丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞的进一步研究

为进一步研究外周血单个核细胞 (PBMC)感染丙型肝炎病毒 (HCV)的状况。用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)、地高辛标记 HCV探针作原位杂交和链酶亲和素 -生物素 (SABC)作免疫组化三项技术 ,检测血清和 PBMC中的 HCV RNA和 HCV NS5 抗原。结果显示 RT- PCR检测的 2 0例慢性丙型肝炎患者 ,除去 4例接受干扰素治疗者 ,余16例中有 14例 (87.5 % )血清 HCV RNA阳性 ,2例血清 HCV RNA阴性者的 PBMC- HCV RNA阳性。对 RT- PCR检测的 9例 PBMC- HCV RNA阳性患者 ,进一步用原位杂交和免疫组化技术 ,分别检测 PBMC中的 HCV RNA和HCV NS5 抗原。显示这几种方法的检测结果是基本一致的 ,呈正相关关系。患者的 PBMC中的 HCV RNA和 HCV NS5抗原呈散在颗粒状或弥漫分布 ,主要位于胞浆中 ,HCV NS5 抗原还分布于胞膜上。证实 HCV可以感染 PBMC,并在其中复制 ,复制部位在胞浆。     

γ干扰素对血吸虫病小鼠肝纤维化的影响(英文)

目的探讨γ干扰素对日本血吸虫性肝纤维化的影响．方法用链酶亲和素生物素化过氧化物酶复合物技术，观察６０只感染日本血吸虫小鼠及３０只健康鼠不同时期肝内γ干扰素及细胞外基质的量及分布，以及给予重组γ干扰素后它们的动态变化．结果肝内γ干扰素于感染后１６周达高峰（３只鼠分别达２＋，３＋及４＋级），高于感染鼠８周～１２周时的水平（Ｐ＜００１），主要分布在虫卵肉芽肿周围．大多数感染鼠的纤维连接蛋白、层连蛋白、Ⅰ及Ⅲ型胶原于感染后８周增加达１＋级，个别达２＋级，均高于健康对照（Ｐ＜００１），呈细线状分布在肉芽肿周围。随着感染慢性化及γＩＦＮ减少，这些基质蛋白及胶原逐渐增加，分别于２０及２４周达到高峰（７０％以上小鼠达３＋～４＋级），且增宽变厚，呈条索状或网状沉积在肉芽肿周围及其内。注射γＩＦＮ后，２０周时ＦＮ达２＋级者仅３例，２４周时Ⅰ及Ⅲ型胶原达３＋级者均为２例，无一例达４＋级，明显低于同期非注射组（Ｐ＜００１～００５）．结论γＩＦＮ可能有对抗虫卵肉芽肿的炎症反应，减少细胞外基质的分泌和沉积，从而抑制肝纤维化形成的作用．     

乙型肝炎免疫发病机制的研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)感染期间造成肝细胞损伤的原因一般认为不是病毒本身直接作用的结果,因为乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性的健康带毒者肝内堆积有较多病毒颗粒,但无明显组织病理学改变。因而认为肝细胞损伤是机体对病毒的免疫反应所致。主要有两种免疫机制。①抗病毒免疫;②对肝组织的自身免疫。前者包括对病毒的体液免疫和细胞免疫,后者为对由病毒感染或其他因素触发的自身靶抗原的免疫反应。     

商陆抗病毒蛋白体外对HepG2.2.15细胞HBV复制的影响

目的　探讨商陆抗病毒蛋白 (pokeweedantiviralprotein ,PAP)体外抗乙型肝炎病毒 (HBV)的活性。方法　以不同浓度的PAP S作用于培养的HepG2 .2 .15细胞 ,采用ELISA、荧光定量PCR法分别检测细胞上清液中的HBsAg、HBeAg及HBVDNA水平的变化 ,并用MTT比色法检测细胞成活率。结果　随着PAP S浓度的增加 ,对HBsAg、HBVDNA的抑制作用亦逐渐增强 ,不同药物剂量组之间差异十分显著 (P <0 .0 1)。PAP S处理后 96h ,PAP S对HBsAg和HBeAg的半数抑制浓度 (ID50 )分别为 6.9μg/ml和 3 .2 μg/ml ,半数中毒浓度 (CD50 )为 2 9.3 μg/ml,治疗指数 (TI) =ID50 /CD50 分别为 4.3和9.3。MTT试验结果显示 ,药物的细胞毒性也呈剂量依赖型 ,倒置显微镜下观察在 5 0 μg/ml～ 10 0 μg/ml剂量组出现部分细胞脱壁和死亡现象。结论　PAP S在体外有直接的抗HBV作用。。     

HCV感染外周血单个核细胞及其对T淋巴细胞亚群的影响

目的：研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的情况及其对Ｔ淋巴细胞亚群的影响。方法：运用非同位素原位杂交（ＮＩＳＨ）法和链酶亲和素－生物素（ＳＡＢＣ）法分别检测２０例慢性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中的ＨＣＶ－ＲＮＡ和非结构（Ｎｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ,ＮＳ）蛋白ＮＳ５抗原,同时用ＳＡＢＣ法检测其Ｔ淋巴细胞亚群。结果：８例（４０．０％）患者的ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ呈构（Ｎｏｎｓｔｒｕ     

Detection of Replicative Form of HCV RNA in Peripheral Blood Leukocytes and Its Clinical Significance

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＲｅｐｌｉｃａｔｉｖｅＦｏｒｍｏｆＨＣＶＲＮＡｉｎＰｅｒｉｐｈｅｒａｌＢｌｏｏｄＬｅｕｋｏｃｙｔｅｓａｎｄＩｔｓＣｌｉｎｉｃａｌＳｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅＨＥＹｏｎｇ－ｗｅｎ（贺永文）；ＦｅｒｅｎｃｉｋＳ；ＬＵＯＤｕａｎ－ｄｅ（罗...     

日本血吸虫感染小鼠肝脏IL-2、TNF-α的表达及注射该因子后对肝纤维化的影响

目的 探讨小鼠感染日本血吸虫后不同时期肝脏白细胞介素2(IL-2)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达水平及注射该因子后对肝纤维化的干预。方法 小鼠感染血吸虫尾蚴后分3组,每组16只,其中2组于感染6wk后分别隔日注射(ip)IL-2和TNF-α连续4wk,另设未感染正常鼠为对照组,采用ABC免疫组织化学技术,利用多媒体病理图文定量分析,动态观察相关因子活性。结果 感染未处理组小鼠肝脏中IL-2和TNF-α含量随感染时间(8、11、14、18wk)延长而缓慢下降,而感染6wk后经腹腔注射IL-2或TNF-α组小鼠则随着相应因子的补充而显著上升,末次注射后1～8wk,肝内IL-2或TNF-α水平明显高于感染组和正常对照组(P<0.01),肝组织肉芽肿炎症反应及纤维化程度较对照组减轻。结论 小鼠6wk后(成虫排卵后)给予外源性IL-2或TNF-α注射,能诱导相应细胞因子表达增强,并有减轻肝脏炎症和肝纤维化的表现。