稳定表达Bcl-2的骨髓间充质干细胞载体的建立及对缺血性损伤保护作用的实验研究

目的 构建稳定表达Bcl-2基因的大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)载体,观察Bcl-2基因转染对骨髓间充质干细胞生物特性的影响及体外模拟缺血性损伤的保护作用.方法 用RT-PER技术扩增小鼠Bcl-2 cDNA,慢病毒介导的基因转导骨髓间充质干细胞,转导后的细胞用Puromycin筛选,RT-PER法检测转染后Bcl-2的表达,采用血清剥夺和缺氧(SOD)处理建立MSC体外模拟缺血性损伤模型,通过流式细胞术评价转染Bcl-2基因的MSC和未转染的MSC的凋亡及存活情况.对转导Bcl-2的MSC神经诱导及检测.结果 转导Bcl-2基因的MSC经Puromycin筛选后可稳定、高效表达Bcl-2蛋白;流式细胞术检测显示:和MSC相比,转导Bcl-2基因的MSC在SOD后凋亡细胞较少,存活细胞较多.转导Bcl-2基因的MSC仍具有向神经细胞分化的潜能.结论 慢病毒介导的Bcl-2基因转导MSC有其蛋白的稳定表达,Bcl-2基因转导可对抗MSC体外模拟缺血性损伤引起的细胞凋亡,从而具有保护性作用,且不影响MSC向神经细胞分化的潜能.     

临床检验结果互认的影响因素

本文就质量控制过程影响因素、质量管理水平不均衡问题、检验结果互认标准化问题、检验结果互认的社会、伦理、法律因素以及其他因素等探讨＂临床检验结果互认＂过程中需考虑的具体问题和影响因素.     

两种蛋白芯片筛选血清蛋白标志物的对比分析

目的 从CM10、IMAC3-Cu这两种芯片中选择适合应用于血清蛋白质指纹图谱研究的芯片种类.方法 选择慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者和健康人血清各13例,采用CM10、IMAC3-Cu两种蛋白芯片,经SELDI-TOF-MS技术对样本进行检测比较.结果 在2000-50000Da范围内,CM10和IMAC3-Cu芯片在各实验组捕获的有效蛋白峰数的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 CM10能得到更多慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者和健康人的有意义的蛋白峰值,能更好的应用于血清蛋白组学的实验研究.     

冠心病患者治疗前后血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa、血栓素B2的变化

目的：观察冠心病（CHD）患者治疗前后血小板膜糖蛋白（GPⅡb/Ⅲa）表达和血浆血栓素B2（TXB2）水平的变化,探讨其临床意义。方法：分别采用流式细胞术（FCM）、酶联免疫吸附法（ELISA）检测60例CHD患者（CHD组）接受阿司匹林（100mg/d）治疗前、治疗2周后及20名健康体检者（正常对照组）的血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa表达阳性率、血浆TXB2水平。结果：治疗后,CHD患者血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa表达阳性率、血浆TXB2水平均比治疗前明显降低（P〈0.01）,但仍高于正常对照组（P〈0.01）。结论：阿司匹林可在一定程度上抑制CHD患者血小板活化与聚集。     

硬膜外麻醉对术前辅助化疗癌症病人心肌肌钙蛋白I的影响

目的：研究硬膜外麻醉对术前辅助化疗癌症病人心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）的影响。方法：选择盆腔、下腹部癌症病人28例,其中观察组14例接受术前辅助化疗（全部为单次静脉化疗用药）,对照组14例未行术前辅助化疗,两组病人均在硬膜外麻醉下手术,分别于麻醉前、手术开始后1h、手术结束时、术后1、3、7d采集外周静脉血4mL并分离血清,以检测血清cTnI水平、肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶（CKMB）活性。结果：①观察组病人血清cTnI水平于手术结束时开始明显升高（P〈0．05）,术后1d达峰值（P〈0．01）,术后3、7d下降,但与麻醉前相比差异显著（P〈0．01）;②对照组病人血清cTnI水平于手术结束时轻度升高（P〉0．05）,术后1d达峰值,与麻醉前相比差异显著（P〈0．01）,但峰值明显较观察组低（P〈0．01）;③手术结束至术后1、3d,两组病人的血清CK、CKMB活性均较麻醉前明显增高（P〈0．05）,但各个时点两组比较均无明显差异（P〉0．05）。结论：术前辅助化疗癌症病人在接受硬膜外麻醉和手术治疗时,发生心肌损伤的危险性明显增加,应注意心肌损伤的早期识别并及时采取有效的心肌保护措施。     

