猪伪狂犬病毒gB抗原侧向层析快速检测试纸条的研制

为建立一种简便、快速、特异的猪伪狂犬病毒(PRV)gB抗原检测方法,利用单克隆抗体技术和侧向层析(LFA)技术,采用柠檬酸三钠还原法,制备颗粒大小为31.5 nm胶体金,再用胶体金标记纯化的抗PRV gB单克隆抗体10D4,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处,分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体6E9,组装成LFA方法通用胶体金层析试纸条。经测试,该试纸条最低能检测出1:640倍稀释的,TCID_(50)为1×10~(8.6)/0.1 mL的灭活PRV抗原,并与古典猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)均无交叉反应,特异性良好;室温干燥密闭的条件下,该试纸条至少可保存10个月。结果表明,本研究建立的试纸条方法操作简单、快速、敏感、特异,易于判定,适合基层PRV的大面积普查和现场检测。     

4种鸡源致病性沙门氏菌多重PCR检测方法的建立及应用

建立一种多重PCR方法,同时检测肠炎、鼠伤寒、鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌。针对沙门氏菌属特异性invA基因、肠炎沙门氏菌特异性Sdf I序列、鼠伤寒沙门氏菌特异性STM4497基因、鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌flhB基因设计引物,对引物浓度和反应条件进行优化,并对多重PCR特异性和灵敏度进行评估。利用建立的多重PCR方法调查河北地区蛋种鸡生产链中沙门氏菌流行现状。研究建立的多重PCR方法可快速、特异性鉴别肠炎、鼠伤寒、鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌,最低检出限为100 CFU细菌和0.5 ng基因组DNA。沙门氏菌流行病学调查显示,肠炎沙门氏菌是河北地区蛋种鸡生产链中沙门氏菌主要流行血清型。成功建立鉴别肠炎、鼠伤寒、鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌的多重PCR方法,对沙门氏菌流行病学调查及临床快速诊断具有重要意义。     

川青牛胆离体繁殖技术优化研究

为优化青牛胆离体繁殖技术,建立四川青牛胆快速繁殖技术体系的方法,本试验以川青牛胆幼嫩茎段为外植体,通过组织培养技术,探究适用于幼嫩茎段快速繁殖的最佳培养基。结果表明：最佳快速繁殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率达90.0%;最佳增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA;最佳生根培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA,生根率为97.5%;驯化移栽成活率为100.0%。     

雨生红球藻植物类型隐花色素基因克隆与序列分析

为了从雨生红球藻中获得感知蓝光信号的植物类型隐花色素(CRY)序列,采用同源克隆和RACE相结合的方法获得了雨生红球藻编码植物类型Hae-P-CRY的c DNA全长,并对其序列进行生物信息学分析。结果表明,Hae-P-CRY基因的c DNA全长为3 608 bp,包含开放阅读框全长2 988 bp,编码995个氨基酸,预测等电点6.19,理论分子质量为107.7 ku。经Blast P分析发现,Hae-P-CRY氨基酸序列与莱茵衣藻来源植物类型Cre CRY氨基酸序列的相似性达到66.6%,与拟南芥CRY氨基酸序列相似性为46.94%。系统进化分析表明,Hae-P-CRY与其他真核绿藻来源的植物型CRY聚在一支,属于植物类型CRY。结构域分析表明,Hae-P-CRY基因含有光感知PHR结构域和信号转导CCT结构域,暗示具有感知和转导光信号功能。试验从雨生红球藻得到植物类型Hae-P-CRY基因序列,可为其表达、功能及互作蛋白研究奠定基础,同时为进一步解析雨生红球藻在蓝光响应中的分子机制奠定基础。     

Dvl1及其突变体腺病毒载体的构建与在MSCs中表达鉴定

Dvl1及其结构缺失突变体ΔDIX（dsh and axin）和ΔDEP（dsh,Egl-10 and pleckstrin）腺病毒载体的构建并验证其在MSCs（mesenchymal stem cells）中的表达情况。将目的基因定向克隆至pAdTrack-CMV穿梭载体上,并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组,获得重组腺病毒载体,在QBI-293A细胞中包装及扩增,实时荧光定量PCR和Western bolt验证Dvl1在MSCs中的表达情况。经PCR、PacⅠ单酶切鉴定及测序分析,成功构建Ad-Dvl1、Ad-ΔDIX和Ad-ΔDEP腺病毒载体,目的基因序列与GenBank报道一致,并选出150 MOI为最适感染MSCs的感染复数,成功构建了Ad-Dvl1、Ad-ΔDIX和Ad-ΔDEP腺病毒载体,并获得高滴度的病毒子,qPCR和Western blot证实Dvl1在MSCs中高表达并增加了β-catenin在细胞中的累积,为进一步研究Dvl1在MSCs迁移过程的作用奠定了基础。     

农村中小企业债务融资问题初探

本文分析了农村中小企业债务融资难的主客观原因以及给企业带来的不利影响,提出了解决债务融资难的途径。     

葡萄酒中白藜芦醇含量的测定研究

采用高效液相色谱法分别测定了毛葡萄-1、毛葡萄-2、北国蓝、北国红、法国蓝5个葡萄品种(系)酿制酒中的白藜芦醇及其醇苷的含量。结果表明,葡萄酒中白藜芦醇主要以醇苷的形式存在。可能因气候原因,2017年的葡萄酒白藜芦醇总含量均高于2018年;适时晚采的酒样白藜芦醇总含量高,北国蓝葡萄酒的白藜芦醇总含量达到10.92mg/L。     

猪瘟与猪纤维素性肺炎混染的诊治

<正>2011年10月下旬,吉林省吉林市某养猪场暴发2月龄仔猪为主要发病的急性传染病,发病较急,死亡率高,来到吉林农业科技学院附属动物医院就诊,通过流行病学、临床症状、剖检变化和实验室检验,诊断为猪瘟,由于大肠杆菌引发的猪纤维素性肺炎混合感染,经过7 d的治疗,病情得到基本控制,报告如下。     

对提高大学生科研实践成效的几点建议——以林学类大学生科研实践为例

科研实践是提高大学生创新能力和综合应用能力的重要途径。通过对林学类大学生科研实践现状的分析，发现科研实践在创新型人才培养中的作用没有充分发挥，其主要原因是大学生对科研实践的意义认识不到位、科研训练中学生与教师互动少、理论课多，学生没有时间完成科研项目，同时学生主持或参与科研项目不计学分、科研训练管理与评价机制不够完善等。针对存在的问题，提出了改革的建议：加大宣传力度，使大学生真正认识科研实践的本质；强化大学生科研管理，提高科研训练实效性；深化教学改革，促进课堂教学与科研实践相融合；完善激励与评价机制，调动学生与教师的积极性；面向就业，增加创业训练和创业实践类项目比例，以此提高大学生的科研实践的成效。     

猪粪生产生物活性固体肥料的方法及产品特点

使用生物肥料,即能增产,又能改善品质,起到保护生态环境的作用,并且可以广泛利用城乡有机废弃物,如城市垃圾、污泥、畜禽粪便,桔杆等废弃物用生物工程新技术,生产生物肥料,使＂粮-肥-粮＂形成良性循环链条。因此,生物肥料已经成为发展生态家业的新肥源和新兴的肥料产业。1原材料腐化实施过程原料混合成堆。将各物料按照要求进行粉碎,然后按照猪粪比秸秆6∶4的比列及将腐化剂等其他辅助材料按照比列添加,将各物料混合均匀后,堆放在腐化线上。