内质网应激的信号通路及其与肝脏疾病的关系

内质网应激(ERS)表现为内质网腔内错误折叠与未折叠蛋白聚集以及钙离子平衡紊乱,可激活未折叠蛋白反应、内质网超负荷反应和固醇调节级联反应等信号通路,既能引发糖调节蛋白GRP78、GRP94等内质网分子伴侣表达而产生保护效应,亦能诱导细胞凋亡。目前,关于ERS参与肝脏疾病的发生发展尚无系统性认识。综述了ERS相关信号通路的新进展及与其相关的部分肝脏疾病新进展,并对ERS介导的细胞凋亡及其在肝脏疾病中的作用进行阐述。干预ERS信号通路有望为未来肝脏疾病研究及治疗提供参考。     

细胞外囊泡与肝脏疾病发生发展的关系

细胞外囊泡(EV)是细胞释放到细胞外环境中的膜结合小泡,能够选择性地富集特定蛋白和RNA,介导细胞间通讯。因此,EV具有作为疾病的生物标志物、治疗靶标和传递载体的潜力。总结了EV在病毒性肝炎、肝纤维化和肝癌中的研究进展,探讨其在肝脏疾病中所发挥的作用,以强调EV在未来肝脏疾病研究中的应用前景。     

2型固有淋巴细胞在蠕虫感染中的作用研究进展

蠕虫感染会诱发宿主产生固有及特异性免疫应答。2型固有淋巴细胞（group 2 innate lymphoid cells,ILC2）是2型免疫反应的重要参与者,在白细胞介素25(interleukin 25,IL-25)、IL-33和胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）刺激下而产生大量辅助型T细胞2(T helper 2 cell, Th2)型细胞因子,从而在清除寄生虫及组织修复中发挥重要作用。近年来研究发现,蠕虫感染后,ILC2自分泌因子、肥大细胞、肠道神经系统、Th2细胞等均参与ILC2调控。探索ILC2在抗蠕虫免疫中发挥的作用极具基础研究与临床药物开发价值。本文就ILC2及其在蠕虫感染中的作用进行综述。     

中性粒细胞胞外诱捕网（NET）与肝脏疾病的关系

中性粒细胞通过释放中性粒细胞弹性蛋白酶和髓过氧化物酶等蛋白酶,形成中性粒细胞胞外诱捕网（NET）,在体内发挥免疫防御作用,并参与多种肝病的炎性反应,但其过度释放会加重肝组织损伤,成为肝脏疾病的危险因素之一。近年来,有研究发现NET的过度释放可促进病毒性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、肝脏缺血再灌注损伤等疾病向肝癌进展,阐明NET作用机制对肝脏疾病的诊断和进展过程具有重要意义。本文主要阐述NET在肝脏疾病中的最新研究进展,为肝脏疾病的诊疗和预防提供新的思路。     

不同淋巴结转移状态下肝内胆管细胞癌的外科治疗及预后分析

目的分析总结肝内胆管细胞癌(ICC)不同N分期、外科治疗、淋巴结清扫范围及联合放化疗对其预后的影响。方法回顾性分析SEER数据库内4555例ICC患者的临床资料及随访结果。包括N0期患者3710例,N1患者845例,所有患者包括完整的TNM分期信息、生存时间及生存状态信息、手术相关信息及放化疗信息。以Kaplan-Meier法描述生存曲线,共描述120个月的生存情况,应用Log-rank检验法进行假设检验,观察不同N分期ICC患者总体预后差异,以及不同手术方式、是否清扫淋巴结、术后是否进行放化疗对不同N分期ICC患者预后的影响。偏态分布的计量资料用中位数(M)表示,计数资料用百分数(%)表示。结果N1期患者中位生存时间12个月,N0期患者中位生存时间15个月。在N0期患者中,未行手术的患者中位生存时间8个月,局部肿瘤毁损的患者中位生存时间26个月,手术切除的患者中位生存时间45~59个月;在N1期患者中,未行手术的患者中位生存时间9个月,局部肿瘤毁损的患者中位生存时间26个月,手术切除的患者中位生存时间14~22个月。N0期患者中,未进行淋巴结清扫的患者中位生存时间37个月,进行淋巴结清扫的患者中位生存时间46~55个月;N1期患者中,未进行淋巴结清扫的患者中位生存时间26个月,进行淋巴结清扫的患者中位生存时间18~20个月。N0期患者中,不进行联合放化疗的患者中位生存时间41~42个月,进行联合放化疗的患者中位生存时间43~46个月;N1期患者中,不进行联合放化疗的患者中位生存时间10~17个月,进行联合放化疗的患者中位生存时间23个月。结论ICC中N1期患者预后明显差于N0期患者,手术是治疗ICC的有效手段,同时应积极推荐常规清扫淋巴结,推荐N1期患者进行联合放化疗。     

