铜过量负荷导致肝细胞凋亡及其对Bax Bcl-2基因表达的影响

目的：建立肝豆状核变性铜过量负荷大鼠模型，并研究肝铜沉积对肝细胞凋亡及Bax，Bcl-2基因表达的影响。方法：建立铜过量负荷大鼠模型，检测肝脏和血清铜以及血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）含量；用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记(TUNEL)技术、RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测铜过量负荷大鼠肝细胞凋亡、凋亡相关基因Bax，Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平，并利用图像分析系统观察阳性细胞的变化规律。结果：随着铜负荷时间的延长，铜过量负荷大鼠肝组织铜含量、血清ALT水平逐渐升高，同时肝细胞的凋亡也逐渐增多，凋亡指数（AI）逐步升高。铜过量负荷大鼠肝组织Bax基因的表达水平明显高于对照组，且随着铜负荷时间的延长有升高趋势；Bcl-2基因的表达水平高于对照组，且随着铜负荷时间的延长也有升高趋势，但升高幅度低于Bax，故Bcl-2与Bax的比值（Bcl-2/Bax）随着铜负荷时间的延长而降低。结论：成功建立肝豆状核变性铜过量负荷大鼠模型，铜过量负荷通过相对上调促凋亡基因Bax表达水平来诱导肝细胞的凋亡。     

宫内炎性暴露对胎鼠及早产大鼠肺血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的 观察宫内炎性暴露对胎鼠及早产大鼠肺血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体-1(Fms-like tyrosine kinase receptor,Flt-1)和受体-2(fetal liver kinase receptor,Flk-1/KDR)表达的影响,探讨其与新型支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的关系.方法 定期受孕的SD大鼠随机分为脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组(LPS组)和生理盐水组(对照组),于孕15 d分别向羊膜腔内注射LPS或无菌生理盐水.两组动物均于胚胎19 d及早产鼠出生后第1、3、5、7天各随机取8只仔鼠,采用免疫组织化学方法 和RT-PCR技术检测肺组织VEGF及Flt-1、Flk-1蛋白及mRNA表达水平.结果 对照组肺组织中VEGF及Flk-1的蛋白表达自胚胎19 d至生后7 d逐渐升高,LPS组VEGF蛋白表达在胚胎19 d(0.1550±0.0101)和生后1 d时(0.1368±0.0035)较对照组低(0.1872±0.0110和0.1812±0.0040)(P《0.05).两组生后1 d时的Flt-1蛋白表达均高于胚胎19 d时(P《0.05).LPS组Flt-1蛋白表达在各时间点均较对照组高(P《0.05),而Flk-1表达在各时间点均较对照组低(P《0.05).mRNA的表达与相应蛋白表达的强度变化基本一致.结论 宫内炎性暴露可降低胎鼠及早产大鼠出生早期肺组织中VEGF及Flk-1的表达,可能是导致新型BPD发生的重要因素.     

原发性肝癌介入治疗与多药耐药基因表达的关系

目的探讨原发性肝癌中多药耐药基因编码的P．糖蛋白（Pgp）表达对介入治疗疗效的影响。方法60例原发性肝癌按介入药物不同将患者分为TAE＋MMC＋ADM组（A组）20例，TAE＋5-FU＋DDP组（B组）20例和TArE＋LAK细胞组（C组）20例，采用链霉亲合索．生物素酶复合物（streptavidin-bioton complex，SABC）免疫组化方法检测Pgp表达。结果60例患者中Pgp阳性27例（45．0％），Pgp阴性33例（55．0％）；A、B、C组Pgp阳性表达率分别为9例（45．0％）、8例（40．0％）和9例（45．0％），Pgp阴性表达率分别为11例（55．0％）、12例（60．0％）和11例（55．0％）；A、B、C组Pgp阴性表达有效率为10例（50．0％）、9例（45．0％）和8例（40.0％），Pgp阳性表达5例（25．0％）、5例（30．0％）和5例（25．0％）；三组的Pgp阴性表达的有效率均高于Pgp阳性表达（均P〈0．05）。结论Pgp表达是影响介入疗效的重要因素，治疗前检测Pgp表达对制定个体化治疗方案有重要意义。     

大鼠海马齿状回外侧支的再可塑性

目的中枢神经系统呈现长时程增强（LTP）和长时程抑制（LTD）的能力与其早期的突触活性有关，这种更高形式的可塑性称为再可塑性。探究预先刺激是否对齿状回外侧支的突触可塑性产生调节。方法用各种预先刺激和条件刺激对脑切片的场电位进行记录。结果不影响基本突触传递的10 Hz预先刺激能使外侧支随后的LTP明显减弱，而不影响LTD。这种作用在体外能维持2 h以上。当预先刺激作用于苔状纤维进行反向刺激时，外侧支的LTP也被抑制。结论在生理条件下常见的10 Hz预先刺激能导致长时间的LTP而非LTD减弱。这种形式的再可塑性有助于深入了解齿状回突触活动调节的复杂性。     

ICU患者家属心理需求调查分析

目的探讨患者在ICU接受监护期间，其家属的心理需求。方法对我院150例ICU收治患者的家属进行心理需求问卷调查。结果ICU患者家属对患者的安全、治疗与预后、患者病情发展较为关注，家属认为最不重要的需求是对自身舒适的需求。结论护理人员应重视与患者家属的交流与沟通，及时提供患者病情信息并解答提出的问题，关心其家属的身心健康，构建良好的护患关系，减少护患矛盾及护理纠纷，达到增强患者支持系统的目的。     

