Toll样受体在肝脏疾病中的功能

Toll样受体（Toll—like receptors，TLRs）是近年来发现的在天然免疫和获得性免疫系统中都发挥重要作用的模式识别受体（pattern recognition receptors，PRR）家族，能够识别病原微生物表达的保守结构基序（Motifs），即病原相关的分子模式（pathogen-associated molecular pattern，PAMP），包括细菌的细胞壁成分，含有胞嘧啶-腺嘌呤（CpG）的细菌DNA，病毒的单链及双链RNA等。作为一种PRR，TLRs构成了免疫系统识别“非己”的第一道防线，通过其信号转导途径，可以启动细胞因子的释放，激发机体对病原体的免疫响应。     

新型小鼠闭合型骨折造模仪的制作与模型评价

目的 设计发明一种新型骨骼击打装置,并优化髓内针固定手术方案,建立用于骨折愈合机制研究及骨折治疗药物评价的标准闭合型小鼠股骨骨折模型.方法 自主设计针对小鼠的骨折击打装置,精确控制击打能量,并采用以击打导线替代直接击打髓内针的方式对小鼠进行造模.术后通过影像学、组织学、分子生物学等方法评估骨折愈合进程.结果 将120 g重物从200 mm高处下落击打小鼠股骨干,通过X线证实在30只实验小鼠中,有26只为横形或斜形骨折,造模成功率86.667％.术后通过X线观察、micro-CT分析、组织化学染色和qPCR检测标志基因等技术判断小鼠骨折愈合的方式为软骨内成骨,愈合过程与文献报道一致.结论 自行设计的骨折造模仪操作简单、控制精确,可成功建立稳定、可重复的小鼠股骨闭合型髓内针固定的骨折模型,用于骨折愈合的基础及临床转化研究.     

HECT类泛素连接酶Smurf1自身调控机制的研究

目的泛素连接酶Smurf1在胚胎发育、骨形成调控和细胞极性控制中具有重要的生理功能,但是其自身的泛素化降解机制尚不清楚。本论文拟研究Smurf1分子间自我调控的机制,以期揭示一种新的泛素连接酶调控方式。方法通过免疫共沉淀实验确证了Smurf1分子间存在相互作用,体内泛素化、半衰期及降解实验研究了Smurf1的自身泛素化降解。结果 Smurf1存在分子间相互作用和泛素化降解,这种分子间的相互调控是由C2和WW结构域介导。结论 Smurf1分子间存在自我泛素化修饰及蛋白酶体依赖的降解,是一种新的HECT类泛素连接酶的调控机制。     

去泛素化酶Otulin基因心内膜敲除小鼠模型的构建及表型初步分析

目的 构建心内膜条件性敲除去泛素化酶Otulin基因小鼠模型,初步分析该模型小鼠的表型。方法 Cre?loxP重组技术构建心内膜条件性Otulin基因敲除小鼠模型;PCR技术明确Otulin基因敲除小鼠的基因型;统计分析敲除小鼠出生情况并观察其生长发育状态：超声监测小鼠心脏功能,全自动血液分析仪测定血液中细胞组分变化,苏木素?伊红（HE）染色评价小鼠各器官组织的病理改变。结果 心内膜特异性Otulin基因敲除小鼠模型成功构建;该条件性敲除小鼠可正常交配繁殖,子代基因型比例遵循孟德尔遗传定律;与同窝对照小鼠相比,该条件性敲除小鼠体型较小,体重减轻,脾明显肿大,血液中的炎性细胞数量显著增加,并且心脏组织三尖瓣缺损,心功能衰减。结论 成功构建心内膜特异性Otulin基因敲除小鼠模型,该模型小鼠心脏功能受损且有明显的炎症反应。