胰腺癌新基因S100P与绿色荧光蛋白融合基因慢病毒载体的构建

目的:构建胰腺癌新基因SLOOP与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒载体.方法:实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增获得SlOOP的全外显子片段.使之克隆到带GFP荧光报告基因慢病毒表达载体质粒中,慢病毒包装质粒和穿棱质粒共转染293T细胞,包装成功后收集上清,浓缩,鉴定.取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞和宿主胰腺癌细胞.荧光显微镜观察293T细胞的荧光表达,RT-PCR鉴定胰腺癌细胞中SLOOP的表达水平.结果:电泳鉴定结果与目的基因表达条带完全吻合,克隆测序结果与NCBI收录的S LOOP基因序列完全一致.重组慢病毒质粒可高效转染293T细胞.荧光显微镜下可观察到大量绿色荧光.共转染后293T细胞上清可高效感染293T细胞,感染后宿主细胞中S LOOP高表达.结论:成功构建了S LOOP与GFP融合基因慢病毒表达载体,为进一步研究SLOOP基因的相关功能提供了适合的稳定转染载体.     

胰腺癌化疗多药耐药研究进展(文献综述)

胰腺癌化疗多药耐药是影响其化疗效果的重要因素 ,其机理目前尚未完全明了 ,本文结合其他肿瘤耐药研究的一些内容 ,综述胰腺癌耐药的研究进展。     

重组腺病毒介导的反义血管内皮生长因子对胰腺癌细胞生长的抑制作用

目的构建表达反义VEGF165的重组腺病毒,探讨腺病毒介导的VEGF165反义核酸治疗胰腺癌的可行性.方法应用基因重组技术,将513 bp的人VEGF1 65 cDNA反向克隆到腺病毒粘粒载体pAxCAwt的Swa I酶切位点.重组粘粒与腺病毒DNA末端肽复合物混合后以磷酸钙共沉淀法转染293细胞,制备出表达反义VEGF165的重组腺病毒.建立胰腺癌裸鼠皮下种植瘤模型,瘤体内直接注射重组腺病毒,观察肿瘤的生长及血管生成情况.结果成功构建了反义VEGF165腺病毒粘粒载体pAxCAwt-αVEGF,并制备出高滴度的反义VEGF165重组腺病毒,注入胰腺癌瘤体内后,治疗组肿瘤生长速度比对照组明显减慢(P＜0.01),治疗组肿瘤微血管密度也明显减少(P＜0.01).结论反义VEGF165重组腺病毒可以抑制胰腺癌的血管生成和肿瘤生长,有潜在的应用价值.     

游离肠系膜上动脉对提高胰腺钩突癌切除彻底性的临床意义

目的 观察游离肠系膜上动脉、切除肠系膜根部的扩大胰十二指肠切除术对累及肠系膜根部胰腺钩突癌的手术效果.方法 2004年1月至2007年12月为23例(男14例,女9例,年龄30～72岁)累及肠系膜根部的胰腺钩突癌患者施行了合并游离肠系膜上动脉、切除肠系膜根部的扩大胰十二指肠切除术,对手术方法 、手术安全性及手术疗效进行分析.结果 12例患者施行了肠系膜根部切除的扩大胰十二指肠切除术,11例同时施行了肠系膜上静脉的切除和重建.平均手术时间(4.2±1.1)h,术中出血量(1 635±1 362)ml,术中输血量(1 609±1 462)ml.全组患者无手术死亡,6例出现轻至重度腹泻,术后住院天数9～30 d.病理示,肿瘤直径3～8 cm,合并淋巴结转移13例(57%),神经浸润20例(87%),22例手术切缘均为阴性,11例血管切除患者中有10例血管内膜浸润.随访5～42个月,4例发生肝转移,3例局部复发,1年、2年的累积生存率分别为77.2%和42.5%.结论 通过游离肠系膜上动脉,对肠系膜根部组织、肠系膜上动脉周围神经以及广泛后腹膜组织的切除可以提高胰十二指肠切除术治疗胰腺钩突癌的手术彻底性,有效降低肿瘤残留,减少局部复发.手术方法 是安全的.     

超声内镜对胰腺癌诊断及评估价值

目的探讨EUS诊断胰腺癌的敏感性、准确性及其评估肿瘤特征的价值.方法以126例经病理确诊并在确诊前半月内先后接受EUS、US、CT检查的胰腺癌患者为研究对象,回顾性分析三种成像方法及EUS对于不同类型胰腺癌的检查结果,应用t检验或u检验评估这些检查结果的差异有无显著性.结果 EUS诊断胰腺癌准确性较US高,尤其对于小胰腺癌准确性更高,二者差异有显著性(P<0.05);EUS诊断敏感性、准确性与CT比较差异无显著性;联合应用EUS及CT检查,则诊断敏感性及准确性大为提高,与单独应用US、EUS或CT相比,差异均有显著性(P<0.05);EUS与CT显示肿瘤间接征象的准确性无显著性差异.结论 EUS对于胰腺癌是一种较好的检查方法,尤其对于怀疑为小胰腺癌者应作为常规检查.联合应用EUS和CT检查胰腺癌值得推广.     

