丝虫特异IgG4检测试剂盒的研制

目的 建立丝虫特异IgG4检测试剂盒，根据检测不同样本的敏感性、特异性及重复性，评价其用于丝虫病防治后期流行病学调查和疾病监测的价值。方法 利用细胞融合技术制备抗人IgG4单克隆抗体，对试验的各环节和条件进行探索，结合商品化的酶免疫试剂制作工艺研制一种敏感、特异，操作简便，经济实用的丝虫特异IgG4检测试剂盒，并对丝虫病病人、其它寄生虫病病人和健康对照血清以及滤纸血样本进行检测。结果 68例丝虫病病人特异IgG4阳性64例，阳性率为94．1％；38例正常人及60例其他寄生虫病病人检测全部阴性；对丝虫病病人血清和滤纸血检测结果基本一致。该试剂盒操作简单，检测本底很低，结果鲜明，易于判断。结论 该试剂盒适于丝虫病防治后期的流行病学调查和疾病监测。     

临床病态图像在疾病诊断中的应用价值

诊断学是横跨在基础医学与临床医学之间的一座桥梁,是临床医学的核心,也是临床各专业的基础,更是培养临床思维的关键,其重要性不言而喻。随着现代医学的迅猛发展,诊断学融合了多学科的知识和技术,近年来逐渐形成几十个相对独立的学科。现代医学发展日新月异,诊断技术也不断更新,新概念、新理论不断涌现。一位优秀的临床医生,不仅要熟练地掌握和运用诊断学的基本知识,更要适应时代的发展,尽快熟悉和运用诊断学的最新理论和技术。面对现代医学的进步,如何既能发挥专业领域中的技术优势,又可避免目前临床分科过细的弊端,严防知识碎片化、局限化,是现代医学面临的一个重要问题。临床病态图像作为一种最为直观的临床征象,在疾病诊断中具有很高的应用价值,同时也能避免分科过细带来的不足。本文主要就临床病态图像与望(视)诊的重要价值进行深入探析。     

应用DNA探针检测蚊体内疟原虫的研究

本文用生物素标记的克隆ＤＮＡ探针，以斑点杂交法检测蚊体内恶性疟原虫。将一组蚊虫在还原性缓冲液中研磨后集体检测时，在２５只蚊中有１只感染蚊即可检出，亦可将单个蚊虫直接压在硝酸纤维素膜上进行检测。本技术的高特异性、敏感性以及试剂的稳定性等表明，它可作为一个适用的流行病学调查工具。     

干燥贮存的基因工程藻杀灭淡色库蚊幼虫的实验研究

目的 :观察干燥贮存的基因工程藻对淡色库蚊幼虫的杀灭效果。方法 :干燥、贮存和毒性测试。结果 :3种转基因工程藻经干燥贮存后仍具有较高杀蚊毒效 ;但随着贮存时间的延长 ,其杀灭作用有所下降。 3种转基因工程藻之间杀蚊幼效果无明显差异。结论 :蓝藻质粒在干燥贮存的工程藻内仍能稳定遗传 ,因而利于现场推广应用     

斑点免疫结合试验检测恶性疟抗体

我们用斑点结合试验(DIA)检测恶性疟抗体,并与间接荧光抗体试验(IFA)进行比较,结果证明该法具有经济、操作方便、特异性和敏感性高的特点。现报告如下。1.受检对象:实验组受检血清46份,其中恶性疟16例,间日疟30例。对照组81份,     

机械通气在严重多发伤的应用(附10例报告)

严重多发伤继发成人呼吸窘迫综合征 (ＡＲＤＳ) ,病死率可达 70 .5 % [1] 。我院近 3年来对 10例严重多发伤患者给予机械通气治疗 ,有效地防治了ＡＲＤＳ ,现报告如下 :1　资料与方法1.1　临床资料　本组男 8例 ,女 2例 ,年龄 15～ 5 8岁 ,平均32 .8岁。车祸致伤 5例 ,坠落伤 3例 ,被他人击打或锐器刺伤 2例。所有伤员均为伤后 12ｈ内入院。主要伤是 :颅脑、胸部、肺挫伤血气胸 6例。腹部闭合性多发性损伤 4例 ,合并创伤性休克 8例。按多发伤诊断标准 ,ＩＳＳ评分≥ 16分者 10例 ,ＧＣＳ≤ 8分者 2例。 10例均有呼吸困难 ( 30～ 5 0 /ｍｉｎ…     

