Em18重组抗原特异性抗体的制备及对循环抗原检测的初探

目的 用Em18重组抗原ReEm18制备特异性抗体,建立双抗体夹心ELISA,检测患者血清中的循环抗原.方法 ReEm18经亲和纯化,免疫BALB/c小鼠和新西兰兔,分别制备单克隆抗体(单抗)和多克隆抗体(多抗).用获得的单抗和多抗建立双抗体夹心ELISA,检测患者血清中Em18循环抗原.结果 免疫兔血清抗ReEm18抗体效价达1∶204 800以上.经ReEm18和多房棘球蚴病(AE)患者血清及健康人血清阻断ELISA试验双重筛选融合细胞,共获得14株抑制率＞50%的特异性阳性细胞克隆.将特异性单抗和多抗自由组合进行双抗体夹心ELISA,结果以9号单抗与多抗的配对检测抗原为最优,检测ReEm18的灵敏度达3 ng/m1.用建立的双夹心ELISA方法检测血清,11份AE血清中6份为阳性.结论 获得针对ReEm18的特异性单抗和多抗,建立了敏感的双抗体夹心ELISA方法,血清学初步检测结果表明AE血清中存在可检测的Em18循环抗原.     

细粒棘球蚴抗原B表位结构的预测分析和多表位重组抗原的构建

目的对细粒棘球蚴抗原B(EgAgB)的3个亚单位(EgAgB1、EgAgB2和EgAgB4)的反应性表位的结构进行预测分析并进行基因重组,鉴定构建的多表位重组抗原的反应性。方法用Bioedit和Discovery Studio Visualizer分析软件和I-TASSER在线服务器对EgAgB1、EgAgB2和EgAgB4等3个亚单位抗原序列及其不同组合方式的组合序列进行分析和结构预测。选择结构预测评分较高的表位或亚单位组合方式进行基因重组。设计特异性重叠引物,用重叠延伸PCR技术扩增目标序列。将目标序列克隆至pET32a(+)载体中构建表达质粒表达重组蛋白,表达产物经纯化后即为多表位重组抗原。采用蛋白质印迹(Western blotting)分析鉴定多表位重组抗原的反应性。结果结构预测显示,EgAgB1、EgAgB2和EgAgB4等3个亚单位的主要表位均呈"Z"字型结构,且主要表位区域亦均位于序列的中部;对拟进行组合的3个EgAgB亚单位和4个主要表位(KK36、RK30、B4-2和B4-3)的57种不同的组合方式进行了结构预测,选择6种组合方式进行重组表达。对6个多表位重组抗原(MEA-8、MEA-20、MEA-26、MEA-36、MEA-49和MEA-52)进行的Western blotting分析显示,多表位重组抗原与细粒棘球蚴病患者血清的反应条带明显强于AgB亚单位抗原。结论构建的6个多表位重组抗原与细粒棘球蚴病患者血清的反应性明显强于EgAgB亚单位抗原。     

微小RNA与弱精子症发病机制的相关研究进展

男性不育已成为人类生殖领域中的严重问题,弱精子症作为男性不育症最常见的类型,至今对其发病机制尚未确切阐明。近年来,随着微小RNA（miRNA）的功能研究在男性不育领域的不断深入,人们一致认为,miRNA通过调控其特异的靶基因转录和翻译而影响精子发生过程。本文对miRNA在弱精子症发病机制中参与调控作用的研究进行综述。     

集体儿童血色素分析

1　对象与方法1.1　对象　孝感市区 2 5所幼儿园 2～ 6岁儿童。1.2　方法　被调查者右手无名指血 ,用 72 1光谱比色仪、氰化高铁血红蛋白比色法。1.3　标准　根据 WHO诊断标准 ,6个月至 6岁儿童血红蛋白低于 10 g/ L 为贫血。2　结果2 .1　 2～ 6岁贫血发生率为 2 6% ,其中尤以 2岁年龄组发病率最高为 32 .8% (表 1)。2 .2　公立幼儿园儿童贫血发病率随年龄增长而降低 (表 2 ) ,经显著性检验各年龄组之间贫血发生率差异有统计学意义(P<0 .0 0 1)。表 1　各年龄组贫血发病情况年龄组(岁 )受检人数(人 )贫血例数(例 )贫血率(% )2～ 6 5 5 2 …     

