探针实时荧光定量PCR检测白藜芦醇体外抗鸭瘟病毒活性方法的建立及应用

建立以TaqMan荧光探针为特点的PCR,检测白藜芦醇体外抗鸭瘟病毒活性。本研究针对鸭瘟病毒UL30基因序列设计特异性引物和TaqMan荧光探针,建立鸭瘟病毒TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,并验证方法的特异度、敏感度和稳定性及对临床样品进行检测;运用该方法检测白藜芦醇对鸭胚成纤维细胞接种鸭瘟病毒后细胞中病毒增殖情况的影响,用以评价该药物体外抗鸭瘟病毒效果。结果显示,该方法建立的定量标准曲线阈值循环数（Threshold cycle,Ct）与模板拷贝数呈良好线性关系（R2=0.997）,斜率为-3.328,扩增效率（E）为99.7%,具有良好的特异度、敏感度和稳定性并能对临床样本进行准确的检测。运用该方法检测白藜芦醇体外抗鸭瘟病毒结果显示：经白藜芦醇处理后,染毒细胞中病毒拷贝数为（7.71±0.37）×10^4,与病毒对照组比较（5.63±0.26）×10^6明显减少（P〈0.01）。结果表明,TaqMan探针实时荧光定量PCR方法建立并成功用于体外药物抗鸭瘟病毒的检测;白藜芦醇具有良好的体外抗鸭瘟病毒活性。     

油樟叶乙酸乙酯萃取物镇痛抗炎作用的研究

为研究油樟叶乙酸乙酯萃取物的镇痛抗炎作用,采用醋酸扭体试验和热板试验观察油樟叶乙酸乙酯萃取物对小鼠的镇痛作用;通过二甲苯诱导小鼠耳肿胀模型和醋酸诱导小鼠毛细血管通透性增高模型观察油樟叶乙酸乙酯萃取物的抗炎作用.结果显示,油樟叶乙酸乙酯萃取物能显著减少醋酸所致小鼠扭体次数,对热板法试验模型无显著镇痛作用;显著抑制醋酸诱导小鼠腹腔毛细血管通透性的增高,高剂量下显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀.结论表明,油樟叶乙酸乙酯萃取物具有一定外周镇痛作用和抗炎作用.     

印楝油对兔疥螨幼虫的体外杀螨活性

将兔疥螨幼虫置于聚苯乙烯小平皿中，分别加入不同浓度的印楝油液体名蜡溶液，以天然除虫菊酯和阿维菌素为阳性对照，蒸馏水和液体石蜡为阴性对照，观察记录不同时间段的螨虫死亡数，以死亡率、半数致死时间（LT50）和半数致死浓度（LC50）为指标评价了印楝油对兔疥螨幼虫的离体杀螨活性。结果显示，未稀释的印楝油能在25min内杀死所有幼螨，其杀螨活性显著强于500g／L的天然除虫菊酯（825min，P〈0．01），而与25g／L的阿维菌素无显著差异（19min，P〉0．05）；500、250和125mL／L印楝油对兔疥螨幼虫的LT50分别为1、2、5h；24h的LC50和LC95分别为2．908和12．018mL／L。结果证实，印楝油对兔疥螨幼虫具有较好的离体杀螨活性。     

印楝油不同溶剂提取物对兔疥螨幼虫的离体效力试验

采用浸杀方式分别比较了印楝油石油醚、氯仿和乙酸乙酯溶剂提取物的杀螨活性,并测定了活性和得率高的溶剂提取物对兔疥螨幼虫的离体毒力,应用互补重对数模型对毒力测定数据进行分析。结果表明:印楝油石油醚、氯仿和乙酸乙酯溶剂提取物的得率分别为56.82%、25.36%和5.14%。印楝油石油醚、氯仿和乙酸乙酯溶剂提取物都具有一定杀螨活性,其中石油醚提取物活性最高,氯仿和乙酸乙酯提取物活性相近。石油醚提取物和氯仿提取物对幼螨的毒力表现为:24 h半数致死浓度(median lethal concentration,LC50)分别为1.347 7,3.917 4μL/mL,500μL/mL的半数致死时间(median lethal time,LT50)为8.404 0 h和9.643 4 h。     

