肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体表达载体的构建

【目的】构建一种携带肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体（TRAIL）基因的重组腺相关病毒载体。【方法】首先构建携带可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体（sTRAIL）基因的穿梭质粒pAAV—sTRAIL．将穿梭质粒共转染入HEK293细胞中．采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺相关病毒rAAV-8TRAIL。以噬斑分析法筛选单克隆重组腺相关病毒；PCR法鉴定阳性重组腺相关病毒；氯化铯密度梯度离心法纯化病毒；紫外分光光度仪测定病毒颗粒数及纯度，噬斑分析法测定病毒感染滴度；Westem blot检测rAAV—sTRAIL在293细胞中的表达情况。【结果】成功构建了重组腺相关病毒载体rAAV—sTRAIL，制备的病毒纯度好、滴度高，且在293转导细胞中能有效表达目的基因sTRAIL。【结论】构建的重组腺相关病毒载体rAAV-8TRAIL．为研究TRAIL抗肿瘤细胞效应及临床应用提供先进的载体系统。     

后路全椎板切除减压并椎弓根内固定治疗胸椎后纵韧带骨化合并黄韧带骨化

目的探讨对胸椎后纵韧带骨化(ossification of posterior longitudinal ligament,OPLL)合并黄韧带骨化(ossification of ligamentum flavum,OLF)患者行后路全椎板切除减压并椎弓根内固定治疗的临床疗效。方法回顾性研究2008年7月~2013年4月,15例胸椎OPLL并OLF患者行后路全椎板切除减压并椎弓根内固定术治疗。分别统计患者一般情况、手术时间、出血量、卧床时间、术后并发症发生率、术前术后日本骨科学会(Japanese Orthopaedic Association,JOA)评分,并进行比较。结果平均随访38.7个月,患者术前、术后3个月及末次随访时JOA评分分别为3.9±1.2、8.1±2.2及10.3±2.5,差异具有统计学意义(P<0.05)。术中1例患者出现脑脊液漏,术后1例患者出现浅表伤口感染,1例患者出现血肿。结论胸椎OPLL并OLF患者行全椎板切除减压并椎弓根内固定术治疗,可获得满意的临床疗效。但该术式容易造成严重脊髓损伤,对术者技巧要求较高。     

重组腺相关病毒介导caveolin-1基因表达抑制肝癌新生血管形成的实验研究

目的 探讨caveolin-1参与肝细胞癌血管生成及影响血管通透性的作用机制.方法 构建肝癌细胞系HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,局部注射编码重组可溶性caveolin-1蛋白的重组腺相关病毒载体rAAV-PEG-caveolin-1,观察其对肝癌细胞生长的抑制作用;通过肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)检测肿瘤新生血管的生成;Western blot检测脉管标志蛋白PECAM-1表达改变;FITC标记右旋糖苷测定肿瘤微血管通透性;放射强度测定法检测肝癌组织中eNOS活性,TUNEL法检测caveolin-1对肿瘤细胞的诱导凋亡效应.结果 rAAV-PEG-caveolin-1转染组治疗第14天后,移植瘤的瘤重较对照组和空载体转染组有不同程度的减小(P＜O.05);免疫组化分析及Western blot结果显示rAAV-PEG-caveolin-1转染组较对照组及空载体组MVD及PECAM-1表达显著减少(P＜0.05);FITC-右旋糖苷测定表明rAAV-PEG-caveolin-1可有效降低肿瘤微血管通透性;rAAV-PEG-caveolin-1转染组较对照组及空载体组eNOS活性明显下降(P＜0.05);TUNEL分析显示rAAV-PEG-caveolin-1可诱导肿瘤细胞凋亡.结论 Caveolin-1是血管生成调节的关键分子,能显著抑制肿瘤新生血管的形成,并能有效降低肿瘤微血管的通透性.     

降钙素原、C反应蛋白、血小板及嗜酸性粒细胞对脓毒症患者预后的影响降钙素原、C反应蛋白、血小板及嗜酸性粒细胞对脓毒症患者预后的影响

目的:探讨血小板(PLT)及嗜酸性粒细胞和降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)水平在脓毒症患者预后判断中的意义.方法:选取急诊收入的脓毒症患者104例,根据预后分为存活组及病死组,分别检测2组患者PLT及嗜酸性粒细胞和PCT、CRP水平.结果:2组患者嗜酸性粒细胞差异无统计学意义(P>0.05),而PLT、PCT及CRP差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01).PCT、CRP进入logistic回归模型,而PLT未能进入.结论:PLT是影响预后的影响因素,PCT、CRP水平是影响脓毒症的独立危险因素,嗜酸性粒细胞对脓毒症患者的预后无明显影响.     

