牛病毒性腹泻病毒E0蛋白的表达与多克隆抗体制备

为了制备BVDV的E0蛋白兔源多克隆抗体,试验采用大肠杆菌对E0蛋白进行了表达,根据已发表的BVDV的VEDEVAC株的全基因组序列设计1对扩增E0的引物,经RT-PCR扩增出长约680 bp的E0基因片段,然后将目的基因克隆到pET-30a载体上,经酶切鉴定获得阳性重组质粒后进行测序,再将测序正确的阳性重组质粒转化BL21表达菌,经扩大培养及IPTG诱导后获得以包涵体形式存在的重组E0蛋白,经亲和层析法纯化后进行Western-blot检测,同时以纯化的E0蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并对E0多克隆抗体进行了中和试验和免疫荧光检测。结果表明:E0蛋白具有良好的反应性;E0多克隆抗体的病毒中和试验测定其中和抗体效价达到1∶128,具有良好的反应性和特异性。说明制备的重组E0蛋白多克隆抗体可以用于BVDV的检测。     

饲料中添加二甲基-β-丙酸噻亭(DMPT)后异育银鲫肠消化酶的活性变化

研究了饲料中添加不同剂量(0.01%、0.02%、0.03%和0.04%)的DMPT后,异育银鲫空腹至饱食后12 h肠淀粉酶、蛋白酶及脂肪酶活性的动态变化.结果表明:异育银鲫肠组织不同部位之间淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶的活性存在差异,淀粉酶和蛋白酶活性以中肠最高,后肠最低,而肠脂肪酶活性以后肠为最高,前肠最低;饱食后肠淀粉酶和蛋白酶活性都出现先降低后升高再降低的波浪型动态变化趋势,并于饱食后3 h达到谷值,9 h达到峰值,而肠脂肪酶活性在饱食后3 h无明显变化,后升高,再降低,9 h同样达到峰值,12 h后3种酶活性都恢复至空腹时的状态;饲料中添加DMPT能够不同程度地提高异育银鲫肠淀粉酶、蛋白酶以及脂肪酶活性,以0.03%的添加水平效果最好.     

陆地棉细胞色素P450超家族基因GhCYP85A2-1的克隆与功能分析

【目的】研究细胞色素P450超家族CYP85A亚家族基因在棉花株高发育中的生物学功能,为陆地棉株高分子育种提供理论依据和基因资源。【方法】 采用同源克隆方法,从陆地棉中克隆CYP85A家族基因GhCYP85A2-1,利用烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus, TRV)诱导的基因沉默技术(Virus-induced gene silencing, VIGS)构建GhCYP85A2-1基因沉默载体,利用qRT-PCR技术检测侵染棉花幼苗的基因表达量。【结果】 GhCYP85A2-1基因沉默植株的株高显著降低,基因的表达量也显著下降。【结论】 GhCYP85A2-1基因在棉花株高发育过程中起到重要调控作用。     

不同酿造工艺对毛葡萄酒香气的影响

为探索酿造工艺对毛葡萄酒风味的影响，利用GC/MS法对秦巴山区野生毛葡萄在两种工艺条件下酿造的葡萄酒的香气成分进行了研究。结果表明：用传统工艺及CO₂浸渍工艺酿造的毛葡萄酒醇类相对含量最高，其中以苯乙醇、戊醇含量最高。在酯类、酮类、酚类方面，两种工艺酿造的原酒比陈酿6个月的酒种类少，相对含量低；而对于其他香气成分，则是原酒高于陈酿6个月的酒。说明一定时间的陈酿对于毛葡萄酒的香气质量有所提高。通过对两种工艺的综合比较发现，传统工艺酿造的原酒香气质量优于CO₂浸渍工艺酿造原酒；但经过6个月的陈酿后，CO₂浸渍工艺酿造酒香气质量却高于传统工艺的酿造酒。     

贵州红枫湖水库消落带类型划分及其生态修复试验

水库消落带是防止水体污染的最后一道生态屏障,恢复或重建消落带植被是水库水质管理的一项重要措施,也是当前水库水体污染控制的研究热点和难点问题之一。消落带类型划分可为消落带分区规划治理提供指导。根据喀斯特山区水库消落带自然结构的质地和坡度,将红枫湖水库消落带分为河口型消落带、库湾滩地消落带、土质缓坡消落带、砾质坡地消落带和岩质岸坡消落带5种类型,对各种类型的消落带特征进行了分析,并提出了红枫湖水库消落带生态恢复的设计原则与工程模式。红枫湖水库消落带生态修复试验表明,恢复与重建后的消落带系统生物多样性增加、生态功能增强。     

