海绵共附生真菌Nigrospora sp.的次级代谢产物及PD-1/PD-L1抑制活性研究

目的 研究海绵Callyspongia sp.共附生真菌Nigrospora sp.中化学成分以及生物活性。 方法 利用正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和半制备型反相高效液相色谱(RPLC)等方法对该菌株乙酸乙酯提取物进行分离纯化;通过核磁共振谱(NMR)、质谱(MS)等技术并结合文献报道数据分析鉴定化合物结构;采用均相时间分辨荧光(HTRF)法检测化合物的PD-1/PD-L1结合抑制活性。结果 分离得到7个已知化合物,分别为punctaporonin D (1),punctaporonin E (2),punctaporonin F (3),desuccinoylpunctaporonin C (4),(20S, 22E, 24R)-麦角甾-7, 22-二烯-3β, 5α, 6β-三醇 (5),(22E, 24R)-麦角甾-3β-羟基-5α, 9α-环氧-7, 22-二烯-6-酮 (6),麦角甾-7, 22-二烯-6β-甲氧基-3β, 5α-二醇 (7)。在体外生物活性检测中,化合物6显示出PD-1/PD-L1结合抑制活性,其IC50值为22.5 μmol/L。结论 化合物4为新天然产物,化合物1-3和化合物6为首次从该属真菌中分离得到。化合物6显示PD-1/PD-L1结合抑制活性。     

正交设计多指标综合评分优化鳖甲微波灭菌工艺

目的:优选鳖甲的微波灭菌工艺。方法:以药材含湿率、灭菌时间、灭菌功率为考察因素,以灭菌率和鳖甲抗肝纤维化作用(人肝星状细胞LX-2生长抑制率)为评价指标,采用正交设计多指标综合评分法优化微波灭菌鳖甲的工艺参数。结果:最佳微波灭菌工艺参数:灭菌时间为6min,药材含湿率为20%,灭菌功率为4 000W。结论:正交设计多指标综合评分法可用于鳖甲微波灭菌工艺的参数优化,该方法简便可行,且灭菌效率高,对鳖甲抗肝纤维作用无影响。     

Sp1在 NK／T 细胞淋巴瘤细胞株中的表达及其对细胞侵袭的影响

目的：观察转录因子 Sp1在 NK／T 细胞淋巴瘤（NK／TCL）细胞株中的表达及其对细胞侵袭的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）、免疫荧光和 Western blot 法测定 NK／TCL 细胞株 SNK-1、SNK-6和健康人 NK 细胞中 Sp1的表达;采用 Sp1抑制剂光神霉素 A（MIT）作用于 NK／TCL细胞株后,用实时荧光定量 PCR 和 Western blot 法检测 Sp1、胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）和基质金属蛋白酶2（MMP-2）的表达;采用 Transwell 实验观察 MIT 对细胞侵袭力的影响。结果 NK／TCL 细胞株SNK-1、SNK-6中 Sp1基因和蛋白高表达。其中基因的表达水平分别是健康人 NK 细胞的（9.4±0.3）倍和（10.6±0.3）倍（P＝0.0052,P＝0.0037）,蛋白的表达水平分别是健康人 NK 细胞的（5.4±0.3）倍和（8.6±0.5）倍（P＝0.0083,P＝0.0069）。100 nmol／L MIT 抑制 Sp1后,与二甲基亚砜处理的对照组相比,细胞株中 IGF-1R 的基因表达量分别下降了（83.9±3.7）%和（65.8±4.2）%（P＝0.0082,P＝0.0097）,蛋白表达量分别下降了（51.5±7.1）%和（49.6±9.1）%（P＝0.0178,P＝0.0155）。100 nmol／L MIT 处理细胞后 SNK-1、SNK-6细胞的侵袭率分别下降了（29.6±6.4）%和（37.2±7.6）%（P＝0.0418,P＝0.0372）,MMP-2蛋白表达量分别是对照组蛋白表达量的（52.7±4.7）%、（29.7±5.6）%（P＝0.0286,P＝0.0202）。结论 NK／TCL细胞株高表达 Sp1,其可能通过正调控 IGF-1R 增强 MMP-2的表达,进而提高 NK／TCL 细胞的侵袭力。     

神经内镜微创手术与小骨窗开颅显微手术治疗幕上高血压脑出血的临床效果

目的 比较神经内镜微创手术与小骨窗开颅显微手术治疗幕上高血压脑出血的疗效.方法 选择2015年6月-2016年3月接受手术治疗的幕上高血压脑出血72例,根据手术方式分为观察组39例和对照组33例,观察组采取神经内镜微创手术,对照组采取小骨窗开颅显微手术.比较2组手术情况、术后及预后情况.结果 观察组术中出血量少于对照组,手术时间和入住ICU时间短于对照组(P＜0.05).观察组血肿清除率、预后良好率高于对照组,并发症发生率低于对照组(P＜0.05).观察组术后神经功能缺损评分较治疗前和对照组降低,日常生活能力评分高于治疗前和对照组(P＜0.05).结论 神经内镜微创手术治疗幕上高血压脑出血临床疗效优于小骨窗开颅显微手术,能缩短治疗时间,促进神经功能恢复,改善预后.     

