抗原肽运载体基因多态性与1型糖尿病关联性的初步探讨

目的　初步探讨抗原肽运载体 (TAP)基因在华南地区一组汉族人中的分布及其与 1型糖尿病的关联性。方法　采用扩增阻滞突变体系 (ARMS)检测TAP1及TAP2基因各多态性位点在 66例 1型糖尿病患者及 69例正常对照组中的分布。结果　TAP基因各多态性位点在本组华南地区健康汉族人中的分布与国内外其它组资料基本一致 ,但存在一定程度的差异 ,提示TAP1及TAP2基因型可能有民族、地区分布的差异。TAP1基因的单倍体型TAP1D和单倍体型TAP2A在正常人群中的分布频率显著高于 1型糖尿病组 (RR分别为 0 .1 7和 0 .31 ,P均 <0 .0 1 ) ;而TAP2基因TAP1A和TAP2F在正常人群中的分布频率显著低于 1型糖尿病组 (RR分别为 4 .1 0和 8.94,P分别 <0 .0 1和 <0 .0 5)。结论　TAP1D及TAP2A与 1型糖尿病的保护性相关 ,可能是 1型糖尿病的保护基因 ;TAP1A及TAP2F与 1型糖尿病的易感性相关 ,可能是 1型糖尿病的易感基因     

非诺贝特对高甘油三酯血症人群胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌功能的影响

目的观察非诺贝特对高甘油三酯(TG)血症人群的胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌功能的影响。方法正常糖耐量、高TG血症(TG≥12．3 mmol/L)患者12例(HTG组),予非诺贝特200 mg/d治疗3个月,于治疗前后应用高葡萄糖钳夹技术评价胰岛素敏感性和胰岛β细胞功能。并与正常糖耐量、正常血脂志愿者12名(NC组)进行比较。结果HTG组胰岛素敏感性指数(ISI)显著低于NC组;第一时相胰岛素分泌(1PH)稍低于NC组;第二时相胰岛素分泌(2PH)和最大胰岛素分泌(INS120-150)均明显高于NC组。HTG组非诺贝特治疗后,ISI较治疗前显著升高(18．35±1．76 vs 9．40±1．76,P＜0．01);1PH变化无统计学意义[(247．7±32．9)mIU/L vs (225．7±36．7)mIU/L,P=0．94];2PH和INS120-150较治疗前降低[分别为(73．2±9．0)mIU/L vs (106．0±11．3)mlU/L,p=0．014;(89．2±8．9)mIU/L vs (141．6±13．8) mIU/L,P=0．005]。结论非诺贝特调脂治疗能显著改善高TG血症人群的胰岛素抵抗及高葡萄糖钳夹试验中的胰岛素分泌。     

球型脂联素对高糖环境NIT-1胰岛β细胞功能的影响

用β细胞株NIT-1来研究球型脂联素对高糖损伤β细胞分泌功能及相关基因表达的影响.结果 显爪球型脂联素可恢复部分β细胞功能相关基因的表达,抑制高糖诱导NAD(P)H氧化酶组分p47phox表达增加,但未能改善高糖诱导的胰岛素mRNA水平下降及胰岛素分泌缺陷.     

瘦素对离体大鼠胰岛分泌胰岛素的双向影响

目的 了解不同浓度的瘦素，在不同条件下对离体大鼠胰岛分泌胰岛素的影响。方法 利用细胞培养技术，在不同的葡萄糖浓度（5.6mmol/L或16.7mmol/L）和不同作用时间（10min或2h)下，以0,1,5,10,15,50ak 100μg/L瘦素作用大鼠胰岛，观察其对胰岛素分泌的影响；用放免法检测培养物上清液胰岛素浓度。结果 培养液葡萄糖浓度为5.6mmol/L，培养10min，1μg/L、5μg/L瘦素促进被孵育的胰岛的胰岛素分泌；培养2h,5μg/L瘦素促进基础胰岛素分泌，≥50μg/L瘦素抑制胰岛素分泌。葡萄糖浓度为16.7mmol/L，培养10min，≥50μg/L瘦素抑制胰岛素分泌；培养2h，≥5μg/L瘦素抑制胰岛素分泌。结论 重组瘦素对离体大鼠胰岛分泌胰岛素具有双向作用，并受瘦素浓度、作用时间和环境葡萄糖浓度等因素变化的影响。     

