小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定

目的:构建携带小鼠FoxP3基因的重组腺相关病毒,并检测其在NIH3T3细胞的表达情况。方法:将FoxP3通过内部核糖体进入位点(IRES)与报告基因增强型绿色荧光蛋白连接,构建同时含有目的基因和报告基因的重组腺相关病毒(rAAV)表达质粒,通过磷酸钙沉淀法共转染HEK293细胞,收获并通过肝素亲和层析法纯化病毒,并对病毒纯度和滴度进行鉴定。利用携带FoxP3基因的重组病毒体外感染小鼠NIH3T3细胞,体外观察感染效率和目的基因转录情况。结果:包装成功的rAAV/FoxP3经纯化后获得了高纯度的rAAV/FoxP3,实时定量PCR检测rAAV/FoxP3的病毒滴度达到5.0×1012vg/mL,体外感染NIH3T3细胞,流式细胞术测定感染效率可达92.88%,实时PCR测定细胞内存在高水平FoxP3mRNA。结论:获得携带FoxP3-IRES-EGFP的rAAV,并可有效感染NIH3T3细胞,为进一步研究FoxP3的生物学功能提供了有效工具。     

细胞因子Midkine融合蛋白的表达及其单克隆抗体的制备与应用

目的:克隆细胞因子midkine(MK)基因,表达其融合蛋白,制备抗MK单克隆抗体(mAb)并检测MK在肿瘤细胞中的表达。方法:利用MK基因的特异性引物,通过RT-PCR从人肾癌组织mRNA中扩增人MKcDNA分子。将其定向克隆于原核表达载体中,在大肠杆菌中表达MS2-MK融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,用传统的杂交瘤技术,进行细胞融合、筛选、克隆化并制备mAb腹水。用ELISA法分析其Ig亚类,用免疫细胞化学染色法检测MK在肿瘤细胞中的表达。结果:成功地克隆出MK基因并表达了MS2-MK融合蛋白。通过免疫和筛选,获得2株分泌小鼠抗人MKmAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb的Ig亚类分别为IgG1和IgG2a。免疫细胞化学染色显示,2株mAb与人胃癌细胞株MGC803和胃癌组织呈强阳性反应。结论:在原核细胞中获得MS2-MK融合蛋白的表达,并制备出抗MK的mAb,为研究MK的生物学活性提供了条件。     

高尿酸血症患者超敏C反应蛋白与微量白蛋白尿关系分析

近年国内流行病学资料显示,高尿酸血症(Hyperurice-mia,HUA)的患病率逐年上升。HUA不仅常伴发糖尿病、冠心病、高血压、脂质代谢紊乱,也是慢性肾脏病(CKD)的高危因素,存在亚临床的慢性炎症状态。超敏C反应蛋白(high sensitive C-reactive protetn,hs-CRP)作为炎症因子,与机体炎     

表达载体介导的反义RNA抑制人巨噬细胞移动抑制因子的表达

目的：研究表达载体介导的反义RNA对人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)表达的抑制作用。 方法:用亚克隆技术构建可转录MIF反义RNA的真核表达载体pcDNA3-antiMIF。用lipofectamine2000分别将pcDNA3、pcDNA3-antiMIF转染可表达MIF的HEK293(293-MIF)细胞，用Real-time定量PCR鉴定MIF mRNA表达水平。将pcDNA3-antiMIF转化人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)，建立可表达MIF反义RNA的HUVECs(HUVECs-antiMIF)细胞。将MIF的真核表达载体pSecTag-MIF转染HUVECs-antiMIF，用Real-time定量PCR鉴定MIF mRNA的表达水平。 结果:正确构建了MIF反义RNA的表达载体pcDNA3-antiMIF。MIF 反义RNA对293-MIF细胞中MIF表达的抑制水平达32%（P<0.05）。建立稳定表达MIF反义RNA的HUVECs-antiMIF细胞株。HUVECs-antiMIF中MIF的表达受到抑制，表达水平降低40%（P<0.05）。 结论:表达载体介导的反义RNA能有效地抑制MIF的表达，建立了稳定表达MIF反义RNA的HUVECs。     

基于“互联网+”技术的上海市质子重离子医院资产管理的 探索和实践

针对医院资产管理的现状和难点,将平台中的空间管理同资产管理相结合,进行数据交互和功能拓展,不仅使医院空间和资产同步系统化、数据化,而且汇聚了资产管理全维度数据源,达到优化资源配置、降本增效的实践成果,也为建立基于云数据的资产设备全生命周期管理夯实基础。     

