脓毒症大鼠循环及组织内毒素的动态变化

目的:探讨脓毒症时组织内毒素的分布特征及其与多器官损害的关系.方法:采用盲肠结扎穿孔(CLP)致大鼠脓毒症模型,分别于伤前及伤后2、8、16h测定血浆及组织内毒素含量.结果:CLP后2h血浆内毒素含量急剧增加,约为术前值的17.1倍,其后迅速下降;伤后组织内毒素水平均不同程度上升,其中以肝组织升高幅度最大.肝组织内毒素水平于8h达峰值,肺组织内毒素则持续升高,而肾组织其含量各时相点无显著性差异(P＞0.05).同时,反映肝、肺、肾等脏器功能指标均呈现不同程度的异常改变;相关分析表明,血浆内毒素与肺组织髓过氧化物酶活性显著正相关(P＜0.01).结论:CLP后循环内毒素水平急剧升高,并迅速分布至肝、肺、肾等组织,引起局部组织内毒素积聚;而组织内毒素可刺激机体炎症反应,参与脓毒症的发病过程.     

急性坏死性胰腺炎时肠屏障损害及肠源性细菌和内毒素移位的实验研究

目的 观察急性坏死性胰腺炎（ANP）时肠粘膜屏障的改变和肠源性细菌和内毒素移位。方法 将Wistar大鼠随机分为正常对照组（n=6)、假手术组（n=30)和ANP组（n=39)。采用人工胆汁胰管逆行灌注法制作ANP模型。观察胰腺、小肠病理改变和小肠粘膜上皮细胞间紧密连接（冷冻蚀刻电镜）变化。动态测定血浆D-乳酸、内毒素水平,以及腹腔脏器细菌移位率。结果 ANP后小肠粘膜损伤,皮皮细胞间紧密连接破坏甚至消失,血浆D-乳酸水平上升,发病早期即出现内毒素血症;ANP发生后72h脏器细菌移位率达到59.5%。结论 ANP早期肠粘膜屏障功能受损。导致肠道细菌和内毒素移位,成为全身炎症反应和胰腺继发感染的根源。     

高迁移率族-1 蛋白在烫伤后金葡菌脓毒症中的改变与意义

目的 探讨高迁移率族－1（HMG－1）蛋白在烫伤后金黄色葡萄球菌（简称金葡菌)脓毒症中的变化规律及其调控机制。方法 采用大鼠20％体表面积Ⅲ度烫伤复合金葡菌攻击所致脓毒症模型。70只动物随机分为正常对照组（n=10）、烫伤对照组（n＝10）和烫伤后金葡菌感染组（n＝50）,留取肝、肺组织检测HMG－1及脂多糖结合蛋白（LBP）mRNA表达 ,同时测定组织中金葡菌肠毒素B（SEB）和内毒素含量。结果 烫伤后金葡菌感染可导致动物肝、肺组织HMG－1基因表达明显升高,于伤后6－12h达峰值（P＜0．05－0．01）,至24h仍持续于较高水平。相关分析显示,肝、肺组织LBP基因表达与相应脏器HMG－1mRNA表达呈显著正相关（分别为r＝0．800,P＝0．031和r＝0．942,P＝0．002）,但内毒素与之无明显相关性。结论 烫伤后金葡菌感染可导致动物体内HMG－1基因表达上调,后者作为“晚期炎症介质”可能参与了脓毒症的发病过程。     

金黄色葡萄球菌肠毒素B单克隆抗体对烫伤脓毒症大鼠急性肺损伤的影响

目的探讨金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)肠毒素B(SEB)单克隆抗体(单抗)对烫伤脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用。方法雄性Wistar大鼠56只随机分为正常对照组(n=10)、烫伤对照组(n=10)、烫伤后金葡菌感染组(n=20)和SEB单克隆抗体(单抗)拮抗组(n=16)。测定肺组织SEB水平、髓过氧化物酶(MPO)活性、肿瘤坏死因子(TNF)-α和干扰素(IFN)-γ表达的改变。结果烫伤后金葡菌脓毒症动物肺脏SEB含量明显升高,伤后2、6h分别为66.85ng/g组织和92.46ng/g组织,与正常对照组(14.26ng/g组织)和烫伤对照组(17.32ng/g组织)相比均为P＜0.01;同时,肺组织MPO活性显著增强,峰值可达7.39U/g组织,与正常对照组(2.09U/g组织)相比P＜0.05。与之相应,肺组织MPO活性显著增强(P<0.05)。同时,局部组织IFN-γ和TNF-α基因及其蛋白质表达明显上调(P<0.05),并与肺脏SEB含量呈高度正相关(分别为r=0.9207、P=0.0033和r=0.8142、P=0.0258)。SEB单抗早期干预可有效降低肺组织中SEB含量,并显著抑制IFN-γ和TNF-α的产生,肺脏病理改变亦明显减轻。结论SEB单抗干预可抑制IFN-γ和TNF-α等炎症介质的产生,从而显著减轻烫伤后金葡菌对机体的损害。     