人工感染鸡卡氏住白细胞原虫病的病理形态学

30 0日龄新罗曼蛋白鸡 40只 ,以混群感染的方式感染卡氏住白细胞原虫病 ,在不同感染阶段剖杀 ,观察试验鸡心、肝、脾、肺、肾、肠、胰、肌肉等器官的病理变化。结果表明 ,感染后各内脏器官普遍出现充血、出血、坏死和血管壁纤维化等病变 ,尤其以肾被膜下和卵巢的出血及肝、脾的凝固性坏死为严重。一些坏死病灶内出现上皮样细胞、浆细胞、淋巴细胞、假嗜伊红性白细胞增生 ,形成类似仔猪副伤寒结节的增生性结节。同时 ,在肝、脾、肺、肾中可见特征性的巨型裂殖体结节。     

青刺果种粕粉对鸡免疫器官发育的影响

本试验旨在研究青刺果种粕粉对鸡免疫器官发育的影响。将7日龄鸡分成试验组和对照组,每组设3个重复;对照组饲喂基础日粮,试验组饲粮分别添加10和15g/kg青刺果种粕粉,饲喂30d。第14、21和28日龄时分别取胸腺、法氏囊和脾脏称重并制作切片。结果表明,试验组鸡法氏囊、胸腺、脾脏脏器指数在各个日龄均显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。光镜下,14日龄时,试验组较对照组法氏囊皮质与髓质分界较清楚,淋巴滤泡形成,胸腺皮质不同程度增厚,脾脏形成动脉周围淋巴鞘;21日龄时,试验组较对照组法氏囊中淋巴细胞发育成熟,形态较小,淋巴滤泡直径增加,胸腺小体增多,皮质增厚,脾脏淋巴细胞致密;28日龄时,试验组与对照组比较,法氏囊淋巴滤泡较大,胸腺小体增大,可见朗罕氏细胞,脾小体和生发中心较发达。电镜下,试验组脾脏淋巴细胞形态均一,核仁增多,核染色质边移,随着日龄的增长,淋巴细胞活性增加。结论:青刺果种粕粉能促进鸡免疫器官的生长发育。     

鸡卡氏住白细胞原虫病的研究进展

鸡卡氏住白细胞原虫病在我国许多省市呈大规模爆发，引起鸡只大批死亡，造成巨大的经济损失，本综述了近年来国内外对本病的病原、流行病学、临床症状和病理变化，诊断方法、防治等方面的研究进展。     

端粒、端粒酶与肿瘤的关系及其应用

端粒是染色体末端的特殊结构，其长度随细胞分裂而进行性缩短；端粒酶是一种核糖核蛋白酶，能够逆转录合成端粒，维持其长度，在几乎所有恶性肿瘤中能检测到端粒酶活性，它作为一种新的肿瘤标记物及抗癌靶点，日益受到重视，具有重要的生物学意义，可作为诊断指标和治疗方法的研究对象，应用于病理学中。     

鸡马立克氏病胚胎免疫的研究进展

鸡马立克氏病(Marek's Disease,MD)是由马立克氏病病毒(MDV)引起鸡的一种淋巴细胞组织增生性疾病,其特征是外周神经出现淋巴细胞浸润和肿大,导致鸡一肢或两肢外周神经麻痹以及内脏器官、性腺、虹膜、骨骼肌和皮肤出现肿瘤样病灶.     

青刺果种粕粉对鸡血清抗体和血液生化指标的影响

青刺果(prinsepia utilis royle),为蔷薇科扁核木属植物.主要生长在我国云南丽江等地区.青刺果除作为食用外,还具有极高的药用价值[1].青刺果种粕粉作为青刺果果实的分离提取物,我们在前期的研究工作中已证实其含有极高的黄酮、多糖、粗脂肪、粗蛋白、氨基酸、丰富的维生素和微量元素等,具有丰富的营养价值.为了探索其作为中草药饲料添加剂的可行性,本研究将其作为饲料添加剂添加在肉鸡的日粮中,进行青刺果种粕粉对肉鸡血清抗体和血液生化指标的影响的试验研究,探讨其对机体免疫机能的影响机制.