34例外伤性肝破裂的诊治体会

我院１９９０年元月至１９９６年１２月共收治外伤肝破裂３４例,现报告如下。１临床资料１．１一般资料本组３４例,其中男３０例,女４例,年龄最小１６岁,最大６４岁,平均２８．３岁。受伤原因：车祸撞伤１６例,高处坠落伤９例,锐器伤６例,牲畜致伤２例,枪击伤１...     

猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B3基因的原核表达、纯化以及免疫反应性分析

目的将猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B3基因进行原核表达,分析重组蛋白的免疫反应性。方法根据Ts8B3基因序列设计引物,以囊尾蚴RNA反转录的cDNA为模板PCR扩增Ts8B3基因,扩增产物经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切后连接至原核表达载体pGEX-4T-1,将重组质粒转化入大肠埃希菌DH5α(E.coli DH5α),PCR、双酶切筛选阳性质粒,测序确认后转化至E.coli BL21,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表达产物。纯化重组蛋白,以囊虫病人血清为一抗,采用Western blot分析其免疫反应性。结果 PCR扩增Ts8B3基因片段为201bp,双酶切和测序显示重组表达质粒构建成功。重组质粒转化BL21后经IPTG诱导4h,以包涵体的形式表达相对分子质量单位(Mr)为33×103的目的蛋白。纯化的重组蛋白能被囊虫病患者血清识别。结论成功构建Ts8B3基因重组质粒,表达的重组蛋白具有免疫反应性,为进一步研究该蛋白在抗体检测中的应用奠定了基础。     

山东省14例输入性卵形疟原虫wallikeri亚种的鉴定

目的 对山东省14例输入性卵形疟原虫wallikeri亚种进行鉴定分析。方法 收集14例输入性疟疾病例,进行快速疟疾诊断试纸条检测(RDT)、血涂片镜检、NP-1993常规巢式PCR鉴定和卵形疟原虫wallikeri(P. ovale wallikeri)亚种的特异性PCR检测。PCR扩增产物测序后,进行Blast比对分析。结果 14例患者RDT检测结果:泛疟原虫(非恶性疟)阳性12例,阴性2例;镜检结果,13例卵形疟原虫,1例间日疟原虫;NP-1993常规巢式PCR结果,14例样本4种疟原虫引物扩增结果均为阴性。P. ovale wallikeri亚种的特异性PCR检测结果:14例样本均能扩增到P. ovale wallikeri亚种特异性条带780 bp。Blast分析测序结果,检索结果为P. ovale wallikeri亚种。结论 14 例镜检阳性、NP-1993常规巢式PCR检测阴性的输入性疟疾病例均确诊为P. ovale wallikeri亚种感染。     

弓形虫TgMIC16多克隆抗体制备 纯化 及其在亚细胞定位中的应用

目的 制备并纯化弓形虫微线蛋白16（TgMIC16）兔源多克隆抗体,并利用制备的多克隆抗体对该蛋白进行亚细胞定位。方法 利用原核表达、纯化的TgMIC16重组蛋白与等体积弗氏佐剂混合,背部皮下、多点注射免疫新西兰大白兔,于第3次加强免疫后的第14天收集兔血清,Protein A亲和纯化柱纯化,用ELISA和蛋白质印迹（Western blotting）分别检测抗体效价和抗体特异性。用弓形虫RH株速殖子感染人包皮成纤维（HFF）细胞,以制备的多克隆抗体为一抗,采用间接免疫荧光（IFA）检测TgMIC16 在感染细胞中的定位。结果 间接ELISA 结果显示,制备的TgMIC16多克隆抗体滴度为1∶512 000;Western blotting 结果显示,TgMIC16抗体特异性良好;IFA结果显示,TgMIC16定位在弓形虫微线体。结论 本研究制备并纯化了抗弓形虫TgMIC16兔源多克隆抗体,并成功应用于TgMIC16在弓形虫微线体的免疫荧光定位。