布鲁氏菌BPE159基因缺失株的构建及BPE159蛋白对细胞自噬因子表达的影响

【目的】构建布鲁氏菌BPE159基因缺失株,研究缺失株体外生长变化特征及其在宿主细胞中的存活能力,探究布鲁氏菌感染期间分泌蛋白BPE159对自噬因子表达的影响。【方法】同源重组方法构建布鲁氏菌BPE159基因重组质粒,电转化布鲁氏菌S2308感受态细胞构建BPE159基因缺失株S2308ΔBPE159。PCR扩增BPE159基因,连接转化构建pBBR1MCS-4-BPE159载体,提取质粒进行电转化,构建BPE159基因回补株S2308ΔBPE159-C。琼脂糖凝胶电泳检测缺失株和回补株遗传稳定性。构建布鲁氏菌感染小鼠巨噬细胞RAW264.7模型,实时荧光定量PCR检测布鲁氏菌侵染后自噬细胞因子ATG5、Beclin1、LC3a和LC3b基因表达水平。以S2308、S2308ΔBPE159和S2308ΔBPE159-C株侵染小鼠巨噬细胞,收集细胞总RNA,实时荧光定量PCR检测BPE159基因缺失对布鲁氏菌侵染后自噬细胞因子表达水平的影响。在相同起始浓度下培养S2308、S2308ΔBPE159及S2308ΔBPE159-C株,观察细菌生长变化趋势;评价S2308ΔBPE159株在不同...     

基于网络流规划的内燃机曲轴与轴瓦选配方法

提出了一种基于网络流规划的选配方法,将解决网络最大流问题的方法运用到曲轴与轴瓦选配问题的求解中,建立选配网络,以获得曲轴与轴瓦的最优装配组合。并通过应用实例验证了该方法的优越性和可行性,提高了选配效率,并使不适配零件数量为最少。     

玉米ZmCOL3pro217启动子的克隆及功能分析

ZmCOL3是玉米开花期光周期调控网络中一个重要的功能基因,研究发现自然群体中该基因的启动子存在遗传变异,推测这些变异可能参与玉米开花调控。研究从热带血缘玉米材料CIMBL119中克隆了ZmCOL3启动子,命名为ZmCOL3pro217。序列比对发现,该启动子序列与温带血缘玉米B73序列存在1个217 bp大片段置换。生物信息学分析表明,ZmCOL3pro217含有分生组织特异性、光响应、胁迫响应等多个顺势作用元件,预测ZmCOL3pro217可能具有组织特异性,并通过响应光和胁迫反应参与玉米开花调控。进一步构建ZmCOL3pro217驱动gus报告基因表达载体,转化玉米,实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附剂测定、GUS组织化学染色等研究结果发现,转基因植株中ZmCOL3pro217驱动gus基因在根和叶器官中高表达,而在茎、花丝和子粒中几乎不表达,证实ZmCOL3pro217是1个新的组织特异性表达启动子。     

宜机化日光温室环境调控技术研究

基于北京市设施农业环境调控设备老旧、以人工控制为主、且数据缺乏应用的现状,本研究采用“宜机化新型日光温室建设+宜机化日光温室智能化提升+高效栽培模式示范”的技术路线,搭建了一套适用于日光温室的设施智能控制技术,智能调节日光温室环境参数,建立良好作物生长环境,提升生产水平,推动北京市设施农业向智能化、精准化方向发展。     

基于CO Ⅰ和Cytb基因的浙江不同抗性水平二化螟种群的遗传结构分析

本研究利用线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)和细胞色素b(Cytb)基因的遗传学方法分析了浙江省8个不同抗性水平二化螟地理种群的遗传多样性及种群遗传结构。种群遗传多样性分析表明：PCR扩增测序分别获得长度为627 bp的COⅠ基因片段和长度为455 bp的Cytb基因片段。355条同源COⅠ序列监测出了68个多态性位点,其中单突变位点22个,简约突变位点46个,共定义了85个单倍型,每个群体的平均单倍型为18.25个,其中瑞安(RA)种群中单倍型最多,为27个单倍型。326条Cytb同源序列监测出了45个多态性位点,其中单突变位点19个,简约突变位点26个,共定义了64个单倍型,每个群体的平均单倍型为14.375个,其中乐清(YQ)种群中单倍型最多,为25个单倍型。此外,各群体中最高的单倍型多样度h分别为0.896 3和0.934 4,反映出二化螟群体较低的遗传多样性水平。种群遗传结构分析表明：二化螟不同地理种群间遗传变异大多数来自于群体内个体间,占80.30%(COⅠ基因)和78.16%(Cytb基因)。较少部分的遗传差异来自于组间,仅占19.43%(COⅠ基因)和21.22%(C...     

5%大能防除小麦田杂草药效试验

应用先正达除草剂5%大能乳油进行小麦田除草的药效试验。结果表明,大能(2.5%炔草酯+2.5%唑啉草酸)对小麦田恶性杂草多花黑麦草具有显著的控制作用,药后60天调查,大能对多花黑麦草的防效达到85.52%,在多花黑麦草的化学防治中可以使用上述药剂。     

对黄土高塬沟壑区固沟保塬综合治理工作的回顾和思考

晋陕甘黄土高塬沟壑区是我国川滇—黄土高原生态屏障的重要组成部分,是我国农业发源地之一,是世界最佳苹果优生区,也是陕甘宁革命老区的重要组成部分。气候变化和人类活动对黄土塬区的侵蚀沟发育具有强烈的加速作用。当前,黄土塬面临的最大问题是不同程度的沟道侵蚀导致的沟头前进,沟底下切,沟壁崩塌、滑塌、泻溜,沟岸扩张,塬面逐步萎缩和破碎化。以甘肃庆阳董志塬为例,分析了黄土塬水土流失现状,从董志塬区固沟保塬、黄土高原塬面保护、高塬沟壑区固沟保塬综合治理三个层面回顾了固沟保塬综合治理工作的发展历程,总结了固沟保塬综合治理模式和措施配置,梳理了存在的问题并提出了建议,以期为筑牢黄土高原生态安全屏障,推进晋陕甘黄土高塬沟壑区生态优先、高效治理和高质量发展提供参考。     

新农村建设景观小品规划设计探讨

总结了景观小品规划设计的原则,主要是满足功能需求,反映地域文化内涵,创造意境,原生材料与新材料结合。结合抽样调查法和文献调查法,对内江市市中区尚腾新村、隆昌普润田园"花漫水乡"进行了实地调研,从景观规划思路、景观规划功能分区、植物配置3个方面总结了调研结果,认为景观小品设计缺乏内涵、布局混乱、缺少创意。提出了景观小品规划设计的建议,强调要体现乡土人文与地域性,以人为本,做到创意与乡土性相结合、因地制宜与节能相结合。     

信息服务“最后一公里”问题调研分析

该调研全面了解京郊涉农信息服务基础,摸清服务对象需求,对照农业农村部信息进村入户工程提出的“有场地、有设备、有网络、有人员、有网页、有可持续发展能力”的标准及村级服务站功能设定征求建议,解决信息服务“最后一公里”的问题,完善农村基础公益服务体系,为推动农业信息化健康发展奠定基础。