糖尿病并发低血糖昏迷1例

患者,女,对岁。因患糖尿病20年,昏迷3个小时,于1998年8月14日收入院。患者20年来坚持食无糖饮食,同时口服矿脉类降糖药物。近日来患者饮食量明显减少,但是降糖药物并未减量。于3个小时前,患者突然感心悸、饥饿、同时出大汗、双手抖动、继之说不出话、四肢瘫软、意识丧失。当时无恶心呕吐,无抽搐,无大小便失禁。查体：体温36℃,脉搏108次份,呼吸22欢呼,血压20．6／9．7kPa。症状：昏迷,唤之不应,压眶无反应,面色苍白,肢端湿冷、苍白,球结膜水肿,两侧瞳孔略增大等国,对光反射迟钝。心肺腹均正常。四肢肌张力减低,肌力O级…     

手辅式腹腔镜右半结肠癌根治术在老年肥胖患者中的应用

目的评价手辅式腹腔镜右半结肠癌根治术在老年肥胖患者中的应用价值。方法回顾分析我院行手辅式腹腔镜右半结肠癌根治术的老年肥胖患者20例，以及同期开腹右半结肠癌根治术患者25例，并进行两组比较。结果两组均无手术死亡病例，均行一期吻合；手辅式腹腔镜组术中出血量少、术后体温恢复快、排气早、术后住院时间短、与开腹组相比差异有显著性意义（P〈0．01）；手辅式腹腔镜组手术时间与开腹组差异无显著性意义；手辅式腹腔镜组手术切除标本长度、清扫淋巴结总数及术后并发症与开腹组比较均无显著性差异。结论手辅式腹腔镜右半结肠癌根治术应用于老年肥胖患者，具侵袭性小、操作安全可行、术后恢复快等优点，是一种较为理想的微创手术方式。     

磁共振胆胰管成像在决定胆源性胰腺炎胆道探查中的指导作用

目的　探讨胆源性胰腺炎中磁共振胆胰管成像 (MRCP)在决定胆道探查中的作用。方法　回顾性分析 1995～ 2 0 0 2年间两阶段胆源性胰腺炎行胆道探查的病例资料 :1995～ 1999年 46例无MRCP检查 ,术前B超提示胆囊结石、胆总管结石及胆管扩张 ;2 0 0 0～ 2 0 0 2年 3 0例术前经MRCP检查提示胆囊结石、胆总管结石及胆管扩张或胆总管下段狭窄。结果　第一阶段术中探查及术后T管造影显示无结石 ,无胆总管下段梗阻或十二指肠乳头狭窄 2 8例 (60 .9% ) ;第二阶段术中探查及术后T管造影显示无结石 ,无胆总管下段梗阻或十二指肠乳头狭窄 7例 (2 3 .3 % )。第二阶段经MRCP指导的胆道探查阴性率较第一阶段明显为低 (P <0 .0 5 )。结论　胆源性胰腺炎应严格掌握胆道探查指征 ,术前MRCP检查可显著降低术中胆总管探查阴性率 ,MRCP有助于判断胆源性胰腺炎是否需行胆道探查。     

胰头囊性肿瘤的手术策略15例报告

目的探讨胰头部囊性肿瘤的治疗策略。方法回顾性分析2000年1月至2009年12月收治的15例胰头部囊性肿瘤患者的临床资料。结果上腹饱胀不适及黄疸为胰头部囊性肿瘤患者最主要的症状。术前超声检出率为80%（12/15）,CT检出率为100%。所有患者均接受手术治疗,手术方式包括肿瘤局部切除、胰十二指肠切除、保留幽门的胰十二指肠切除及胆总管空肠吻合。术后并发症率53.3%（8/15）,随访率86.7%。结论对胰头部囊性肿瘤,术前CT或MRI检查及术中冰冻病理检查非常重要,根据上述情况采取个体化的手术方式。     

终末期肝病模型在肝癌破裂出血急诊术前评估中的应用

目的探讨终末期肝病模型（MELD）评估肝储备功能在原发性肝癌破裂出血中确定急诊手术适应证的应用价值。方法2002年1月至2005年4月间在传统的手术适应证标准的基础上联合MELD评估后,急诊肝切除治疗肝癌破裂出血18例。结果全部病例MELD分值〈18,均值为（13.3±4．2）分。18例患者均顺利完成手术,无围手术期死亡。15例获得随访,生存时间为4～51个月。1、3年生存率分别为66．7％（10／15）、33．3％（5／15）。结论在经过临床选择的病例中,急诊肝切除治疗原发性肝癌破裂出血是安全可行的,疗效显著。MELD评分简单,能够客观地反映肝储备功能,对原发性肝癌破裂出血确定合理的治疗方案有重要的参考价值。     

多层螺旋CT在胰腺实性-假乳头状瘤诊治中的应用

目的 探讨多层螺旋CT(MSCT)在胰腺实性-假乳头状瘤(SPTP)的诊断和治疗中的意义,以提高SPTP的诊疗水平.方法 回顾性分析经手术病理证实12例SPTP的临床、病理学和CT资料.结果 SPTP具备典型的螺旋CT表现:平扫为边缘清晰的囊实性占位,增强扫描病灶囊性部分不强化,实性部分轻至中度强化,病灶边缘均可见光滑且明显强化包膜.MSCT三维成像可清楚显示病灶与周围脏器和血管的解剖关系.CT所见12例中2例包膜不完整,3例侵犯十二指肠肠壁,2例肠系膜上静脉受侵犯,1例与脾脏粘连紧密.12例均行手术切除,肿瘤均为单发,直径4 cm～18cm.术中所见的肿瘤与胰腺及周围脏器、血管的解剖关系与CT表现相符;病理所见与CT表现对应良好.结论 SPTP的CT表现具有一定的特征,结合临床表现,多数可在术前作出准确诊断,为治疗提供重要依据.MSCT三维成像技术可为术前评估和手术方案提供重要参考,提高SPTP的诊疗水平.