胆绿素还原酶在大鼠纤维化肾脏中的分布及其与肾血管毁损的关系

目的 通过研究胆绿素还原酶(BVR)在肾脏组织中的表达部位及其与血管分布间的关系,为进一步研究其在肾脏纤维化中的作用提供依据.方法 建立5/6肾纤维化(5/6Nx)模型,通过免疫组织化学、免疫荧光技术明确BVR在纤维化肾组织中的分布及其与血管分布的关系,Western blotting检测5/6Nx与Sham组BVR表达情况.结果 BVR主要在肾小管表达,肾小球表达较少;纤维化肾组织中血管分布较Sham组明显减少,血管损毁明显,而BVR的表达亦与血管分布相关,表现为血管分布少甚至没有的区域BVR的表达明显较血管分布密集的区域增强.结论 BVR在肾脏组织中的表达并不是均匀的,肾脏纤维化时血管损毁,BVR表达增强.     

678株凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性分析

目的 分析凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的耐药性,比较苯唑西林耐药的CNS (MRCNS)与苯唑西林敏感的CNS (MSCNS)的药物敏感性. 方法 收集2007年1 ～ 12月临床分离CNS,琼脂纸片扩散法检测其对9种抗菌药物的敏感性,MRCNS的检测采用头孢西丁纸片法,诱导性克林林霉素耐药的检测采用D实验. 结果共分离出CNS 678株,检出MRCNS 296株,占43.7%,诱导性克林林霉素耐药72株,占10.7%. MRCNS对红霉素的耐药率高达94.9%, 对复方磺胺甲恶唑的耐药率为70.3%,对环丙沙星、克林霉素和四环素的耐药率在63.7%～69.3%,对庆大霉素的耐药率较低,为20.7%,与MSCNS比较差异有统计学意义. MRCNS与MSCNS对青霉素的耐药率均＞90%,未见对替考拉宁和万古霉素耐药菌株. 结论 CNS引起的感染日益增多;MRCNS对常用抗菌药物的耐药率高于MSCNS,糖肽类抗菌药物是治疗MRCNS的首选药物;临床抗感染治疗应依据抗菌药物敏感试验合理用药.     

肾病综合征并发乳糜腹水1例

患者女性,37岁,因全身水肿伴尿量减少1月于2005年1月22日入院。既往健康,无结核病史,无外伤及腹部手术病史。体检:体温36.8℃,血压120/75 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。脉搏82次/min,呼吸15次/min。颜面水肿,双肺呼吸音清晰,无干湿性啰音,心界不大,心律82次/min,律齐,无杂音。腹隆,呈蛙状,无压痛及反跳痛,肝脾不大,腹部移动性浊音阳性,双肾区无叩痛,双下肢压陷性水肿。辅助检查:尿蛋白定性( ),红细胞2~4/HP,白细胞3~7/HP,24小时尿蛋白定量7.8 g,血尿素氮8.3 mmol/L,肌酐75μmol/L,血浆总蛋白36.4 g/L,白蛋白17.5 g/L,甘油三酯2.30 mmo…     

单向白蛋白透析滤过治疗生物毒素中毒致多器官功能障碍综合征38例疗效观察

急性重度生物毒素中毒可引起多器官功能障碍综合征(MODS),常累及肾脏、肝脏、心脏、大脑及血液系统等,病情凶险,可迅速发展为多器官功能衰竭(MOF),病死率很高.本院采用一种新的血液净化技术--单向白蛋白透析滤过(SPADF)抢救重度生物毒素中毒取得了较好疗效,现将治疗体会报告如下.     

血液净化抢救蜂毒致多器官功能障碍2例

马蜂螫伤后中毒导致多器官功能衰竭罕见 ,我院近期收治 2例 ,经多种血液净化方法抢救成功 ,现报道如下 :1　临床资料例 1:女 ,30岁 ,入院前 2ｄ不幸被蜂 (当地俗称马蜂 )螫伤达 50多处 ,2ｈ后出现头昏、头痛、乏力 ,恶心、呕吐 (呕吐物含咖啡样物质 ) ,螫伤处疼痛、青紫 ,解酱油色尿 2 0 0ｍｌ,8ｈ后出现颜面部浮肿 ,腰痛 ,全身皮肤瘀斑 ,尿量明显减少 ,2 0 0～ 30 0ｍｌ/ｄ ,在当地医院测血压 12 0 /95ｍｍＨｇ ,14ｈ后急送我院。体检 :Ｔ 37℃ ,Ｂｐ 155/115ｍｍＨｇ ,神志清楚 ,全身皮肤可见瘀斑 ,头部及四肢末端 50多处可见蜂螫伤后小溃…     