双向电泳分离技术的比较和优化

目的:比较优化人血清蛋白双向电泳(2-DE)分离技术,提高2-DE对血清蛋白的分辨能力.方法:收集健康人群标本,分别进行多次双向电泳,比较高丰度蛋白的去除前后及传统的考马斯亮蓝染色和SYPRO-ruby荧光染色两种不同的染色方法等因素对双向电泳图谱质量的影响.结果:考马斯亮蓝染色和SYPRO-ruby荧光染色相比,血清2-DE图谱检测到平均蛋白质点数分别是(324±25)(n=3)和(785±30)(n=3);去除高丰度蛋白前后比较,未做处理的血清、去除蛋白和IgG血清的2-DE图谱检测到平均蛋白点数分别是(501±25)(n=3)和(813±22)(n=3).结论:去除高丰度蛋白并结合SYPRO-ruby荧光染色可以大大提高血清低丰度蛋白的解析能力.此方法优化了血清蛋白质2-DE技术,为进一步开展疾病血清蛋白质组研究奠定了基础.     

CA-125对卵巢癌诊断价值的Meta分析

目的:通过Meta分析方法评价血清CA-125在卵巢癌诊断中的临床价值。方法:搜索多个数据库,按照文献纳入排除标准选定20篇关于血清CA-125诊断卵巢癌的文献,采用Meta分析方法进行统计。结果:血清CA-125诊断卵巢癌的敏感性在0.64以上,特异性接近1。此次试验所得受试者工作特征曲线显示血清CA-125测定诊断卵巢癌的效能较高。卵巢癌患者血清CA-125远远高于卵巢良性肿瘤患者,两者差异有统计学意义。结论:CA-125诊断试验的敏感性和特异性都很高,足以诊断卵巢癌。     

肌氨酸氧化酶法和碱性苦味酸速率法检测血清肌酐结果比较和偏倚评估

目的比较肌氨酸氧化酶法和碱性苦味酸速率法测定血清肌酐的结果,并探讨胆红素对两种测定方法的影响。方法同时用两种方法检测非黄疸标本和黄疸标本,对测定结果用Excel2003和SPSS13.0软件进行处理。结果两种方法检测血清肌酐结果高度相关,有很好的可比性(P<0.05),但碱性苦味酸速率法的测定结果比肌氨酸氧化酶法高。两种方法测定肌酐结果有恒定偏倚,且预期偏倚随肌酐浓度的降低而增大。用黄疸患者血清标本进行比较,肌氨酸氧化酶法和碱性苦味酸速率法测定结果仍具有很好的相关性(P<0.05)。用粉剂总胆红素标准品作为干扰物发现胆红素对两种方法检测血清肌酐值均有正干扰,而换Beckman总胆红素标准液则得出结果为两种方法均不受胆红素的影响。结论两种方法检测非黄疸血清肌酐结果具有很好的可比性,因其方法原理和仪器不同,肌酐测定需建立不同参考值范围。     

问题解答

问 :何谓细胞毒性Ｔ淋巴细胞 ?答 :一类直接杀伤胞内病原体感染靶细胞、肿瘤细胞、同种异体移植物的胸腺依赖性淋巴细胞 (Ｔ淋巴细胞 )亚群 ,又称杀伤性Ｔ淋巴细胞 ,简称ＣＴＬ或Ｔｃ。Ｔｃ在识别和杀伤病毒感染靶细胞时 ,需要识别外来抗原和自身主要组织相容性复合体 (ＭＨＣ)     

蛛网膜下腔出血和脑梗死患者IL-6水平研究

目的分析蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）和脑梗死患者血清、脑脊液（ＣＳＦ）的白细胞介素-６（ＩＬ－６）水平变化特点．探讨ＩＬ－６与ＳＡＨ和脑梗死的关系。方法用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定２０例ＳＡＨ患者、３８例脑梗死患者及２０例正常人血清、ＣＳＦ的ＩＬ－６水平。结果脑梗死组血清ＩＬ－６水平较对照组明显增高（Ｐ＜０．０１）：ＳＡＨ组血清、ＣＳＦ的ＩＬ－６水平较对照组明显增高（Ｐ＜０．０１）。ＳＡＨ组ＣＳＦ的ＩＬ－６水平比血清的ＩＬ－６水平明显增高（Ｐ＜０．０１）。ＳＡＨ组第１天血清和第６天ＣＳＦ的ＩＬ－６平均水平为最高值。结论ＩＬ－６与脑梗死、ＳＡＨ发病有关,ＳＡＨ患者中枢神经系统与颅外免疫系统一样存在严重的免疫和炎症反应．而中枢神经系统与颅外免疫系统的免疫调节可能是不相同的。ＩＬ－６异常增高可能与ＳＡＨ后的脑血管痉挛（ＣＶＳ）和迟发性脑梗死有关。