DNA芯片技术及其在肿瘤研究中的应用

DNA芯片技术是一项新兴的生物学技术,可在基因组水平上高通量地对基因的表达、突变和多态性进行快速、准确的检测.肿瘤的形成、发展是多步骤、多基因参与的复杂过程,应用DNA芯片技术在基因组水平上对肿瘤进行研究,可以了解肿瘤细胞基因表达谱的改变,解释肿瘤发生、发展的分子机制,为肿瘤的分子病理诊断、临床肿瘤预后判断及治疗方案的选择提供理论指导.本文综述了DNA芯片的技术原理及近年来在肿瘤研究中的应用.     

Ki67在胰腺癌淋巴结转移中的临床意义

[目的]分析Ki67表达与胰腺癌淋巴结转移及预后可能存在的联系,探讨Ki67表达在胰腺癌淋巴结转移中的临床意义.[方法]总结42例胰腺癌手术切除并行区域淋巴结清扫病例的淋巴结分站转移情况,应用免组化学、RT-PCR以及Western-blot等方法学检测胰腺癌组织Ki67表达的情况,分析Ki67表达与淋巴结转移情况、病理临床指标以及预后的关系.[结果]有淋巴结转移者32例(76.2%),胰腺癌的直径、病理和临床分级、有无淋巴结转移及转移的远近均与Ki67增殖指数呈正相关(P<0.05).本组患者5年生存率为7.5%,胰腺癌患者的生存期与淋巴结转移远近呈负相关(P<0.05).[结论]胰腺癌组织Ki67表达升高,Ki67增殖指数升高及淋巴结转移距离提示患者可能预后不佳.     

胰腺囊腺癌临床病理特征分析

胰腺囊腺癌临床较为少见,约占胰腺癌总体的5%～10%[1].研究认为,胰腺囊腺癌恶性程度相对较低,肿瘤常有纤维包膜,手术切除率较高,预后较好.近年国外报道的囊腺癌术后5年生存率已达63%[2].本文对52例胰腺囊腺癌患者的临床资料进行分析,试图找出胰腺囊腺癌的若干特点.     

胰腺癌组织中p53、血管内皮生长因子的表达与血管生成的关系及其临床意义

目的 探讨胰腺癌组织中p53、血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成的关系。方法 用免疫组织化学方法检测48例胰腺癌组织及癌旁组织、6例正常胰腺组织中p53、VEGF表达和微血管密度(MVD)。结果 胰腺癌组织中VEGF、p53的阳性表达率分别为54.17％和50％,显著高于癌旁组织及正常组织的表达率(P<0.01),胰腺癌组织中MVD显著高于癌旁组织及正常组织。VEGF表达与肿瘤大小和分期有关(P=0.038,P=0.045),VEGF表达与MVD有相关性(r=0.294 P=0.043)。p53与淋巴结转移及预后相关(P<0.05)而与VEGF、MVD之间无关。MVD与胰腺癌临床病理特征无关,MVD与生存期存在负相关(r=0.371 P=0.011)。多元回归分析显示p53、VEGF和MVD都不是影响胰腺癌预后的独立因素。结论 p53基因突变为胰腺癌分子事件的晚期事件,可作为评价胰腺癌预后的一项指标,抗血管生成可能有利于胰腺癌的治疗。     

胰十二指肠切除术前实验室检查与术后早期并发症相关性分析

目的总结胰十二指肠切除术前实验室检查与术后早期并发症的相关性。方法回顾2008年1月至2009年12月间共410例行胰十二指肠切除术的临床病理资料,分析术后并发症的发生情况及其与术前实验室检查的相关性。结果本组术后早期并发症发生率为17.8%(73/410)。Logistic回归分析表明,手术前WBC升高(OR=1.1)、贫血(Hgb110 g/L,OR=2.3;Hct0.37,OR=1.5)、低白蛋白血症(OR=1.7)、BUN(OR=1.8)和Cr升高(OR=1.3)以及AKP正常(OR=0.7)均是术后早期发生并发症的重要危险因素。结论胰十二指肠切除术在胰腺病治疗中的并发症发生率已较以往下降,术前完善实验室检查可以帮助外科医生预判胰十二指肠切除术后发生早期并发症的危险因素,从而更好地进行手术风险评估。