0 mg/L+IAA0.1 mg/L,增殖倍数为6.74。[结论]获得了较好的种子灭菌方法,筛选出适合继代增殖培养的外植体和激素组合,为蔓性千斤拔组织培养的深入研究提供实验基础。     

籼型杂交稻幼穗离体培养及再生植株诱导

籼型杂交稻组合“汕优23选”为新的具高培养力的材料,其幼穗愈伤组织诱导率约为80%,绿苗得率高达970.8%。幼穗离体培养选材以穗长2cm 以下(幼穗分化第3～4期)为宜。MN 和 N_6两种培养基适用于籼型杂交稻的幼穗离体培养,以 MN(诱导)→N_6(继代)→MN(分化)的培养基替换方式,对愈伤组织的继代培养和绿苗分化具有良好效果。采用KT 2mg/L+BA 1mg/L+IAA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L 的激素配比,有效地提高了绿苗分化率。通过幼穗离体培养,可迅速和大量地获得再生植株,这对开展水稻组培育种和体细胞遗传学研究具有一定意义。     

激素因子对甘蔗愈伤组织诱导增殖与分化的效应

对巴西固氮甘蔗品种B8（RB86-7515）、新台糖22号（ROC22）嫩叶鞘进行离体培养,以MS为基本培养基,研究不同激素种类及组合对愈伤组织诱导、增殖和分化的效应。结果表明,以2,4-D3.0mg/L＋NAA0.2mg/L＋KT1.0mg/L激素组合的愈伤组织诱导率最高,ROC22和B8的诱导率分别达92.67%、88.89%;以2,4-D3.0mg/L＋NAA0.2mg/L＋KT0.5mg/L激素组合的愈伤组织增殖效果最好,ROC22和B8的愈伤组织增殖倍数分别为3.5和2.5倍;以NAA0.1mg/L＋6-BA1.5mg/L＋TDZ0.04mg/L激素组合的甘蔗愈伤组织分化效果最好,ROC22和B8的芽分化率分别为82.22%和77.78%。     

几种因子对药用植物滇桂艾纳香扦插效果的影响

以药用植物滇桂艾纳香枝条不同茎段部位为材料,研究植物生长调节剂种类及浓度、插穗材料的老熟程度、扦插季节等因子对扦插效果的影响,为滇桂艾纳香扦插繁殖技术的建立提供依据。结果表明,单一植物生长调节剂处理以NAA2．0mg／L效果最好,插穗成活率为50．00％,平均生根数为3．23条,与清水处理的差异达极显著水平;两种植物生长调节剂组合处理,以NAA2．0mg／L＋IBA2．0mg／L组合处理效果最好,插穗成活率为58．33％,平均生根数为3．72条,与清水处理的差异达极显著水平;比较不同老熟度插穗的成活率和生根数,以老茎最好,其插穗成活率达72．22％,平均每株根数为3．05条,与中茎、嫩茎的差异均达极显著水平;春季取枝扦插的效果优于秋季,其中以老茎最好,其插穗成活率达73．89％,平均生根数为3．50条,两项指标与其他处理的差异均达极显著水平。     

红腺忍冬外植体灭菌与芽诱导研究

【目的】探讨影响红腺忍冬外植体消毒灭菌和芽诱导效果的因子,为开发红腺忍冬组培快繁技术提供依据。【方法】以红腺忍冬带腋芽茎段为外植体,按不同灭菌时间（10、12、14、16min）、外植体取材季节（春、夏、秋、冬）、茎段直径大小（O．79、0．51、0．27cm）和处理部位（未木质化、半木质化、完全木质化）分别进行腋芽诱导。【结果】以0．1％升汞加吐温灭菌14min的外植体芽诱导率最高,为41．19％;未木质化茎段的芽诱导率最高,为41．36％;春季和秋季是比较理想的取材季节,外植体的芽诱导率分别为41．61％、39．42％;以平均直径为0．79cm的茎段进行初代培养,芽诱导效果最好,诱导率为41．81％,芽平均高度为2．35cm,平均叶片数为6．06张。【结论】选择未木质化、直径大小为0．79cm左右的茎段,在春季和秋季取外植体,以0．1％升汞加吐温灭菌14min,均可获得较理想的外植体芽诱导效果。     