上鸡、养鸡、卖鸡的思考

当前养鸡散户和规模户并存,但规模养殖数量稳中有升,散户养殖时多时少。如果这批鸡散户上鸡很多,则卖鸡时价格就会较低,反之亦然。如此现状,很难控制。另外,受鸡苗数量影响,鸡苗与毛鸡的数量是成正比关系。因此,价格问题实在难预测,或者说养殖户根本无法判断涨跌,那么养鸡户应该怎么办?     

牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的多克隆抗体制备及鉴定

为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白的兔源多克隆抗体,本研究利用表达BVDV E2蛋白的重组质粒pET30a-E2转化E.coli BL21(DE3),经诱导表达获得重组E2蛋白。Western blot检测显示纯化蛋白能够与BVDV参考阳性血清反应。以纯化的重组E2蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,病毒中和试验测定其中和效价为1:2048,间接免疫荧光和western blot试验表明其具有良好的反应性和特异性。本研究制备的BVDV重组E2蛋白兔源多克隆抗体可应用于BVDV的检测,同时为进一步建立检测BVDV E2蛋白的ELISA方法奠定基础。     

猪戊型肝炎病毒结构蛋白片段的表达及其在ELISA中的初步应用

为建立一种快速的猪戊型肝炎病毒抗体检测方法，根据已克隆的戊型肝炎病毒株DQ1结构蛋白基因（ORF2）的抗原性及水溶性分析，在其序列上设计一对引物，上游引物和下游引物分别带有BamHⅠ、HindⅢ酶切位点，用PCR方法扩增，获得369bp大小的相应片段，位于ORF2128—497bp处。将扩增片段克隆到pET-32a构建了原核表达载体pET32a—D001，经测序证明该片段正确插入。将pET32a—D001转化BL21并诱导表达，SDS-PAGE结果显示表达蛋白大小为33ku，Western-blot结果表明表达的蛋白质具有生物活性，将表达蛋白作为诊断抗原，对反应条件进行优化，初步建立了ELISA诊断方法。     

实验感染山羊关节炎—脑炎病毒的绵羊抗体应答反应的研究

本实验用琼脂凝胶免疫扩散试验和免疫印迹试验对实验感染山羊关节炎—脑炎病毒（ＣＡＥＶ）的绵羊抗体应答反应进行了研究，用两种方法都可在接毒绵羊的血清中检测到ＣＡＥＶ的抗体。琼脂凝胶免疫扩散试验最早可于接毒后的第７周时检测到抗体，免疫印迹试验最早可于接毒后的第６周时检测到抗ＣＡＥＶ的ｇｐ１２５、ｇｐ４４、ｐ３５、ｐ２８和ｐ１４的抗体，这说明免疫印迹试验更为敏感一些。本实验的结果表明ＣＡＥＶ可在绵羊体内诱生明显的体液免疫应答反应，因此用ＣＡＥＶ通过绵羊体传代的方法可能会得到具有良好的抗原性的ＣＡＥＶ毒株，这对于人工培养ＣＡＥＶ强毒是非常重要的。此外，本实验还为ＣＡＥＶ通过绵羊体传代的研究提供了非常实用的检测手段     

荷电雾滴群撞击界面过程的PDPA测试

为了研究荷电雾滴群撞击植株靶标界面的过程,研究了适合撞击过程测量的相位多普勒粒子分析仪(PDPA)测试方法,分析了荷电雾滴群撞击界面后形态特征及形成的原因。实验结果表明:荷电雾滴群特殊的空间运动结构决定其撞击植株靶标界面后具有独特的存在形态;荷电雾滴撞击界面后只会产生粘附或反弹而不会发生喷溅;较多细微雾滴的存在导致荷电雾滴群反弹后凝并现象显著,使雾滴的粒径增大而个数减少;单雾滴撞击界面后产生粘附或反弹的判据K的临界值不适于荷电雾滴群的撞击过程,而法向Weber数为30可作为发生反弹现象的参考依据;较大的切向速度能够造成荷电雾滴撞击植株界面后反弹现象的发生;荷电雾滴所具有的部分法向动能在撞击反弹过程中转为切向动能。