RT-PCR-ELISA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度的初步研究

目的 应用核酸扩增产物测定的固相杂交酶联显色法(RT-PCR-ELISA)检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法 应用RT-PCR-ELISA。将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物。与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色。读取吸光度(A值)。判断结果。应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度。并与常规细胞培养法(CCID50)比较。结果 本方法与细胞培养法的敏感性相仿，具有简便、快速、特异的优点。结论 RTPCR-ELISA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测。     

NOD小鼠胸腺细胞TCR介导的信号通路缺陷

目的 进一步研究NOD小鼠T细胞应答改变机理。方法 用抗TCR抗体、ConA激活NOD小鼠胸腺细胞，分析TCR介导的信号通路的水平。结果 与Balb／c小鼠胸腺细胞相比，抗TCR抗体诱导的增殖应答较弱，与年龄及NOD胸腺CD4^ CD8^-和CD4^-CD8^ SP细胞有关；rIL-2能部分恢复对TCR抗体应答的缺乏。NOD小鼠对PMA IONO和PMA anti—TCR-mAb应答正常，但对anti-TCRmAb IONO应答缺乏。结论 与年龄有关的NOD小鼠胸腺细胞对TCR抗体应答的缺乏与T细胞激活时上游PKC信号通路的缺乏有关。     

GPC-II-3液间歇低温灌流保存兔肺的形态学观察

目的探讨对移植供肺具有长期保护作用的新技术。方法用自制的GPC-Ⅱ-3液,以间歇低温灌流的方法保存兔肺24～192h,观察其组织结构的变化。结果保存120h以内的肺,其组织结构与对照组无明显区别,肺泡、各级支气管、血管的结构清楚、支气管上皮结构完整清楚,上皮细胞胞核清晰,染色质分布均匀、肺泡完整,肺泡上皮和毛细血管内皮清楚。部分肺泡腔中,可见结构清楚的尘细胞及其吞噬的粉尘颗粒;保存144h的肺,细胞成分的染色似乎有所加深,其余结构无明显变化。保存168h的肺,肺泡、各级支气管、血管的结构依然清楚,但细胞成分的染色有所加深,部分支气管上皮细胞有脱落现象。保存192h的肺,细胞成分的染色明显加深,有固缩迹象,支气管上皮有脱落现象加重。结论用GPC-Ⅱ-3液以低温冷藏的方法能够保存兔肺的组织结构120h。     

大学生电脑游戏成瘾量表的编制和信效度检验

目的:编制适合大学生使用的电脑游戏成瘾量表(CGAI),并检验其信效度。方法:对477份来自北京市8所大学大学生的CGAI测试结果进行探索性因素分析,对405份来自北京市5所大学大学生的CGAI测试结果进行验证性因素分析。结果:探索性因素分析获得33个条目的CGAI问卷,分为4个因素可解释总方差的55·1%,四个维度依次为:依赖/成瘾行为表现维度、情绪唤起维度、功能损害维度、对现状羞耻或不满维度;验证性因素分析验证了4因素模型,其结果为χ2/df=2·304;IFI=0·885;CFI=0·884;NFI=0·813;RSMEA=0·057。该问卷的内部一致性信度(r=0·77~0·94)、重测信度(r=0·907,P<0·001)和效标效度(成瘾组被试CGAI四维度评分均高于正常对照组)均符合测量学的要求。结论:该量表具有良好的信度和效度,可在大学生中使用。     

大鼠重组IgE Fc区CH2-3的原核表达及活性研究

目的 研究大鼠IgE的Fc区CH2-3的生物学活性。方法 构建大鼠IgE的Fc区CH2-3的原核表达质粒pBAD／gⅢA／Ch2-3，并转化入TOP10中，阿拉伯糖诱导表达、周质腔抽提、Ni-NTA金属鳌合柱纯化获得大鼠IgE的Fc区CH2-3，细胞及动物水平检测蛋白质生物学活性。结果 原核系统表达出大鼠IgE的Fc区CH2-3，它能够阻断OVA激发的RBL-2H3的脱颗粒反应，阻断被动皮肤实验。结论 大鼠IgE的Fc区CH2-3能够封闭IgE高亲和力受体，阻断过敏反应。     

