基于生物信息学分析Mindin低表达Huh7细胞的差异表达基因

目的构建Mindin低表达的Huh7细胞并对其进行转录组学研究,以探索Mindin的生物学作用。方法设计并合成Mindin干扰序列,通过慢病毒载体GV248将其导入Huh7细胞,实时定量PCR检测对Mindin转录水平的抑制效果,获得Mindin低表达Huh7细胞并对该细胞及其对照细胞进行转录组学研究,生物信息学分析表达异常基因,Pathway分析Mindin可能参与的生物学功能。计量资料2组间比较采用t检验。结果与对照细胞相比,含干扰序列的慢病毒感染Huh7细胞后,其Mindin mRNA的敲减效率为63. 8%(P=0. 003)。Mindin稳定低表达的Huh7细胞迁移率明显高于对照细胞(3. 511±0. 538 vs 1. 701±0. 765,t=-3. 355,P=0. 03)。与对照细胞相比,Mindin低表达Huh7细胞有2888个上调基因,2516个下调基因。取满足∣log2FC∣ 2. 0且P 0. 05的895个差异表达基因进行GO分析和Pathway分析。Pathway分析排名前10位的Mindin参与的生物学功能依次为:肿瘤信号通路、趋化因子信号通路、系统性红斑狼疮、甘油磷酸酯代谢、神经活性配体受体相互作用、肥厚性心肌病、甘油酯代谢、MAPK信号通路、凝血与补体级联反应和基底细胞癌。结论成功构建了Mindin低表达Huh7细胞,Mindin的生物学功能涉及广泛,包括肿瘤、趋化因子和脂代谢等方面。     

黄芪多糖对肝叶部分切除小鼠术后认知功能及p38MAPK磷酸化的影响

目的探讨黄芪多糖对肝叶部分切除小鼠术后认知功能及p38MAPK磷酸化的影响。方法老年雄性昆明小鼠随机分为假手术组(S组)、手术组(O组)和黄芪多糖+手术组(A组)。术后1、3、7d,采用Morris水迷宫检测小鼠学习认知功能;采用Western blot技术检测小鼠海马区p38MAPK磷酸化水平。结果术后3d和7d,与S组比较,O组潜伏期明显延长(P0.01),穿台次数明显减少(P0.01或P0.05),在目标象限停留时间明显缩短(P0.01);与O组比较,A组潜伏期明显缩短,穿台次数明显增加,在目标象限停留时间明显延长(P0.05)。术后1、3、7d,O组p38MAPK磷酸化水平明显升高(P0.05);与O组比较,A组p38MAPK磷酸化水平明显下降(P0.05或P0.01)。术后1、3、7d各组p38MAPK蛋白表达总水平差异无统计学意义。结论黄芪多糖能够明显改善肝叶部分切除小鼠术后认知功能障碍,其机制可能与其抑制p38MAPK蛋白异常磷酸化有关。     

小儿推拿联合思密达保留灌肠治疗秋季腹泻疗效观察

目的 观察小儿推拿联合思密达保留灌肠治疗秋季腹泻的临床疗效.方法 选取243例秋季腹泻患儿随机分为治疗组与对照组,均给予补液、纠正电解质紊乱、益生菌口服等常规对症处理.治疗组按治疗方法不同,又分为联合治疗组（推拿联合思密达保留灌肠）、推拿组和思密达保留灌肠组.结果 联合治疗组总有效率96.4%,推拿组总有效率85.2%,思密达保留灌肠组总有效率85.9%,对照组总有效率58.1%.联合治疗组有效率明显高于其余各组,差异有显著性;推拿组与思密达组有效率无显著差异;对照组有效率明显低于其余各组,差异有显著性.结论 小儿推拿及思密达保留灌肠治疗秋季腹泻疗效明显,二者联合应用效果有协同作用,值得临床推广.     

中性粒细胞碱性磷酸酶阳性积分在革兰阳性球菌感染检测中的应用价值

目的探讨中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）在革兰阳性（G^＋）球菌中的诊断价值。方法应用快速偶氮偶联法对本科室收治的感染者141例及非感染者425例进行NAP阳性率和阳性积分检测,对比分析革兰阳性菌感染者、革兰阴性菌感染者以及非感染者的NAP阳性率和阳性积分的差异。结果革兰阳性菌感染者的NAP阳性积分为（127.4±55.7）,显著高于非感染者的（89.3±46.3）和G^-菌感染者的（87.3±41.7）,差异具有统计学意义（P〈0.05）;感染和非感染组阳性积分分别为（103.2±55.7）和（87.3±41.7）,两组间差异无统计学意义（P〉0.05）,G^-菌感染组和非感染组阳性积分差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 NAP阳性积分可以作为判断革兰阳性菌感染的参考依据。     