CIP4对转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞-间充质转分化的影响

目的 观察骨架调节蛋白CIP4（Cdc42 interacting protein 4）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人肾小管上皮细胞-间充质转分化（EMT）的影响,并探讨其产生的机制。 方法 10 ?滋g/L TGF-β1刺激72 h诱导人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）向间充质转分化。Western印迹法检测各组细胞内E-cadherin和α-SMA蛋白的表达。倒置显微镜观察细胞形态的变化。根据GenBank人CIP4的完全cDNA序列,设计1条特异性干扰CIP4表达的RNA片段（CIP4-siRNA）和含野生型CIP4的重组真核表达质粒（pcDNA3.1-hCIP4）,利用lipofactamine 2000将其转染HK-2细胞。Western 印迹法检测对照组、TGF-β1刺激组、CIP4-siRNA转染组、pcDNA3.1-CIP4转染组细胞内CIP4、E-cadherin和α-SMA蛋白的表达,共聚焦显微镜观察 E-cadherin和α-SMA蛋白的分布改变;用PI3K-Akt特异性抑制剂渥曼青霉素（wortmannin） 1 μmol/L干预TGF-β1刺激的HK-2细胞48 h,Western 印迹法检测对照组和干预组CIP4表达的变化。 结果 TGF-β1干预后HK-2细胞E-cadherin蛋白表达显著减少（P ＜ 0.05）,α-SMA蛋白表达显著增多（P ＜ 0.05）,细胞形态由典型的上皮细胞向肌成纤维细胞转变,表明TGF-β1诱导肾小管上皮细胞EMT模型成功。CIP4-siRNA抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞表达CIP4后,E-cadherin蛋白表达显著增多（P ＜ 0.05）,α-SMA蛋白表达显著减少（P ＜ 0.05）,部分逆转了上述TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞EMT。pcDNA3.1-hCIP4转染使CIP4高表达后,HK-2细胞E-cadherin蛋白表达显著减少（P ＜ 0.05）,α-SMA蛋白表达显著增多（P ＜ 0.05）,诱导了肾小管上皮细胞EMT。用渥曼青霉素干预TGF-β1刺激的HK-2细胞48 h,CIP4可能蛋白表达显著减少（P ＜ 0.05）。 结论 TGF-β1通过PI3K-Akt途径上调CIP4表达,CIP4可能进一步参与TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞EMT过程。     

CIP4在肾间质纤维化中的表达及作用

目的 观察骨架调节蛋白CIP4（Cdc42 interacting protein-4）在肾纤维化过程中表达水平、细胞内定位及高表达的CIP4基因对人肾小管上皮细胞E钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）的表达和β连环素（β-catenin）酪氨酸磷酸化水平的影响。 方法 体外实验以人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）为研究对象,10 μg/L TGF-β1刺激72 h诱导HK-2细胞转分化; Western 印迹法检测各组细胞内CIP4、E-cadherin、vimentin蛋白的表达;RT-PCR法检测细胞内CIP4 mRNA表达水平;激光共聚焦显微镜观察CIP4在细胞内定位。体内实验以SD大鼠为研究对象,5/6肾切除法制作慢性肾纤维化模型;常规检测BUN和Scr水平;Masson染色检测肾组织纤维化水平;免疫组化法检测肾组织内CIP4蛋白的表达和分布。脂质体法介导含野生型CIP4的重组真核表达质粒pcDNA3.1-CIP4或pcDNA3.1-Zeo（空载体）转染HK-2细胞,Wetern 印迹法检查转染的效率。稳定转染成功后,Wetern 印迹法检测正常组、pcDNA-CIP4转染组和空载体转染组细胞内E-cadherin、vimentin蛋白的表达和β-catenin酪氨酸磷酸化水平。 结果 正常HK-2细胞表达E-cadherin和少量的CIP4,几乎不表达vimentin。TGF-β1干预组细胞vimentin蛋白表达增加（P ＜ 0.05）,E-cadherin蛋白表达减少（P ＜ 0.05）,CIP4 mRNA和蛋白表达均显著增多（P ＜ 0.05）。CIP4在正常细胞内大部分在细胞膜,少量在细胞质,在转分化的HK-2细胞表达显著增多,并向细胞质和细胞核聚集。假手术组大鼠肾功能正常,肾组织内未见明显纤维化组织,CIP4在肾小管表达较少,肾小球内几乎不表达;模型组大鼠BUN和Scr增高,肾组织内可见明显纤维化组织,CIP4在肾小管表达明显增加。pcDNA3.1-CIP4转染组较正常组和空载体转染组细胞内CIP4表达增多（P ＜ 0.05）,β-catenin酪氨酸磷酸化水平和vimentin蛋白表达增加（P ＜ 0.05）,而E-cadherin蛋白表达减少（P ＜ 0.05）。 结论 CIP4高表达可能参与肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化,促进肾间质纤维化。     