尿醛固酮在原发性醛固酮增多症筛查中的价值及钠摄入对其筛查效率的影响

目的探讨尿醛固酮在原发性醛固酮增多症(PA)筛查中的作用并评估钠盐摄入对其筛查效率的影响。方法收集2006-09-2009-07中山大学附属第二医院内分泌科门诊和住院的高血压患者269例,其中包括原发性高血压患者237例(女119例,男118例,平均年龄47.4岁)和PA患者32例(女20例,男12例,平均年龄41.9岁)。所有入组的研究对象均测定立位1h血清醛固酮(SAC)和血浆肾素活性(PRA),并留取24h尿检测尿醛固酮、尿钠和尿钾。通过构建受试者工作特征曲线(ROC),评估尿醛固酮在PA筛查中的效率并确定最佳切点。以尿钠/尿钾作为钠盐摄入的评估方法,以尿钠/尿钾中位数作为切点将原发性高血压组分为高尿钠/尿钾组(n=119)和低尿钠/尿钾组(n=118),分别以这两组高血压人群作为阴性人群,以PA组作为阳性人群进行ROC分析,比较不同钠盐摄入情况对尿醛固酮水平及其PA筛查效率的影响。结果通过构建ROC曲线评估尿醛固酮在PA筛查中的作用,其曲线下面积为0.824(95%CI0.773～0.867,P<0.01),应用Youden’s指数确定尿醛固酮诊断PA的最佳切点值为11.6μg/24h,其敏感性和特异性分别为81.2%(95%CI63.3%～92.7%)和74.3%(95%CI68.2%～79.7%);在原发性高血压患者中,尿醛固酮与尿钠/尿钾呈负相关(r=-0.174,P<0.01)。高尿钠/尿钾组尿醛固酮、SAC和PRA水平明显低于低尿钠/尿钾组。结论尿醛固酮在PA筛查有一定意义,采用11.6μg/24h作为切点可取得较高的筛查效率。钠摄入可影响尿醛固酮水平,但不影响其筛查效率。     

心房利钠肽基因多态性与中国汉族2型糖尿病患者蛋白尿关系的研究

目的：探讨心房利钠肽（ANP）基因多态性与中国汉族2型糖尿病患者蛋白尿之间的关系。方法：应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术对2型糖尿病患者中无蛋白尿的患者50例、微量蛋白尿患者43例、大量蛋白尿患者40例以及正常对照组42名进行ANP基因C/T多态性研究。结果：研究对象具有限制性内切酶BatXI酶切位点的T等位基因频率显著高于白种人；对照组及糖尿病各组之间T及C等位基因和基因型频率均无统计学差异。结论：ANP基因C/T多态性与中国汉族2型糖尿病患者蛋白尿无相关性，可能不是中国汉族2型糖尿病肾病的主要遗传标志。     

糖尿病患者足底压力检测及影响因素探讨

目的探讨正常人与糖尿病(DM)患者足底压力改变、分布及影响因素。方法正常对照组(正常组)132名和DM组418名。受试者均脱鞋袜以平常步态行走,用足底压力测量仪一步法测两脚动态足底压力各5次,计算平均足底峰值压力(PP)及各部位压力。结果正常组左右足PP分别为386kPa和384kPa,压力较大的前3位(由大到小),左足为第2跖骨头>第1趾>第3跖骨头,右足为第2跖骨头>第3跖骨头>第1趾;有胼胝者PP升高。DM组左右足PP分别为380kPa和368kPa,与正常组比较差异无统计学意义;但DM合并周围神经病变者PP大于正常组。性别、年龄、体质指数对两组患者PP及压力分布无明显影响,而穿鞋习惯对PP有影响。结论DM组PP与正常组差异无统计学意义,DM周围神经病变是导致DM患者足底压力增高的危险因素。     

