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内毒素性急性肝损伤实验动物模型的建立 总被引:11,自引:2,他引:11
目的:探讨脂多糖(LPS)对D-半乳糖胺(D-GalN)致敏大鼠在亚致死剂量下的肝损伤作用.方法:48只大鼠随机分为三大组,即6h、24h和48h取材组,每组各16只动物;每个大组再分为两个小组,即处理组和对照组,各8只大鼠.所有处理组大鼠均以LPS(50μg/kg) D-GalN(300mg/kg),用1mL无菌生理盐水溶解后腹腔内注射,对照组大鼠仅腹腔内注射1mL生理盐水.在相应时间点,采血查谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和胆红素(BIL);肝组织常规固定,HE染色后光镜检查;肝组织细胞凋亡的TUNEL分析采用多聚甲醛固定;肝组织炎性细胞因子TNF-α、IL-1b和细胞凋亡诱导基因bax的表达通过RT-PCR的方法检测.结果:所有处理组大鼠ALT、AST和TBIL在6h内即显著升高,24h达到峰值,48h仍维持于高水平;肝脏大体形态显示:肝脏明显肿胀、失去正常红润光泽而略显苍白、表面见散在的点状及片状出血点、质地偏韧;HE染色可见药物处理6h,肝组织即呈现充血,碎片状坏死和大量炎性细胞浸润.24h肝细胞开始空泡变性、肿胀,并见大片坏死及中性粒细胞浸润.48h则多数肝细胞空泡状变性,肝组织小叶结构紊乱,点状坏死,炎症细胞浸润较前减少.TUNEL分析显示,对照组未见凋亡的肝细胞,6h处理组仅见少量凋亡细胞,凋亡指数(AI)为4.3±1.2%,24h和48h处理组肝组织内则见较多的凋亡细胞,AI分别为20.6±3.3%、21.2±5.7%,但两者P>0.05;24h处理组凋亡细胞百分数为15.83%,对照组凋亡细胞占0.39%,两组间存在显著差异(P<0.001);处理组各时间点TNF-α、IL-1b的表达均较对照组显著升高,其高峰值出现于6h.对照组未见bax的表达,而LPS的应用后6,24,48h的相对表达率为0.193±0.062、0.191±0.043、0.209±0.031.结论:亚致死剂量LPS可造成D-GalN致敏大鼠的急性肝损伤;细胞凋亡是该急性损伤的重要病理形态学改变,而凋亡的发生可能与LPS诱导bax的表达有关;本模型是较理想的内毒素性急性肝损伤的实验动物模型. 相似文献
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目的探讨本组抗NMDA受体脑炎患者的临床特点。方法收集北京丰台右安门医院和北京宣武医院神经内科2012年10月至2015年4月收治的45例抗NMDA受体脑炎患者的临床资料,分析病例特点,随访病情转归。结果本组的45例患者年龄为14~61岁,平均年龄32.2±13.24岁;男性27例,其中3例(11%)合并肿瘤。女性18例,其中5例(28%)合并卵巢畸胎瘤。23例(51%)出现前驱症状。本组45例临床症状表现为精神症状(91%)、癫痫发作(76%)、不自主运动(42%)、中枢性低通气(24%)、意识水平下降(47%)及自主神经功能障碍(40%)。脑脊液(CSF)常规、生化检查阳性率为89%,所有患者CSF抗NMDA受体抗体阳性。脑电图(EEG)多表现为双额、颞、中央导联为主的轻度(21%)至中度(59%)慢波。53%患者头颅CT平扫或MRI检查有异常表现,多见于额颞叶T2-Flair异常信号。所有患者均给予激素和丙种球蛋白治疗,6例患者接受环磷酰胺或吗替麦考酚治疗。除1例失访,44例患者预后良好(MRS评分0-2分)者占86%。结论抗NMDAR脑炎发病男性并不少见,肿瘤合并率低。以精神行为异常、癫痫发作、CSF抗NMDA受体抗体阳性为其主要临床特点。绝大部分患者EEG异常,并与病情严重程度相关。79%患者一线免疫治疗效果良好。8例合并肿瘤患者病情严重且预后不良,畸胎瘤摘除术不能完全预防该病发生,但能减轻病情严重程度。 相似文献
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122例特发性血小板减少性紫癜血小板输注疗效观察 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者临床血小板输注的指征.方法:比较122例ITP患者输注血小板和未输注血小板的临床转归;比较血小板输注前及输注24 h后血小板计数.参照PAIg,分析抗体与血小板输注疗效的相关性.结果:67例未输注血小板的患者中,有2例PLT<10×109/L的患者发生严重出血危及生命,55例输注血小板的惠者,有17例(31%)PLT较输注前降低,其中7例输注后PLT<10×109/L,未发生严重出血;ITP患者血小板输注无效率86%,PAIg升高患者血小板输注无效率升高,有统计学差异.结论:如无明显的出血症状,ITP血小板输注指征建议PLT<10×109/L,应输注少白细胞同型单采血小板制荆. 相似文献
