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为探索研制预防仔猪腹泻口服基因工程疫苗,本研究根据GenBank中登录的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)Fae G基因序列设计一对引物,以ETEC C83907菌株为模板,通过PCR方法扩增出K88菌毛粘附素主要蛋白亚基Fae G的基因,将其定向克隆到乳酸乳球菌(L.lactis)分泌表达载体pNZ8112中,构建了分泌表达载体pNZ8112-fae G.并转化到L.lactis NZ9000中.重组菌株经5 ng/mL nisin诱导3 h后,仅在L.lactis菌体内检测到Fae G的表达,上清液中未检测到Fae G蛋白.SDS-PAGE电泳检测结果显示,表达的目的蛋白分子量大小约为27 ku,表达产物的量达到了菌体总蛋白的13.56%.Western blot分析结果表明,表达蛋白具有免疫反应性.本实验为进一步研究Fae G在L.lactis中分泌表达的影响因素奠定了基础. 相似文献
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