薯蓣皂苷元通过调控miR-34a及其靶基因发挥抗胃癌作用

目的探讨薯蓣皂苷元对人胃癌细胞AGS的增殖、克隆形成、迁移及侵袭的抑制作用及可能机制。方法采用细胞增殖抑制率法检测薯蓣皂苷元对胃癌细胞AGS的增殖抑制率,平板克隆形成实验检测其对AGS细胞克隆形成能力的影响,划痕实验观察薯蓣皂苷元对胃癌细胞迁移作用的影响,细胞侵袭实验检测其对AGS细胞侵袭作用的影响。采用小分子核糖核酸(miRNAs)靶基因预测方法预测miRNA-34a(miR-34a)靶基因,实时定量聚合酶链反应(qPCR)方法观察薯蓣皂苷元对AGS细胞miR-34a及其靶基因转录因子E2F1、E2F3、细胞周期蛋白D1(CCND1)表达水平的影响,并分析其与胃癌患者预后。结果 24、30、36、42μmol/L及48μmol/L浓度的薯蓣皂苷元均可显著抑制胃癌AGS细胞增殖,其作用与时间及浓度呈正相关;克隆形成实验显示24、30、36、42μmol/L及48μmol/L浓度的薯蓣皂苷元可抑制AGS细胞克隆形成能力(P<0.01);24、30、36、42μmol/L及48μmol/L浓度的薯蓣皂苷元处理后的胃癌细胞迁移及侵袭能力均显著降低(P<0.01),且其作用与时间、浓度呈正相关。36μmol/L浓度的薯蓣皂苷元作用于AGS细胞后,可显著提高miR-34a表达水平,并降低miR-34a靶基因E2F1、E2F3及CCND1表达水平;E2F1、E2F3及CCND1基因表达与胃癌患者预后呈显著负相关。结论薯蓣皂苷元可能通过调控miR-34a,下调E2F1、E2F3及CCND1基因表达,发挥抑制胃癌AGS细胞的增殖、克隆形成、迁移及侵袭功能。     

长沙市甲型Ｈ１Ｎ１流感抗体水平趋势数学模型模拟研究

摘要：目的　采用常微分方程（ｏｒｄｉｎａｒｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｑｕａｔｉｏｎ,ＯＤＥ）模型模拟长沙市甲型Ｈ１Ｎ１流感抗体
水平。方法　根据甲型Ｈ１Ｎ１流感在人群中的传播及抗体消长特点,建立全人群及各年龄组人群抗体水平
变化趋势的ＯＤＥ 模型,利用长沙市人口学资料、以及长沙市人群血清学横断面调查资料拟合模型参数,并
模拟长沙市人群的抗体水平变化趋势、以及抗体水平低于人群最低免疫屏障的具体时间。结果　大流行结
束后疫苗接种者抗体水平高于未接种者,但前者的抗体消失速度高于后者,两者抗体水平分别在２０１０ 年
１２月和２０１３年１月开始接近人群最低免疫屏障。在疫苗接种人群中,抗体消失速度最快的是“≥６０ 岁”
年龄组,最慢的是“０～５岁”年龄组,而“６～１５岁”、“１６～２４岁”、“２５～５９岁”３个年龄组人群抗体水
平消失速度较为接近。在未接种疫苗人群中,抗体消失速度最快的是“６～１５ 岁” 年龄组,其次是“１６～
２４岁”、“０～５岁”、“≥６０岁”年龄组,最慢的是“２５～５９岁” 年龄组。长沙市流感监测数据显示,２０１３
年１月开始甲型Ｈ１Ｎ１流感成为优势毒株,并在１～４月份发生４起甲型Ｈ１Ｎ１流感暴发疫情和１起流感样
病例暴发疫情,这与模型预测结果相似。结论　本研究建立的ＯＤＥ 模型可以较好地模拟长沙市甲型Ｈ１Ｎ１
流感抗体水平变化特点。疫苗接种获得的免疫屏障维持时间比自然感染短。不同年龄组获得免疫屏障水平
不同、消减速度亦不同。
关键词：甲型Ｈ１Ｎ１流感;抗体;常微分方程模型;模拟
中图分类号：Ｒ１８１．２　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０３ ０１７３ ０８     

冠心病急性心梗并发室间隔穿孔的外科治疗

目的评价急性心梗并发室间隔穿孔外科治疗的临床经验和手术效果.方法总结昆明医科大学附属延安医院心脏大血管外科自2010年6月至2011年8月期间冠心病急性心梗并发室间隔穿孔及室壁瘤4例病例资料,均行IABP辅助,同期行冠状动脉旁路移植、室间隔穿孔修补及室壁瘤切除、线性修补术.结果 4例患者均康复出院.术后左室射血分数(LVEF)较前提高,左室舒张末容积(LVDD)较前缩小,术前NYHA心功能Ⅲ~Ⅳ级,术后NYHA心功能Ⅰ~Ⅱ级,心功能较术前明显改善.结论冠心病急性心梗并发室间隔穿孔合理选择手术时机是取得良好治疗效果的重要因素.     

