我国五省美洲钩虫COI基因序列多态性分析

目的测定和比较四川、海南、云南、湖北、江苏五省美洲钩虫细胞色素氧化酶Ⅰ(COI)基因序列,分析基因序列的多态性。方法应用PCR技术扩增美洲钩虫COI基因,并进行DNA测序和分子进化分析。结果五省的美洲钩虫COI基因序列相似性为97％～99％,但在其PCR扩增获得的595bP的COI基因片段上,共检出19个核苷酸位点上的变异,变异位点上转换明显多于颠换,基因序列差异值为1.34％～2.18％。结论五省的美洲钩虫COI基因序列具有很高的相似性,但特定碱基位点仍存在一定差异。     

Dot—ELISA检测抗丝虫抗体的初步实验研究

本文报告以马来丝虫成虫可溶性抗原作Dot-ELISA检测丝虫病人抗丝虫抗体的初步结果。62例马来丝虫微丝蚴血症者的阳性符合率为96.8％,49例班氏丝虫微丝蚴血症者的阳性符合率为85.7％,50例和39例非流行区正常人的假阳性率分别为4.0％和5.1％,与钩虫和蛔虫混合感染者的血清有一定的交叉反应。实验结果显示,Dot—ELISA检测微丝蚴血症者抗丝虫抗体具有敏感性高,且方法简便,可望用于丝虫病监测。     

二种快速ELISA用于检测囊虫病患者血清特异性抗体的实验观察

用快速ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ和快速ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测囊虫病人血清抗体，其阳性率分别为９０．００％和９４．２９％，两虫之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。两法假阴性率分别为１．４３％和２．８６％，对包虫病人血清出现较强交叉反应，对肝吸虫、肺吸虫病人血清出现一定程度的交叉反应，而对血吸虫病人、绦虫病人血清未出现交叉反应。若两种方法同时使用可提高敏感性。两种方法均较简便，在包虫病非流行区可作为较好的流行病学调查筛检方法，亦可用于临床     

日本血吸虫微粒体抗原的研究 Ⅲ.成虫微粒体抗原在ELISA中的应用

<正> 1982年我们用差速离心法从日本血吸虫成虫中分离得到的微粒体粗抗原(JAMAC)用于ELISA表明其抗原活力远比成虫可溶性抗原(JSAA)为高。根据中美医药卫生科技合作协议,同年10月美国疾病控制中心曾凯(V.Tsang)来我所共同对JAMAC做进一步提取和分离,得到了尿素溶解部分(JMC)和提纯的微粒体抗原(JAMA)。用ELISA对血吸虫抗体进行检测时,JAMAC、JMC和JAMA三种抗原均呈现高的敏感性和特异性。由于JAMAC的制备方法较简便,无需柱层分离步骤,我们采用这一抗原对     

中国与日本不同地域品系日本血吸虫蛋白组分的SDS-PAGE和EITB分析

目的： 补充观察我国浙江、江西、台湾省和日本山梨的日本血吸虫成虫的蛋白组分, 以及上述４ 地和安徽、湖北、四川、云南省血吸虫与广西省钉螺和日本钉螺抗血清的反应性。方法： 采用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳 （ＳＤＳ－ＰＡＧＥ） 和酶联免疫电转移印迹 （ＥＩＴＢ） 分析。结果与结论： 浙江、江西、台湾省和日本的血吸虫隔离群雄虫及雌虫抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后, 以考马斯亮蓝染色结果分别可见７～１７ 条（江西省和日本的血吸虫雄虫条带显色很淡） 及１～６ 条显色带;银染结果分别可见１４～２３条及４～１９ 条（台湾省的血吸虫雌虫仅见１条极淡的）显色带。台湾省血吸虫雄虫与浙江省血吸虫雄虫谱型相似, 但在８１ ｋＤａ以上组分有所不同, 江西省血吸虫雄虫５４ｋＤａ 条带明显, 日本的血吸虫雄虫不仅条带少, 谱型也与浙江、江西及台湾省的血吸虫各异。ＥＩＴＢ结果： 所试血吸虫成虫与广西省钉螺和日本的钉螺抗血清均产生反应, 证明存在交叉反应抗原组分。所试血吸虫成虫与广西省钉螺和日本的钉螺间存在共同抗原组分。     