血清乙型肝炎病毒DNA水平对HBV全基因组克隆效率的影响

目的：通过比较血清HBV DNA水平对一片段PCR法和两片段PCR法这两种不同方法的HBV全基因组克隆效率的影响，选择出合适的HBV全基因组克隆技术，供后续的HBV的基础和临床研究。 方法：采集了慢性乙型肝炎（CHB）患者85份血清，分别用本研究建立的一片段PCR法及两片段PCR法扩增HBV全基因组，经双酶切鉴定后将PCR产物克隆入载体，进行HBV全基因组序列测定。同时用实时荧光定量PCR法检测上述85份血清的HBV DNA滴度。 结果： 本研究建立的一片段PCR法扩增成功需要的血清HBV DNA浓度高于两片段PCR法,两种方法扩增的效率比较为：一片段PCR法扩增的阳性率低于两片段PCR法（P<0.01）。一片段PCR法的保真性和灵敏度分析发现： 保真性：核苷酸的人为突变率为1.13 bp/kb；灵敏度：为102个初始模板。浓度大于103的重组质粒DNA80%可以成功扩增，浓度低于该值的扩增效率比较低。结论： 血清HBV DNA水平对两种扩增方法的阳性率有一定影响，滴度高低是选择合适PCR扩增方法的依据。HBV DNA滴度大于106copies/L的样本，可选用一片段PCR法的全基因组扩增、克隆技术，而对HBV DNA滴度小于106copies/L样本，则可选用两片段PCR法的全基因组扩增、克隆技术。本研究建立的一片段PCR法扩增HBV全基因组克隆的技术是一种值得推荐的好方法，但还需进一步优化。     

从事心理咨询与治疗的教师与医生的专业伦理意识比较

目的：了解我国当前从事心理咨询与治疗的教师与医生的伦理意识现状,加强职业伦理教育的针对性。方法：采用问卷调查法,以译自Gibson和Pope在美国进行的全国伦理调查所用问卷为主体,对109名从事心理咨询与治疗的教师和医生进行调查。结果：在问卷的88个条目中,教师与医生在74个条目上差异无统计学意义,差异有统计学意义的条目有14条,如：教师与医生赞成“帮助来访者举报同事违反伦理规范的行为”的比例分别为67.3%、40.7%,赞同“在广播、电视等媒体上提供个人建议”的比例分别为81.8%、61.1%,认同“如果来访者无能力付费就终止咨询”的比例分别为29.1%、53.7%,认同“利用职务之便为自己的私人诊所招收来访者”的比例分别为7.3%、20.4%。不同性别与年资的教师与医生在部分条目上存在显著差异。结论：我国当前从事心理咨询与治疗的教师与医生的伦理意识总体倾向较为一致,但在某些条目上存在显著差异。职业环境和过去的职业培训经历可能是导致差异的主要原因。     

蛋白质组学在心血管研究中的应用

随着基因组数据库的不断完善和蛋白质组学技术的不断发展，已有越来越多的研究者将蛋白质组学运用到心血管疾病研究中，即运用2—DE、质谱等手段来观察心肌缺血、高血压、心肌肥大、心衰、心肌梗塞导致的心肌细胞蛋白质表达水平和翻译后修饰(PTM)的改变，对这些急慢性心血管疾病的分子机制给予独特的解释。与此同时，各种心血管疾病模型相关蛋白质组数据库也在建设之中，这将大大方便更多的蛋白质组研究。本文综述了近年来使用蛋白质组学在心血管研究中所取得的进展。     