TGF-β3对辐射致肺上皮细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的 探索转化生长因子-β3(TGF-β3)在辐射致肺上皮细胞损伤中的作用及其可能机制,为放射性肺损伤的防治提供实验依据。方法 设计合成并筛选Ⅱ型转化生长因子-β受体(TGFBR2)的小干扰RNA(siRNA),用于细胞TGFBR2干涉;将体外培养的人支气管上皮细胞(Beas-2B细胞)及其TGFBR2干涉细胞随机分为对照组、5 ng/ml TGF-β3处理组(TGF-β3组)、6 Gy⁶⁰Co-γ射线单次照射组(6 Gy组)、6 Gy⁶⁰Co-γ射线单次照射+5 ng/ml TGF-β3处理组(6 Gy+TGF-β3组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组胶原蛋白和TGFBR2的表达,RT-qPCR和Western印迹检测上皮间质转化(EMT)相关标志物平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期。结果 (1)TGF-β3对辐射诱发的细胞胶原蛋白表达增高有明显抑制作用,并可降低辐射所致细胞EMT相关标志物α-SMA基因和蛋白水平的异常高表达,有效保护辐射所致肺组织细胞纤维化改变;(2)TGF-β3可抑制...     

60Co γ射线照射的小鼠肺上皮MLE-12细胞分泌的外泌体对T淋巴细胞的活化作用

目的 探讨小鼠肺上皮MLE-12细胞（简称MLE-12细胞）受到60Co γ射线照射后分泌的外泌体介导的T细胞活化。 方法 将MLE-12细胞分为对照组和60Co γ射线照射组（2、4、6和8 Gy）,采用超速离心法分别从其培养液的上清液中提取外泌体,应用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析技术确定外泌体的形态结构和数量特征,采用蛋白质印迹法（WB）检测外泌体中溶酶体相关膜蛋白3（CD63）、四次跨膜蛋白28（CD81）、肿瘤易感基因101蛋白（TSG101）、Ⅰ型内质网膜蛋白（Calnexin）的表达,采用流式细胞术（FCM）检测外泌体表面Ⅰ类主要组织相容性复合体（MHC Ⅰ）、Ⅱ类主要组织相容性复合体（MHC Ⅱ）、免疫调节蛋白B7-1（CD80）和免疫调节蛋白B7-2（CD86）的表达水平。将从小鼠脾脏中分离出来的初始T细胞分别与对照组MLE-12细胞（简称NC MLE-12）分泌的外泌体（简称exo/NC-MLE）、6 Gy γ射线照射组的MLE-12细胞（简称IR MLE-12）分泌的外泌体（简称exo/IR-MLE）共培养,采用FCM检测T细胞亚群CD3+、CD4+和CD8+及其活化指标T细胞特定表面糖蛋白CD28和早期活化抗原1（CD69）的变化;将初始T细胞分别与NC MLE-12、IR MLE-12和外泌体抑制剂GW4869处理组的MLE-12细胞共培养,采用FCM检测T细胞亚群CD3+、CD4+和CD8+及其活化指标CD28和CD69的变化。2组间比较采用两独立样本t检验,多组间比较采用方差分析法,组间两两比较采用Bonferroni调整法。 结果 MLE-12细胞分泌的外泌体显示出典型的一面凹陷的茶托样结构,粒径为30~150 nm;WB结果显示,与MLE-12细胞相比,其外泌体中特异性标志物CD63、CD81和TSG101高表达,而阴性标志物Calnexin低表达。与对照组相比,在6 Gy γ射线照射后不同时间,单个MLE-12细胞分泌的外泌体数量于24、48 h时均增加（t=5.36、6.66,均P<0.05）;在不同剂量γ 射线照射后24 h,单个MLE-12细胞分泌的外泌体数量增加的现象具有剂量-效应关系,在照射剂量为 6、8 Gy 时,差异均有统计学意义（t=4.14、5.67,均P<0.05）。与exo/NC-MLE相比,exo/IR-MLE中MHCⅠ、MHC Ⅱ、CD81和TSG101的表达水平均升高。FCM结果显示,与exo/NC-MLE相比,exo/IR-MLE中MHC Ⅰ、MHC Ⅱ、CD80和CD86表达水平均升高（t=4.04~6.47,均P<0.05）。与exo/NC-MLE相比,在与exo/IR-MLE共培养的T细胞中,CD3+、CD4+和CD8+ T细胞均出现增殖现象（t=3.08~5.88,均P<0.05）,CD28和CD69表达水平均升高（t=3.02~8.65,均P<0.05）;外泌体抑制剂GW4869可以抑制IR MLE-12所诱导的T细胞活化（t=3.64~23.03,均P<0.05）。 结论 60Co γ射线照射后的MLE-12细胞分泌的外泌体可以通过抗原呈递激活T细胞。     