斑点金免疫渗滤法在检测囊虫抗体中的应用

目的　将斑点金免疫渗滤法用于检测囊虫抗体 ,以制备囊虫病诊断试剂盒。方法　经透析的猪囊尾蚴囊液作为检验抗原 ,对 71份囊虫病患者、90份正常人和 2 0份其他病患者血清进行了斑点金免疫渗滤法检测并与酶联免疫吸附法比较。结果　斑点金免疫渗滤法的敏感性为 90 .1% (6 4 / 71) ,特异性为 95 .6 % (86 / 90 ) ,其他病患者血清反应中仅 1例脑肿瘤患者血清阳性 ,其余为阴性。斑点金免疫渗滤法和酶联免疫吸附法的符合率为94 .4 % (15 2 / 16 1)。结论　斑点金免疫渗滤法有较好的应用于临床检测囊虫病的潜力     

斑点—ELISA法在肺吸虫病诊断中的应用

自1986年我们报告用斑点-ELISA法诊断血吸虫病以来,该法往国内已应用于黑热病、华支睾吸虫病、疟疾、包虫病等的诊断,都获得较为满意的结果。认为该法具有敏感、特异、简单易行、试剂用量少、不需特殊     

中国大陆日本血吸虫品系的研究Ⅺ.酶联免疫...

Antigens prepared from S. japonicum adult worms of different isolates i. e. Anhui, Hubei, Guangxi, Yunnan and Sichuan by origin were analyzed by enzyme linked immunoelectrotransfer blot (EITB) probed with rabbit anti-snail antibody (Figs 1,2). Anti-sera against Oncomelania h. hupensis from Anhui, Hubei, Yunnan and Sichuan localities were prepared separately and used in the tests. The EITB patterns were similar in S. j. isolates of Anhui and Hubei, and it was also the case among S. j. isolates of Yunnan and Sichuan except Yunnan female worms with a marked band of 84 kDa but it was almost invisible in EITB pattern of Sichuan female worms. Like Yunnan isolate, female worms of Guangxi isolate also showed marked 84 kDa bands. The EITB pattern of male worms from Guangxi isolate showed 2 main bands of mw > 130 kDa against anti-Anhui snail anti-serum, which corresponded with the male worms of Anhui isolate whereas the color of the bands was darker and denser in the former isolates, and these bands can not be seen in the male worms from isolates of Yunnan and Sichuan. Based on the above mentioned results in connection with the information about the susceptibility between different isolates of schistosomes and their snail hosts which we have reported before, some preliminary analysis and discussion were made.     

多房棘球蚴病特异性诊断抗原Em18的基因克隆、表达和血清学评价

目的　克隆从我国四川省分离的多房棘球绦虫Em18抗原基因片段,表达重组抗原,用于多房棘球蚴病(AE)的诊断,并用患者血清对其诊断价值进行评价。　方法　PCR扩增目的基因片段与质粒载体pET28a(+)连接构建表达质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株表达重组蛋白,用镍次氮基三乙酸琼脂糖树脂(NI NTAagarose)亲和层析纯化重组抗原,酶联免疫吸附测定(ELISA)评价重组抗原的血清学诊断效果。　结果　获得两个高效表达克隆ReEm181和ReEm182。其中ReEm181与预期序列一致,ReEm182为同一序列,但有27bp的核苷酸缺失。两个克隆表达的融合蛋白相对分子质量(Mr)分别为28000和26000。对101例AE、47例细粒棘球蚴病、30例囊尾蚴病、10例肝癌、9例血吸虫病和40名健康人共237份血清进行ELISA检测 ,结果显示,ReEm181和ReEm182重组抗原对AE血清诊断的敏感性为861%和901%、特异性为934%和941%、阳性预期值为906%和919%、阴性预期值为901%和928%、诊断效率分别为903%和924%;对58例AE患者肝脏病灶大小与重组抗原检测血清平均吸光度(A)的相关性比较分析结果表明,抗体反应水平在病程早期有较好的相关性。　结论　Em18重组抗原对AE具有特异性诊断价值