18kDa抗原诊断泡型包虫病的评价

目的：评价１８ｋＤａ抗原在泡型包虫病（ＡＥ）诊断中的价值。方法：用免疫印渍法检测３３例泡型包虫病、６９例囊型包虫病（ＣＥ）、３０例囊虫病和８２例健康人血清对泡型棘球蚴（Ｅｍ）和囊型棘球蚴（Ｅｇ）原头节１８ｋＤａ抗原的抗体反应。同时用羊包囊液抗原常规ＥＬＩＳＡ法检测上述血清。结果：ＥＬＩＳＡ试验,ＡＥ血清阳性率为９３．９％、ＣＥ为８５．５％、囊虫病为５０％、健康人为６．１％。显示３种患者血清存在较强的交叉反应。免疫印渍试验,两种原头节的１８ｋＤａ抗原对ＡＥ血清阳性反应均为９０．９％、ＣＥ分别为１０．１％和１３％、囊虫病患者为１３．３％和１６．７％。与健康人血清不发生反应。结论：１８ｋＤａ抗原可以有效的鉴别两型包虫病。     

我国食物源性寄生虫病的流行形势与对策

从首次全国人体寄生虫分布调查［１］以来,我国主要食物源性寄生虫病防治研究已取得了长足的进展。但近几年来,由于经济的发展,人民生活水平的提高而引起的膳食结构改变和随着改革开放的深入发展、商业活动的兴旺而带来的鲜水产品、活畜、畜产品易地贸易频繁以及众多人...     

老年急性腹泻并低血压63例护理体会

2002年5月～2004年10月,我院共收治65岁以上老年腹泻患者830例,合并低血压者63例,经采取积极有效治疗、护理措施,效果满意.现将护理体会报告如下.     

反复种植失败患者的外周血Th17/调节性T淋巴细胞的失衡情况

目的 探讨反复种植失败(RIF)患者外周血Th17/调节性T淋巴细胞(Treg)的失衡情况。方法 纳入26例RIF患者(RIF组)和27例非妊娠期且生育功能正常的女性(对照组)。于月经周期的增殖晚期,检测两组外周血单核淋巴细胞中叉头状/翅膀状螺旋转录因子P3(FOXP3)与视黄酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)的mRNA表达量,以及CD4⁺IL-17A⁺Th17/CD4⁺T淋巴细胞比值和CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺Treg/CD4⁺T淋巴细胞比值;并检测两组血清转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-17A、IL-23蛋白水平。结果 RIF组CD4⁺IL-17A⁺Th17/CD4⁺T淋巴细胞比值及RORγt mRNA表达量均高于对照组,而CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺     

腹腔镜辅助与腹式肌瘤剔除术治疗子宫肌瘤临床比较

目的 观察腹腔镜辅助与腹式肌瘤剔除术治疗子宫肌瘤的临床效果.方法 148例子宫肌瘤患者,完全随机分为腹腔镜组(75例)和腹式组(73例),腹腔镜组给予腹腔镜辅助肌瘤剔除术,腹式组给予腹式肌瘤剔除术,术后均随诊6个月.观察患者手术时间及术中出血量、单个肌瘤剔除时间、肠功能恢复时间、术后住院时间及术后感染率.结果 腹腔镜组手术时间47～124min,出血量84 ～301 mL;腹式组手术时间60～187min,出血量112～413mL,腹腔镜组出血量明显小于腹式组(P＜0.05).单个肌瘤剔除时间,腹腔镜组明显长于腹式组(P＜0.05).腹腔镜组术后住院2～5d,肠功能恢复时间7～23 h,术后感染2例(2.67％);腹式组术后住院3 ～10d,肠功能恢复21～56h,术后感染11例(15.07％).腹腔镜组住院时间及肠功能恢复时间均明显短于腹式组(P＜0.05),术后感染率也明显低于腹式组(P＜0.05).术后随诊6个月,所有患者B超检查肌瘤无复发、无明显肌瘤结节.结论 腹腔镜辅助肌瘤剔除术相较于腹式肌瘤剔除术具有术中出血量少,创伤小,住院时间短,术后肠功能恢复快,感染少的特点,是一种值得推广的微创手术.