皮肤涂抹雌三醇对裸鼠甲状腺功能和肿瘤影响的效果观察

目的研究经皮涂抹外源性雌三醇(E₃)对裸鼠甲状腺功能及甲状腺移植瘤的影响。方法使用123只4周龄裸鼠,按体质量采用随机数字表法分为9组:①对照组、②低E₃组、③高E₃组、④乳头状甲状腺癌组(PTC组)、⑤乳头状甲状腺癌+高E₃组(PTC+高E₃组)、⑥滤泡状甲状腺癌组(FTC组)、⑦滤泡状甲状腺癌+高E₃组(FTC+高E₃组)、⑧未分化型甲状腺癌组(ATC组)和⑨未分化型甲状腺癌+高E₃组(ATC+高E₃组),均正常饮食饮水。除对照组、PTC组、FTC组和ATC组外,其余5组每日给予皮肤涂抹雌三醇乳膏,低E₃浓度为市售化妆品人均每日使用量中雌三醇含量的25倍、高剂量为100倍。40天后,收集各组裸鼠的24h尿样;尿碘采用砷铈催化分光光度法测定,尿E₃、血清E₃、血清甲状腺激素[游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)]和甲状腺抗体[甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TpoAb)],采用酶联免疫吸附实验[ELISA]测定。在接种肿瘤后的第4日起,每3 d测量肿瘤大小。结果①各组裸鼠血清E₃和尿E₃水平比较差异有统计学意义;其中FTC+高E₃组和ATC+高E₃组的血清E(310.22、14.18 pmol/L)和尿E(36.40、8.18 pmol/L)水平均分别显著低于FTC组和ATC组的血清E(326.52、22.80 pmol/L)和尿E(38.91、11.49 pmol/L)水平;而PTC+高E₃组仅血清E₃水平(12.17 pmol/L)显著低于PTC组(23.05 pmol/L);高E₃组的尿E₃水平显著低于低E₃组(6.92、8.94 pmol/L);低E₃组的尿E₃水平显著高于对照组(8.94、7.17 pmol/L),PTC组、FTC组和ATC组的血清E₃水平显著高于对照组和高E₃组(23.05、26.52、22.80比13.23、14.46 pmol/L)。②各组血清FT3水平比较差异没有统计学意义。各组血清FT4和TSH水平与对照组比较,差异均有统计学意义,其中各实验组的FT4水平均显著低于对照组,TSH水平均显著高于对照组,但PTC组与PTC组+高E₃组、FTC组与FTC+高E₃组、ATC组与ATC+高E₃组分别进行两两比较,FT4和TSH水平并差异无统计学意义。③各组裸鼠血清TgAb和TpoAb水平比较差异均有统计学意义。其中低E₃组、高E₃组、PTC+高E₃组、FTC组、ATC组和ATC+高E₃组的TgAb水平均显著高于对照组;各实验组的TpoAb水平均显著高于对照组。④各组裸鼠尿碘水平比较差异没有统计学意义。⑤各组裸鼠肿瘤体积大小比较差异均有统计学意义,PTC+高E₃组与PTC组比较,在接种肿瘤后的第7 d、16 d、25 d、28 d和37 d,肿瘤体积发生显著性差异(71.54、226.05、730.26、893.34、1242.12比49.87、325.50、551.28、664.38、967.78 mm³);FTC+高E₃组与FTC组比较,在接种肿瘤后的第25 d、28 d、37 d和40 d,肿瘤体积发生显著性差异(392.60、475.70、794.68、943.51比214.82、238.32、422.19、490.00 mm³);ATC+高E₃组与ATC组比较,在接种肿瘤后的第37 d和40 d,肿瘤体积发生显著性差异(217.53、432.10比577.19、1146.66 mm³)。结论外源性雌三醇能够诱导裸鼠发生甲状腺功能减退和抗体水平增高,同时对乳头状甲状腺癌和滤泡状甲状腺癌的生长有着促进作用,对未分化甲状腺癌的生长有抑制作用。     

医院应急医用物资管理实践与效果分析

医院作为应对突发公共卫生事件的主战场,应急医用物资保障能力至关重要。针对突发公共卫生事件中应急医用物资需求复杂、时间紧迫、专业性强等特点,从应急医用物资的产品目录、需求预判、灵活储备、动态调整和供应商考核评分机制等方面,构建了医院应急医用物资管理流程,提升了医院应对突发公共卫生事件的综合管理能力。