构建游离脂肪酸诱导胰岛细胞凋亡模型验证球形脂联素的拮抗作用

目的:构建游离脂肪酸(棕榈酸)诱导胰岛细胞凋亡模型,并观察球形脂联素对胰岛细胞凋亡的拮抗作用。方法:实验于2004-15/2005-30在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心完成。构建游离脂肪酸诱导胰岛细胞凋亡模型及分组:采用小鼠胰岛素瘤细胞株βNIT-1,取对数生长期的细胞,按1×105个/孔的密度接种于6孔板,细胞生长至80%融合时将随机细胞分为3组,每组3孔,分别为对照组,棕榈酸组,棕榈酸+球形脂联素组。3组培养基均含5g/L的牛血清白蛋白、体积分数为0.03胎牛血清及体积分数为0.01的无水乙醇;棕榈酸组又加含有终浓度为500μmol/L棕榈酸;棕榈酸+球形脂联素组又加终浓度为500μmol/L棕榈酸和0.5mg/L脂联素。处理48h后终止实验。采用Hochest33342和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测棕榈酸诱导胰岛细胞凋亡率和凋亡指数及脂联素处理后脂性凋亡的改善情况。结果:①经Hochest33342染色检测3组小鼠胰岛素瘤细胞株βNIT-1细胞凋亡指数明显不同(F=300.270,P<0.05),棕榈酸组明显高于对照组犤(12.40±1.57)%,(2.05±0.59)%犦,说明500μmol/L棕榈酸可成功构建胰岛细胞凋亡模型,经脂联素处理后凋亡指数明显降低犤(12.40±1.57)%,(3.87±0.93)%犦,说明球形脂联素组对胰岛细胞凋亡有拮抗作用。②经脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测小鼠胰岛素瘤细胞株βNIT-1细胞凋亡指数3组明显不同(F=191.221,P<0.05),棕榈酸组明显高于对照组犤(26.33±5.6)%,(2.32±0.78)%犦,说明500μmol/L棕榈酸可成功构建胰岛细胞凋亡模型,经脂联素处理后凋亡指数明显降低犤(2.32±0.78)%,(4.90±0.82)%,P<0.05犦说明球形脂联素组对胰岛细胞凋亡有拮抗作用。结论:①Hoescht染色法及脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法结果均表明在体积分数为0.03胎牛血清、5g/L的牛血清白蛋白的Dulbecco改良的Eagle培养液条件下加入终浓度为500μmol/L棕榈酸处理细胞48h可成功构建胰岛细胞凋亡的细胞模型。②球形脂联素可拮抗胰岛细胞的脂性凋亡,从而发挥了其调节糖脂代谢的作用。     

代谢综合征病人血浆脂联素水平变化的初步研究

目的探讨代谢综合征(MS)病人血浆脂联素(adiponectin)水平变化及与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法筛选MS病人30例及与其年龄、性别相匹配的健康成年人20例为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆脂联素水平,用HOMA-IR评估IR程度。结果MS组与对照组比较,血浆脂联素水平显著降低[(5.15±2.54)μg/mL与(10.28±5.50)μg/mL,P<0.01];MS组的HOMA-IR指数显著高于对照组[(3.21±1.14)与(1.79±0.98),P<0.05];在MS组,脂联素与体重指数(BMI)、腰围(WC)、三酰甘油(TG)及HOMA-IR呈负相关,与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈正相关,相关系数r值分别为-0.489,-0.548,-0.429,-0.453及0.426(P<0.05)。结论代谢综合征病人血浆脂联素较正常人群降低,且其水平降低可能与IR有关。     

肥胖对不同糖耐量者第一时相胰岛素分泌功能的影响

 目的： 探讨肥胖对不同糖耐量人群第一时相胰岛素分泌功能的影响。方法： 无糖尿病家族史的正常糖耐量者(正常对照,NC)38例、2型糖尿病一级亲属正常糖耐量(NGT)者32例、糖调节受损(IGR)者67例及新诊断的2型糖尿病(T2DM)患者35例参与本试验。这4个组再分为超重/肥胖及正常体重2个亚组。各组均行静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）和口服葡萄糖-胰岛素释放试验（OG-IRT）,计算第一时相胰岛素分泌功能指数(AlR3-5)及胰岛素敏感性指数（ISI）,分析肥胖对不同糖耐量人群胰岛β细胞功能及胰岛素抵抗的影响。结果： NC超重/肥胖亚组较正常体重亚组AIR3-5显著升高（P<0.05）,其余3对亚组间比较差异均无统计学意义（均P>0.05）。超重/肥胖亚组ISI较正常体重亚组有降低趋势,其中IGR两亚组间比较差异无统计学意义（P>0.05）,其余3对亚组间比较差异均有统计学意义（均P<0.05）。ISI与体重指数和腰围在各组均呈负相关（P<0.05）,与AIR3-5在NC组呈负相关（P<0.05）,而在其余各组均呈正相关（均P<0.05）。结论： 肥胖对不同糖耐量人群胰岛β细胞分泌功能影响各不相同。无糖尿病家族史的正常糖耐量者随着胰岛素抵抗的加重,第一时相胰岛素分泌功能代偿性增加,而2型糖尿病一级亲属正常糖耐量者、糖调节受损者和2型糖尿病患者则不能代偿性增加。