基于SMOTE算法的化疗肿瘤患者下呼吸道感染预警模型构建

 目的 构建基于少数类样本合成过抽样技术（synthetic minority over-sampling technique,SMOTE）算法的化学治疗（化疗）肿瘤患者下呼吸道感染预警模型。方法 共纳入西宁市4所三级医院2019年1月-2021年6月收治的2 384例接受化疗的肿瘤患者为研究对象,将所收集病例按照7：3的比例随机分为建模组1 668例和验证组716例,建模组数据用来建立模型,验证组数据对所建立的模型进行验证,利用单因素比较和logistic回归分析筛选下呼吸道感染影响因素,基于SMOTE算法建立化疗肿瘤患者下呼吸道感染预警模型。结果 logistic回归分析可得,年龄（x₁）、身体质量指数（BMI）值是否正常（x₂）、恶性肿瘤分期（x₃）、吸烟史（x₄）、合并糖尿病（x₅）、合并肺部疾病（x₆）均是化疗肿瘤患者下呼吸道感染的危险因素（均P<0.01）,获得原始数据预警模型：Logit（P）=0.055x₁+0.967x₂-0.195x₃+1.383x₄+0.968x₅+0.939x₆-14.073和基于SMOTE算法的预警模型：Logit（P）=0.090x₁+1.092x₂-0.249x₃+1.724x₄+1.136x₅+1.344x₆-14.859。基于SMOTE算法预警模型AUC为0.949（95%CI：0.937~0.961）,高于原始数据预警模型AUC 0.780（95%CI：0.734~0.846）。结论 基于SMOTE算法所构建的预警模型能更准确预警化疗肿瘤患者下呼吸道感染,有效解决感染与非感染患者样本数据不平衡所导致的预测误差,基于预测模型可选择相应的对策进行应对。     

血活素治疗急性黄疸型肝炎临床疗效观察

血活素是从胎牛血、肝、胸腺中提取的活性物质 ,近年用于治疗肝炎 ,我们应用血活素治疗急性黄疸型肝炎 2 8例 ,取得良好效果 ,现报告如下。1　临床资料1.1　一般资料 :5 2例急性黄疸型肝炎患者为我院住院病人 ,诊断符合 1995年 (北京 )全国传染病与寄生虫病学术会议讨论修订的急性黄疸型肝炎标准 [1]。随机分为血活素治疗组和对照组。治疗组 2 8例 ,男 2 0例 ,女 8例 ,年龄 18～ 60岁 ,平均 34 .5岁。其中甲肝 2例 ,丙肝 2例 ,乙肝 2 4例。对照组 2 4例 ,男 18例 ,女 6例 ,年龄 2 0～ 61岁 ,平均 35 .2岁。其中甲肝 4例 ,丙肝 1例 ,乙肝 19…     

感染患者外周血及骨髓涂片细胞形态观察

为探讨感染患者外周血及骨髓细胞的形态学变化,对120例确诊有感染性病症者进行外周血及骨髓细胞形态分析。感染患者中除常见白细胞增高或减低、核左移、粒细胞形态中有中毒改变外,骨髓中网状细胞增高者占15％,伴吞噬细胞增高的占8.3％,有异型淋巴细胞出现的占19．2％,浆细胞相对增高的占14．2％。部分感染患者骨髓会有网状细胞、吞噬细胞及浆细胞的反应性增生,亦可伴有异型淋巴细胞的增生。     

辅助循环在冠状动脉旁路移植术中的应用

辅助循环技术包括主动脉内球囊反搏 (ＩＡＢＰ)、离心泵或人工心肺机转子泵左心转流和体外膜肺氧合 (ＥＣＭＯ)等方法 ,是治疗心脏术后严重低心排综合征患者的有效措施 ,使其存活率达到 30 %～ 5 0 % [1 4 ] 。本院自 1997年 8月～2 0 0 0年 8月共完成 94例冠状动脉旁路移植术 (ＣＡＢＧ) ,其中 8例因低心排不能脱离体外循环心肺转流 (ＣＰＢ)或术后严重室性心律失常而采用辅助循环治疗 ,3例存活。报道如下。资料与方法一、一般资料8例患者均为男性 ,年龄 44～ 72岁 ,平均 (6 3.6±9.5 8)岁。心功能 (ＮＹＨＡ)Ⅱ级 1例 ,Ⅲ级 3例 ,Ⅳ级 4例…