重症发热伴血小板减少综合征诊治专家共识

[摘要]?自2010年以来,发热伴血小板减少综合征（SFTS）发病率逐年增高。随着对SFTS诊疗能力的提高,我国SFTS整体病死率下降,但重症患者病死率仍较高。为提高对重症SFTS患者的临床救治能力,国家重大公共卫生事件医学中心组织专家,结合近十余年SFTS的基础与临床研究相关文献资料以及专家诊疗经验,讨论并形成本共识,为进一步提高重症SFTS的临床救治成功率提供指导性意见。     

Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒探针的制备及其在检测乙型肝炎病毒DNA中的应用

目的制备Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus deoxynucleic acid,HBV DNA)基因探针,研究其在检测HBV DNA中的应用.方法分别用枸橼酸还原金氯酸法、化学共沉淀法制备Au、Fe3O4纳米颗粒,二法结合制备Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒.通过金-硫(Au-S)共价键,将烷氢硫醇修饰的寡核苷酸结合在Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒上,制备纳米颗粒HBV DNA基因探针.用荧光标记法检测纳米颗粒探针表面寡核苷酸的覆盖率和与其互补的寡核苷酸的杂交效率.在尼龙膜上,使用Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒基因探针通过斑点杂交法、Ag染色法检测HBV DNA.在纳米颗粒基因探针液相检测体系中加入HBV DNA,透射电镜下观察.结果制备的Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒粒径均匀,为(15±5)nm,水相分散良好,具有磁性.Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒基因探针表面寡核苷酸的最大覆盖率为(120±8)条,最大杂交效率为(14±2)%.斑点杂交法可检出低至1010copies/ml的合成靶DNA,可目视化检出乙肝患者血清中HBV DNA的PCR产物.在液相检测体系中加入HBV DNA,透射电镜观察到纳米颗粒组装成大的网状结构的聚集体.结论成功制备了Fe3O4(核)/Au(壳)纳米颗粒HBV DNA基因探针,它可直接用于HBV DNA的检测.     

副脾的CT诊断与误诊原因分析

目的:探讨副脾的螺旋CT影像特征及其误诊原因分析.方法:对23例经手术病理或临床随访证实的副脾患者的CT典型与不典型表现及临床资料进行回顾分析.结果:23例中,单发17例,多发6例.左侧肾上腺区11例,脾周或脾区12例.1例副脾伴梗死表现为均匀囊性病灶,无强化;其余22例CT均表现为平扫呈大小不等的软组织结节,密度均匀,边界清晰,CT值均在45 HU以上;增强后均匀明显强化,增强程度均在50 HU以上.结论:副脾有典型的影像学表现及常见发生部位,多数可在术前作出明确诊断,但副脾毗邻肾上腺或有伴发病变者常致术前误诊.     

少血供转移性肝肿瘤滋养动脉超选择性化疗栓塞的疗效观察

目的评价少血供肝转移性肿瘤超选择性滋养动脉插管并完全性栓塞治疗的临床疗效。方法在DSA的引导下,对75例少血供肝转移性肿瘤病灶滋养动脉超选择性插管并完全性化疗栓塞。结果75例共202个被栓塞病灶在术后2～3月CT复查,189个病灶被碘油完全性充填、11个病灶大部被碘油充填、2个病灶碘油充填欠佳。159个病灶明显缩小、41个病灶部分缩小、2个病灶缩小不明显。术后6、12、24、36月及3～5年生存率分别为100%(75/75)、85.3%(64/75)、55%(41/75)、42.7%(32/75)、20%(15/75)。结论高度选择性滋养动脉插管并完全性化疗栓塞是一种对转移性肝肿瘤治疗的有效方法。     

促红细胞生成素对坏死性小肠结肠炎TLR4、NF-κB及IL-6变化的影响

目的观察促红细胞生成素(EPO)对新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型TLR4、NF-κB及IL-6动态变化的影响,探讨EPO对NEC的保护作用及机制。方法 90只3日龄SD大鼠随机分为3组(每组30只):正常对照组、NEC模型组和EPO干预组。采用鼠代乳品人工喂养、缺氧冷刺激建立新生大鼠NEC模型。EPO干预组采用代乳品中添加EPO(0.1U/ml)人工喂养,同时行缺氧冷刺激。正常对照组鼠乳喂养,不进行任何干预。各组于造模后24、48、72h分别处死10只大鼠切取末端回肠3cm,HE染色后观察肠组织病理学变化并进行组织损伤评分,组织学评分≥2分确定为NEC。分别采用荧光定量PCR和ELISA法检测肠组织TLR4 mRNA、NF-κB mRNA和IL-6的动态变化。结果 NEC模型组TLR4 mRNA在24h出现高表达,峰值在48h和72h略有下降,各时间点表达值均较正常对照组明显升高(P<0.01)。EPO干预组24h出现高表达,但随后迅速下降,48h和72h表达值明显低于NEC模型组(P<0.01)。NEC模型组NF-κB mRNAI、L-6表达值在48h和72h明显高于正常对照组(P<0.01);EPO干预组在48h也出现高表达,72h明显低于NEC模型组(P<0.01)。48h内各组动物均未出现组织病理损伤,72h后NEC模型组和EPO干预组出现组织损伤,NEC模型组评分(2.83±0.56)明显高于EPO干预组(1.53±0.35,P<0.01)。结论新生大鼠NEC模型中先天免疫应答启动早于获得性免疫应答,炎症反应早于肠道组织损伤。经肠道给予生理浓度的EPO可下调TLR4表达,抑制炎性介质的产生,从而减轻肠道组织损伤。