CIP4在肾间质纤维化中的表达及作用

Objective To observe the expression and localization of CIP4 (Cdc42 interacting protein-4) in the renal fibrosis and the effect of CIP4 on the expression of E-cadherin,vimentin and β-catenin tyrosine phosphorylation. Methods In vitro, the human tubular epithelial cells (HK-2 cell line) were cultured with 10 μg / L TGF-β1 for 72 h. The protein expressions of CIP4, E-cadherin, vimentin and β-catenin tyrosine phosphorylation were measured by Western blotting; the expression of CIP4 mRNA was detected by RT-PCR. The intracellular distribution of CIP4 was observe by confocal microscope. In vivo, Masson staining was used to evaluate the level of renal fibrosis; the expression and distribution of CIP4 in renal tissue were detected by immunohistochemistry. HK-2 cells were transfected with pcDNA3. 1-CIP via lipofectamine 2000. The expressions of E-cadherin, vimentin and β-catenin tyrosine phosphorylation level in the transfected cells were detected by Western blotting. Results The expressions of CIP4 mRNA and protein were up-regulated in renal tubular EMT cells. Most of CIP4 protein localized in cell membrane, and some was in cytoplasm. After stimulation by TGF-β1, the expression of CIP4 protein both in cytoplasm and nucleus was greatly increased (P ＜0.05),especially in cytoplasm. In vivo, CIP4 was expressed in renal tubular epithelia, but little expressed in glomeruli. In renal from 5/6 nephrectomized rats, CIP4 expression was significantly increased. In the CIP4 transfectants, the expression of CIP4, vimentin and β-catenin tyrosine phosphorylation level were up-regulated (P ＜0.05), but E-cadherin expression was suppressed (P ＜0.05).Conclusion The overexpression of CIP4 is likely to take part in the epithelial-to-mesenchymal transition process, thereby promoting the renal fibrosis.     

血液透析联合血液灌流治疗尿毒症并顽固性贫血的研究

目的探讨血液透析(HD)联合血液灌流(HP)治疗尿毒症并顽固性贫血的临床疗效。方法维持性透析患者20例,采用血液透析联合血液灌流(HD/HP)治疗方法与单纯性血液透析(HD)方法比较(自身对照),治疗前后检测Hb、Hct、β2微球蛋白、血清TNF-α、IL-1α、IL-1β、PTH、CRP并进行比较。结果血液透析联合血液灌流(HD/HP)治疗后β2微球蛋白、血清TNF-α、IL-1α、IL-1β、PTH、CRP明显下降,而Hb、Hct显著升高。结论血液透析联合血液灌流(HD/HP)能通过清除体内中大分子使血Hb、Hct明显上升,减少贫血带来的各种并发症。临床使用安全,疗效可靠。肾性贫血与血清β2微球蛋白、血清TNF-α、IL-1α、IL-1β、PTH、CRP的升高有关。     

产ESBLs菌尿路感染调查及耐药性分析

尿路感染是临床常见感染性疾病，以革兰氏阴性杆菌为主。近年来由于广谱的第三代头孢菌素的应用，已引起较多耐药菌株的出现，特别是产超广谱β内酰胺酶菌株的出现，给临床治疗带来极大困难，并可在院内引起爆发流行，应引起高度重视。我们对本院尿液标本中分离出的革兰阴性杆菌产ESBb状况进行回顾性研究，以了解本地区尿路感染中ESBLs菌的流行情况及产ESBLs菌株对临床常见抗菌素的耐药性进行分析。