水稻野栽杂交受粉子房离体培养研究

对野生稻与栽培稻杂交受粉子房离体培养的试验结果表明，不同杂交配组类型的培养效果为：栽×栽（同一品种）＞栽×栽（不同品种）＞栽×野＞野×栽＞野×野。１６个水稻野栽杂交组合的结实率为０％～４７．４％。受粉子房离体培养时间以授粉２～３ｄ龄较为适宜。离体培养的水稻杂交受粉子房的发育有三种情况，即子房（胚胎）滞育或败育、结实和形成植株。胚继续培养有利于胚存活和发育与植株产生。在诱导产生的３８个植株中，未见白化苗     

罗汉果葡萄糖基转移酶基因的克隆及原核表达

 从罗汉果（Siraitia grosvenorii）转录组中获得一条与罗汉果甜苷Ⅴ生物合成相关的葡萄糖基转移酶（UDPG）的unigene片段,以罗汉果授粉后70 d的果实RNA为模板,利用RACE和RT-PCR技术克隆UDPG全长基因,将克隆得到的SgUDPG1基因连接到原核表达载体pEASY-E1上,构建融合表达载体,转化到大肠杆菌BL21（DE3）,通过IPTG诱导表达,重组蛋白纯化,SDS-PAGE检测表达产物以及Western-blotting和质谱鉴定蛋白产物。结果表明,获得了1条SgUDPG1,全长为1 959 bp,开放阅读框ORF为1 365 bp,编码1条454 aa的肽链,理论分子量为51.2 kD,等电点为5.39,具有植物中次生代谢产物糖基转移酶特有的保守结构域PSPG-box motif。SgUDPG1在授粉后50 d和70 d的果实中表达逐渐升高,是对照授粉后3 d的5.16倍和13.12倍,与果实中甜苷Ⅴ含量呈相同趋势。此基因的ORF可以在大肠杆菌中表达,并且可以纯化出比理论分子量大5.3 kD的融合蛋白,通过Western-blotting和质谱鉴定,确定该蛋白属于罗汉果葡萄糖基转移酶。     

广西金秀香芋无菌芽增殖的相关因子研究

[目的]探讨影响广西金秀香芋无菌芽增殖的相关因子。[方法]以广西金秀香芋无菌芽为材料,从不同基本培养基、不同生长素种类、不同6-BA浓度、不同激素组合及不同蔗糖浓度等对广西金秀香芋无菌芽继代增殖进行比较。[结果]无菌芽继代增殖的适宜基本培养基为MS培养基,适宜的生长素为0.2mg/LNAA,适宜的6-BA浓度为4.0mg/L,适宜的激素组合为0.2mg/NAA+3.0mg/L6-BA+0.5mg/LPP333,最佳的蔗糖浓度为30g/L。[结论]不同基本培养基、不同生长素种类、不同6-BA浓度、不同激素组合及不同蔗糖浓度对广西金秀香芋无菌芽增殖的影响不同。     

提高优质籼稻成熟胚离体培养效果的几个因子

通过比较在不同灭菌条件下籼稻成熟胚的灭菌效果和诱导率，选出最佳灭菌组合：70％酒精3min 10％次氯酸钠10min 0．1％升汞30min。在诱导过程中，不同基因型材料的最适基本培养基不同，桂华占的最适基本培养基为MS培养基，油占8号的最适基本培养基为N6培养基。在诱导培养基中添加10mg／L的椰子汁，有利于胚性细胞团诱导及绿苗分化，以桂华占为例，胚性细胞团诱导和分化率分别比对照提高10．27％和11．76％。