己酮可可碱对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及机理

目的：探讨己酮可可碱（PTX）对腹腔感染致脓毒症时急性肺损伤的保护作用及其机理。方法：采用盲肠结扎穿孔致脓毒症模型,将42只大鼠随机分为对照组6只,脓毒症组18只和PTX治疗组18只,检测肺组织生物喋呤（BH4）合成限速酶－三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ（GTP－CHI）,诱生型一氧化氮合酶（iNOS)和肿瘤坏死因子－α（TNF－α）mRNA的表达,同时测定肺组织BH4、一氧化氮（NO）的含量及髓过氧化物酶（MPO）活性的变化。结果：脓毒症早期给予PTX治疗可有效抑制腹腔感染后2、8h肺组织TNF－α mRNA表达和伤后2h MPO活性;同时,治疗组2h肺组织BH4,NO含量及GTP－CHI mRNA,iNOS mRNA表达均显著降低。结论：早期应用PTX对脓毒症后急性肺损伤具有明显保护作用,该效应与PTX抑制BH4,NO的诱生相关。     

胃肠外科术后肠道细菌移位的临床研究

目的 探讨胃肠外科手术后肠黏膜屏障损伤与肠道细菌移位(BT)及BT与感染并发症之间的关系.方法 34例择期胃肠外科手术患者,于术前2h和术后2、24、48h采集外周血,进行全血细菌DNA、血D-乳酸、内毒素(LPS)浓度检测及血细菌培养.观察患者30天以监测感染并发症情况.结果 术前PCR检测全血细菌DNA均为阴性,术后共有7例阳性.术后出现全身炎症反应综合征(SIRS)的患者PCR阳性率为38.9%,无SIRS组为0%(P＜0.01).PCR阳性组SIRS发生率为100%,阴性组为40.7%(P＜0.01).PCR阳性者85.7%发生感染并发症,阴性者无一发生(P＜0.01).术后血细菌培养阳性率5.9%,显著低于PCR的检测结果(20.6%,P＜0.01);血培养阳性者,PCR检测均呈阳性.PCR阳性结果中大肠杆菌DNA占71.4%.PCR阳性的患者外周血血浆D-乳酸及LPS浓度较PCR阴性者明显升高(P＜0.01),且二者呈显著正相关(r＝0.89,P＜0.01).结论 胃肠外科术后肠黏膜屏障损伤与BT关系密切,术后早期(2h)即可发生BT,以大肠杆菌为主,术后SIRS和感染并发症与BT密切相关.     

生长抑素减轻大鼠急性坏死性胰腺炎的肠屏障损害

目的　观察生长抑素对大鼠急性坏死性胰腺炎 (ANP)肠屏障损害和肠道内毒素移位的影响。方法　采用胰管逆行灌注法复制大鼠ANP模型 ,随机分为正常对照组 (n =6 )、假手术组(n =18)、ANP组 (n =2 0 )和生长抑素治疗组 (n =19)。观察胰腺病理、血淀粉酶、肿瘤坏死因子(TNFα)和白细胞介素 (IL) 1β、肠上皮细胞间紧密连接、肠通透性 (血浆D 乳酸 )、循环内毒素和病死率的变化。结果　生长抑素减轻了ANP早期胰腺病理改变〔8h组织学评分由 (4 2± 0 3)降至 (2 0±0 4) ,P <0 0 1〕 ;72h血淀粉酶由 (6 2 31± 44 6 1)U/L降至 (2 6 48± 1798)U/L ,P <0 0 5 ;72hTNFα由(4 7± 2 4)pg/ml降至 (2 3± 2 1)pg/ml,IL 1β由 (10 3± 40 )pg/ml降至 (5 0± 2 4)pg/ml,P均 <0 0 5 ;肠上皮细胞间紧密连接的破坏减轻 ;2 4h血浆D 乳酸由 (14 7± 4 9) μg/ml降至 (8 0± 4 2 ) μg/ml,P <0 0 1;2 4h血浆内毒素由 (0 6 11± 0 2 10 )EU/ml降至 (0 336± 0 110 )EU/ml,P <0 0 1;ANP大鼠 72h病死率由 5 9%降至 17% ,P <0 0 5。结论　生长抑素可减轻ANP大鼠的肠屏障损害 ,对肠道内毒素移位有抑制作用 ,可降低ANP大鼠的病死率。     