41例男性不育症睾丸活检病理分析

不育症源于男性者约占5～10%,造成不育的原因可归纳为:1.睾丸前原因,常指下丘脑和脑垂体异常引起者。2.睾丸原因,由睾丸原发病引起不育。3.睾丸后原因,由于睾丸输出道的阻塞,其精     

HPLC-ELSD法测定消癌平注射液中牛奶菜醇和果糖含量

目的：建立HPLC-ELSD法测定消癌平注射液中牛奶菜醇和果糖的含量。方法：采用COSMOSIL Sugar-D糖分析专用柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,乙腈-水（80∶20）为流动相,ELSD漂移管温度：100℃,氮气流量：2.5 L·min-1。结果与结论：牛奶菜醇和果糖在标准曲线范围内有较好的线性关系（r>0.9994）。本法简便、准确,为消癌平注射液中大极性成分的质量控制提供了依据。     

UPLC-MS-MS法测定Caco-2细胞转运液中齐拉西酮浓度

目的：本文快速测定细胞转运液中齐拉西酮（ZIP）含量的方法用于ZIP的细胞实验。方法：UPLC串联MS/MS：Acquity UPLC BEH C18柱（50×2.1mm i.d.,1.7μm）;50CH3OH：50水（v/v）为流动相（水相包括15mM CH3COONH4及0.125%CH3C00H）;进样2.0μL;流速：0.25ml/min;柱温：40℃。液液萃取法处理样品。结果：ZIP峰1.15min、内标（IS）峰1.23min。样品的分析时间〈2.0min。无拖尾、无干扰。结论：本检测方法快速、精确、重现性良好,适合于非典型抗精神药物ZIP细胞实验中的浓度测定的需要。     

2型糖尿病患者的超敏C-反应蛋白水平与24h尿微量白蛋白的关系

目的研究检测不同时期糖尿病肾病患者血清C-反应蛋白（CRP）水平,分析CRP与糖尿病肾病的关系。方法2型糖尿病106例,根据尿微量蛋白将其分为3组：①正常微量白蛋白尿组（DM1）尿白蛋白排泄率（UAE）〈30mg/24h,49例;②微量白蛋白尿组（DM2）,UAE30-300mg/24h,39例;③临床白蛋白尿组（DM3）UAE〉300mg/24h,18例;④正常对照组（NC20例）。测定血肌酐、血超敏C-反应蛋白。结果24h尿微量白蛋白阳性的2型糖尿病患者的超敏C-反应蛋白明显高于24h尿微量白蛋白阴性的2型糖尿病患者（P〈0.01）,糖尿病患者的超敏C-反应蛋白与24h尿微量白蛋白呈显著正相关（P〈0.01）。结论糖尿病组的超敏C-反应蛋白水平与尿微量白蛋白呈显著正相关,表明糖尿病肾病可能与炎性反应过程有关。     

表阿霉素联合XELOX方案治疗晚期胃癌疗效与安全性分析

目的探讨表阿霉素联合XELOX(奥沙利铂联合希罗达)治疗晚期胃癌的疗效及安全性。方法收集我院2006年6月～2010年12月采用表阿霉素联合XELOX方案(即EOX方案)治疗的晚期胃癌进行回顾性分析,并与奥沙利铂联合希罗达化疗方案(单纯XELOX方案)进行比较。EOX组54例,XELOX组66例。结果 EOX方案组总有效率为38.9%(21/54),XELOX方案组总有效率36.4%(24/66),两组间无显著性差异(P>0.05);XELOX方案组手足综合征的发病率较EOX方案组高,但大多都为Ⅰ～Ⅱ度反应,而Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制、消化道反应、脱发的发病率较EOX低,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论表阿霉素联合XELOX方案治疗晚期胃癌的疗效与单纯XELOX方案治疗的疗效相近,毒副作用可耐受,对于体质较弱或对多次化疗反应后耐受性较差的患者,可能更适合单纯XELOX化疗方案。     

原发于眼睑皮肤恶性黑色素瘤的临床病理分析

目的 探讨原发于眼睑皮肤黑色素瘤的临床、病理及免疫组化特点.方法 回顾中山眼科中心1963年7月到2008年3月收治的12例眼睑皮肤恶性黑色素瘤患者临床资料,观察其临床病理特点并进行免疫组化分析.结果 眼睑皮肤黑色素瘤发病多发生于上睑,发病年龄平均在56.42岁,发病无性别、眼别差异.组织病理学以水平扩散型多见(7例,58.3%),其次为结节型(4例,333%),恶性雀斑(1例,8.3%).按细胞形态分型以上皮样细胞型多见,其次为混合细胞型和梭形细胞型.Breslow厚度平均1.73mm.临床分期以Ⅰ期多见.免疫组化HMB45,S-100染色均呈阳性表达.有随访资料的3例患者中2例于术后1年内死亡.结论 眼睑皮肤恶性黑色素瘤是一种预后较差的恶性肿瘤,肿瘤厚度和有丝分裂指数可作为预后相关指标.免疫组化HMB45、S-100染色有助于诊断.

Abstract：

Objective To study the clinicopathologic and immunohistochemical features of primary malignant melanomas of eyelid skin.Methods Retrospectively study of 12 cases of malignant melanoma of eyelid skin by pathological diagnosis at Zhongshan Ophthalmic Center between July 1963 and March 2008.The clinical data and histopathologic sections were reviewed and immunohistochemical stains were performed in each case.Results The upper eyelid was more frequently the site of origin.There was no gender or side prediction.Patients ranged in age from 25 to 85 years with an average of 56.42 years.The histopathologic classification of melanomas included superficial spreading melanoma (58.3%, 7 cases), nodular melanoma (33.3%,4 cases) and lentigo maligna melanoma (8.3%, 1 case).The average Breslow thickness was 1.73mm.Immunohistochemical stains showed 12 cases (100%) were positive for S-100 and HMB45.Two of three cases with fellow-up data available died of metastatic melanoma within one year.Conclusions The prognosis of primary malignant melanoma of eyelid skin is poor.Tumor thickness, mitotic rate are the most significant powerful predictors.HMB45 and S-100 are helpful for diagnosis.