175例晚期肝多房棘球蚴病患者临床特征分析

目的　分析晚期肝多房棘球蚴病患者临床特征,为该病诊断及治疗提供参考依据。方法　回顾性分析2012–2017年青海大学附属医院确诊的175例晚期肝多房棘球蚴病患者临床特征。结果　175例晚期肝多房棘球蚴病患者中,男女比例为1∶1.6;年龄11～69岁,平均（38.6 ± 12.9）岁;患者以藏族为主（164 例,占93.7%）,主要来自果洛州（139例,占79.4%）,职业以牧民为主（129例,占73.7%）,文化程度以文盲为主（102例,占58.3%）。患者主要临床症状为上腹部疼痛、皮肤黏膜及巩膜黄染,病灶主要位于左右肝（占69.1%）,2个及以上病灶者占63.4%,下腔静脉肝内段受累占53.7%。邻近器官受累以膈肌为主（21.7%）,远处转移以肺部为主（占40.6%）。结论　青海省果洛州晚期肝多房棘球蚴病患病率较高,应针对该地区人群展开筛查,制定合理治疗方案。 ［关键词］     

瑞香狼毒醇提物的抗肿瘤活性研究

目的:筛选瑞香狼毒抗肿瘤活性组分及确定敏感细胞株.方法:通过用不同浓度的乙醇对瑞香狼毒醇提物进行梯度柱色谱,依次得到HH,H1～H8,JH,J1 ～J8共16个组分,对其进行初筛.设溶剂对照组、各受试药分组、阳性对照组、空白调零组,各受试药组以100 mg·L-1分别处理BEL-7402,SK-HEP-1,A549,NCI-H157细胞株,通过磺基罗丹明(SRB)法,检测各组分作用48 h后对4株细胞的增殖抑制率,选择抑制率较好的组分及较敏感细胞株进行2次筛选.2次筛选时分组情况同初筛.将各组分分别以6.25,12.5,25,50,100 mg·L-1作用于敏感株细胞,分别作用24,48,72 h后,以SRB法检测各组分对各细胞株的增殖抑制率,计算各组分的IC50,并对其主要化学成分进行UPLC-MS分析.结果:各组分对不同肿瘤细胞株抑制作用相差较大,总体对肺癌细胞的抑制率高于肝癌细胞,J5,J6和H8对各细胞株的抑制率较高,且作用具有浓度和时间依赖性,作用72 h,50,100 mg·L-1各受试药对各肺癌细胞株的抑制率在(60.57±3.83)％ ～ (96.66±0.51)％,IC50在(9.61±0.79) ～(55.76±2.31) mg·L-1.其主要成分为双二氢黄酮类化合物.结论:瑞香狼毒醇提物中的双二氢黄酮类化合物对肺癌细胞具有明显抑制作用.     

胆管支气管瘘诊疗进展

<正>胆管支气管瘘是指胆管与支气管之间出现相互交通的瘘管。由于肝脏分泌的胆汁可经该通道咯出体外,所以患者多因胆汁的化学性刺激及细菌性感染出现急性坏死性肺炎,导致较高的死亡率^[1,2]。1850年Peacock^[3]首次报道了1例肝包虫病患者发生胆管支气管瘘,此后相继有了该病的报道。但大部分文献均为个案报道,较少有系统性阐述该病的相关资料。故此本文通过回顾国内外相关文献,从病因、发病机制、临床表现、并发症、诊疗进展等方面对胆管支气管瘘进行综述。