多粘菌素B和杀菌/通透性增加蛋白对烫伤大鼠肠道细菌易位和肿瘤坏死因子α基因表达的影响

目的：比较两种不同内毒素拮抗剂——多粘菌素Ｂ和杀菌／通透性增加蛋白（ＢＰＩ）对大鼠烫伤后肠道细菌易位和组织肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）基因表达的影响。方法：采用大鼠３５％体表面积Ⅲ度烫伤模型,动物随机分为正常对照组（８只）、烫伤组（２４只）、多粘菌素Ｂ治疗组（７只）和ＢＰＩ治疗组（６只）。结果：大鼠烫伤后肠道细菌易位率明显上升,伤后８小时细菌易位率达３７．１％,与正常对照组比较差异显著（Ｐ＜０．０１）;细菌易位率最高的器官是肠系膜淋巴结,不同器官易位细菌量无显著性差异;给予烫伤大鼠多粘菌素Ｂ和ＢＰＩ治疗均可不同程度地降低细菌易位率,其细菌易位率分别降至烫伤８小时组的６１．７％和５３．９％;ＢＰＩ比多粘菌素Ｂ更为有效地降低肠、肾等组织ＴＮＦαｍＲＮＡ表达水平（Ｐ均＜０．０１）。结论：多粘菌素Ｂ和ＢＰＩ均可降低大鼠烫伤后肠道细菌易位的发生;ＢＰＩ较多粘菌素Ｂ能更有效地抑制多种组织ＴＮＦαｍＲＮＡ表达。因此,烧伤早期应用ＢＰＩ治疗对抑制创伤后机体过度炎症反应具有重要意义。     

小型猪火器伤时肠道细菌移位的检测

我们通过常规细菌培养、免疫组织化学和聚合酶链反应 (PCR )方法检测小型猪火器多发伤后血中及脏器中的细菌 ,对火器多发伤时检测肠道细菌移位的方法进行探讨。一、材料与方法1.实验动物及分组 :成年 (15± 5 )个月贵州Ⅲ系小型香猪 2 4只 ,体重 (2 5±5 )kg。动物随机分为 4组 (每组n =6) ,其中对照组 (C组 )模型制作术后不致伤 ;多发伤组 (M组 )模型制作术后 2d射击双侧大腿和颅顶骨 ,造成双侧股骨干骨折加颅骨切线伤 ;颅骨切线伤组 (H组 )射击致颅骨切线伤 ;骨折组 (L组 )射击致双侧股骨干骨折。2 .监测指标和方法 :(1)体循环血和门静…     

细胞外基质重塑在大鼠慢性阻塞性肺病模型气流阻塞中的作用

目的制备大鼠慢性阻塞性肺病(COPD)模型,探讨气道细胞外基质(ECM)重塑的病理特点及其在气流阻塞中的作用,以及不同干预因素的影响.方法熏香烟加气管注小量内毒素法建立大鼠COPD模型,观察气道重塑的病理特点,测定肺功能及血气,气道各层横截面积,支气管肺组织匀浆羟脯氨酸(Hy)含量;粘膜下成纤维细胞(Fb)、淋巴细胞及肺泡巨噬细胞计数;放免法测定血清中透明质酸、层粘连素含量.观察蛋白激酶C抑制剂H7,氧自由基清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)和转化生长因子(TGF)-β单抗干预对大鼠模型气道重塑的影响.结果所建模型的病理及病理生理学改变基本符合人类COPD特点,Ⅰ型胶原为主的ECM气道壁过度沉积;小支气管上皮层、平滑肌层截面积较对照组显著增大,三个干预组上述指标较模型组显著降低;模型组粘膜下Fb、淋巴细胞及肺泡巨噬细胞数较对照组显著增高,Fb功能活跃.NAC组及TGF-β单抗组Fb、三个干预组淋巴细胞及肺泡巨噬细胞数较模型组显著降低;模型组Hy含量较对照组显著增高,且分别与FEV0.3/FVC%呈显著负相关、与吸气及呼气阻力呈显著正相关,粘膜下Fb与Hy含量呈显著正相关,H7组Hy含量显著高于模型组,NAC组和TGF-β单抗组较模型组显著降低;血清层粘连素及透明质酸含量较对照组显著增高.结论气道壁以Ⅰ型胶原为主的ECM过度沉积及Fb增生活跃是COPD气道重塑的主要病理改变之一;清除氧自由基和拮抗TGF-β均可减轻气道ECM重塑,抑制PKC不能减少气道壁胶原的沉积.