免疫增强型肠内营养对胃肠道恶性肿瘤病人术后炎症反应的影响

目的观察免疫增强型肠内营养对胃肠道恶性肿瘤病人术后炎症反应的影响。方法将58例胃肠道恶性肿瘤术后病人随机分为免疫增强型肠内营养组（IEDs组）和常规肠内营养组（EN组）各29例,分别输注免疫增强型肠内营养制剂及常规肠内营养制剂。于术前1d和术后1、9d检测两组病人血清总蛋白（TP）、清蛋白（ALB）、前清蛋白（PA）、转铁蛋白（TRF）、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、白细胞介素6（IL-6）和c-反应蛋白（CRP）的水平;观察病人术后并发症发生情况、肛门排气恢复时间及住院时间。结果与术前1d比较,术后1dIEDs组病人CRP、IL-6、TNF-α分别增加了735．7％、38．8％、36．8％,差异有显著性（F=14．832～140．743,t=9．773～22．382,P〈0．05）;术后9d与术后1d比较,CRP、IL-6、TNF-α分别降低了54．1％、21．6％、20．3％,除IL-6恢复到术前1d水平外,CRP、TNF-α均显著高于术前1d水平（=2．226、18．056,P〈0．05）。IEDs组与EN组病人比较,TP、ALB、PA和TRF在术后9d分别升高了7．37％、11．24％、10．01％、17．58％,CRP、IL-6、TNF-α分别降低了37．14％、17．79％、15．90％;同时术后并发症发生率及住院时间显著下降（x2=3．835,t=2．153,P〈0．05）。结论免疫增强型肠内营养可降低胃肠道恶性肿瘤病人术后炎症反应,提高病人术后生存质量。     

医学本科生视角下预防医学专业三项教学新举措的评价

目的 通过对学生的访谈,初步探讨华西公共卫生学院预防医学专业3项教学新举措（小班化教学、实践与国际课程周、大学生创新计划项目）的实施效果,为教学改革提供参考。方法 采用专题小组访谈和个人深入访谈的定性研究方法,对70名预防医学专业高年级在校本科生进行调查。结果 调查对象普遍能够接受专题小组访谈和个人访谈的调查方法。多数学生认为小班教学的学习效果好于大班教学,但低于预期效果;大多数学生对实践与国际课程周的评价较低,认为学习收获甚微;学生对大学生创新计划项目的参与度较高,绝大多数学生认为自己的专业修养、研究能力等有所提升。结论 小班化教学的授课方式受到学生的普遍欢迎,但仍需在教学环节设置等方面有所调整;实践与国际课程周的整体教学效果较差,需在课程设置的多样性及学生选课的自主性上进行深入改进;学生对大学生创新计划项目的参与度较高、评价较好,但还应加强指导教师对学生选题的指导及基本研究方法的培训,以帮助学生更好地完成科研项目。     

足细胞标记蛋白及上皮钙黏素在糖尿病肾病中的表达及分析

目的探讨足细胞标记蛋白(PCX)及E-钙黏素表达与糖尿病肾病患者肾损害的相关性。方法选取2012年1月至2012年10月期间深圳市人民医院肾内科行肾活检的糖尿病肾病患者100例,同期选择健康体检者20例。对所有受试者的糖化血红蛋白(HbA1c)、24 h尿白蛋白排泄率(UAER)、血清肌酐(SCr)、24 h尿蛋白量、PCX、上皮钙黏素水平进行检测。根据UAER和SCr水平的不同将100例糖尿病肾病患者分为A、B、C、D 4组,其中A组28例,UAER<30 g/24 h,SCr≤135 μmol/L;B组30例,UAER 30²99 mg/24 h,SCr≤135μmol/L;C组22例,UAER≥300 mg/24 h,SCr≤135 μmol/L;D组20例,UAER≥300 mg/24 h,SCr>135 μmol/L,并以健康体检者为对照组。结果B组患者病程显著长于A组,C、D两组患者病程显著长于A、B两组(P<0.05),C、D两组病程差异无统计学意义(P>0.05)。A、B、C、D组患者HbA1c水平均显著高于对照组(P<0.05),但此四组患者之间差异无统计学意义(P>0.05)。B、C、D三组SCr均显著高于A组及对照组,且D组显著高于B、C两组(P<0.05),而A组与对照组之间以及B、C两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病肾病患者UAER水平显著高于对照组,且B、C、D组显著高于A组,C、D组显著高于B组(P<0.05),而C、D两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。24 h尿蛋白定量分析,B、C、D组显著高于A组和对照组,且C、D组显著显著高于B组(P<0.05),而A组和对照组之间以及C、D组之间差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病肾病患者PCX、上皮钙黏素水平均显著高于对照组,且B、C、D组显著高于A组,C、D组显著高于B组(P<0.05),C、D两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在UAER和SCr出现异常之前,患者的PCX、上皮钙黏素水平已经发生了改变,且随着肾脏损害程度的加重,这种改变越发显著。PCX、上皮钙黏素表达水平可以在糖尿病肾病早期反映肾脏损害程度,其敏感性优于UAER和SCr。