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目的:克隆大鼠原癌基因pim-3并构建真核表达重组质粒pEGFP-N2/pim-3,观察他在真核细胞SMMC-7721中的表达情况以及对细胞凋亡的影响.方法:利用TRIzol从液氮保存的大鼠骨骼肌组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法获取pim-3 cDNA,并构建重组质粒pEGFP-N2/pim-3,转化用CaCl2法制备的大肠杆菌JM-109菌株,酶切以及测序鉴定.将重组质粒通过脂质体介导转染肝癌SMMC-7721细胞后利用倒置荧光显微镜观察基因表达情况,并利用流式细胞术及MTT比色实验对转染细胞的生物学行为进行检测.结果:将RT-PCR产物全部用于低熔点琼脂糖凝胶电泳、回收,在DL 2000 Marker 1000 bp附近可见清晰条带,与实验设计符合;阳性克隆质粒的酶切电泳和测序结果表明,大鼠pim-3 cDNA的克隆和重组质粒pEGFP-N2/pim-3的构建成功;重组质粒pEGFP-N2/pim-3转染组凋亡细胞占3.5%,质粒pEGFP-N2转染组凋亡细胞占10.7%,而仅加入转染液的空白组凋亡细胞占11.0%,重组质粒转染组与两对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);倒置荧光显微镜可以观察到pim-3在SMMC-772 1细胞中的正常表达;MTT比色实验显示原癌基因pim-3能够明显抑制细胞凋亡.结论:真核表达重组质粒pEGFP-N2/pim-3构建成功;原癌基因pim-3能明显抑制肝癌细胞凋亡. 相似文献
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对26例骨质疏松性椎体压缩性骨折患者采用术前心理护理、全面查体;PVP手术;术后密切观察病情变化,预防并发症,积极指导功能锻炼。本组患者术后症状明显改善,且全部恢复生活自理能力;96%的患者对手术治疗结果满意。围术期的良好护理能减少术后并发症的发生,更好地恢复患者的日常生活能力,是手术成功的重要保证。 相似文献
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目的研究核基质结合蛋白SATB1对人原发性肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法脂质体介导pEGFP1 SATB1真核表达全长基因质粒转染人原发性肝癌HepG2细胞,分为实验组(pEGFP1 SATB1)、对照组(pEGFP1空载体)及空白对照组。RT PCR、Western blot检测转染后SATB1mRNA和蛋白表达变化情况,噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪检测SATB1全长基因转染对人原发性肝癌HepG2细胞生长、增殖的影响。结果与空白对照组及对照组比较,转染pEGFP1 SATB1后,HepG2中SATB1mRNA和蛋白表达明显增加,细胞生长曲线检测结果表明转导入pEGFP1 SATB1细胞增殖明显加快,细胞数明显增多;流式细胞仪检测结果表明,细胞周期中G0/G1期细胞明显减少,S、G2/M期细胞明显增多。结论SATB1能明显促进HepG2细胞增殖,其机制可能与参与调控细胞周期各期DNA复制、转录有关。 相似文献
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目的构建人MTDH基因的shRNA干扰载体,并观察其对原发性肝癌细胞HepG2骨架重排的影响。方法针对MTDH基因的不同部位设计3对shRNA的寡核苷酸片段,克隆到载体pGCsilencerTM H1/Neo中,RT-PCR、Western blotting及免疫荧光检测转染后MTDH mRNA和蛋白表达变化情况,并筛选最佳抑制效率的shRNA干扰载体,并将其转染人原发性肝癌细胞HepG2,用罗丹明标记的鬼笔环肽显示沉默MTDH基因后对人原发性肝癌细胞HepG2骨架蛋白F_actin的改变。结果靶向MTDH干扰质粒构建成功。与转空载体的阴性对照组及未转染组比较,转染pGCsilencerTM H1/Neo-MTDH-shRNA后,HepG2中MTDH mRNA和蛋白表达明显降低,其中以pGCsilencerTM H1/Neo-MTDH-S1最为明显,达到90%以上;细胞形态及细胞骨架显示转染pGCsilencerTMH1/Neo-MTDH-S1的细胞骨架蛋白F_actin发生重排。结论成功构建并筛选最佳抑制效率的靶向MTDH干扰pGCsilencerTM H1/Neo-MTDH-S1,该载体能有效重排肝癌细胞骨架。 相似文献
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目的:探讨洋葱皮提取物对离体蟾蜍心肌收缩力和心率的影响及其机制。方法:根据斯氏蛙心插管方法,分别用浓度为0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg/m L的洋葱皮提取物灌流离体蟾蜍心脏,采用BL-420生物机能实验系统记录心率和心肌收缩力的变化情况;分别加入低钙、正常钙、高钙任氏液和0.000 5 mg/m L维拉帕米,5分钟后充分灌洗,再分别加入低钙、正常钙、高钙任氏液配制的洋葱皮提取物以及0.000 5 mg/m L维拉帕米与洋葱皮提取物的混合物,记录5分钟心率和心肌收缩力的变化情况。结果:灌流0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/m L的洋葱皮提取物的离体蟾蜍心率变化不大(P0.05),但离体蟾蜍心肌张力峰峰值先逐渐升高,约1分钟达高峰,而后逐渐下降,5分钟时仍高于加药前心肌张力峰峰值(P0.05),表明蟾蜍心收缩力呈现出典型的先升高后下降的趋势,且具有明显的药物浓度依赖性;0.000 5 mg/m L维拉帕米、低钙任氏液对蟾蜍心脏具有负性肌力的作用,且洋葱皮提取物能够拮抗其对心肌的抑制作用,高钙任氏液对离体心脏具有正性肌力作用,而洋葱皮提取物能够增强其对心脏的正性肌力作用。结论:洋葱皮提取物可使离体蟾蜍心脏心肌收缩力先升高后下降,且有药物浓度依赖性,但是对心率影响不大,且其兴奋心肌的作用机制可能与激活L-型钙通道有关。 相似文献