脑通复方制剂对血管性痴呆模型大鼠海马神经元细胞外调节蛋白激酶表达的影响

目的:探讨观察脑通复方制剂对拟血管性痴呆(VaD)模型大鼠海马神经元中分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导系统细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)及其磷酸化(p-ERK1/2)表达的影响。方法:采用改良Pulsinelli四血管阻断法复制大鼠血管性痴呆模型,脑通复方制剂治疗后观察学习记忆能力,Western-blotting法测定海马神经元总ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达。结果:脑通复方制剂可缩短实验大鼠逃避潜伏期,增加跨越平台次数;假手术组、VaD模型组、脑通复方制剂组及多哌齐特(安立申)组的ERK1/2蛋白水平分别为(1.20±0.19)、(1.11±0.14)、(1.18±0.13)、(1.25±0.14),任意两组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);假手术组、VaD模型组、脑通复方制剂组及多哌齐特(安立申)组p-ERK1/2蛋白水平分别为(0.75±0.07)、(0.38±0.08)、(0.58±0.10)、(0.65±0.08),模型组与假手术组相比p-ERK1/2蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.01);脑通复方制剂组和多哌齐特(安立申)组p-ERK1/2蛋白表达较模型组升...     

蛋白激酶Cδ在6-OHDA诱导大鼠多巴胺能神经元损伤过程中的作用

目的:探究蛋白激酶Cδ(PKCδ)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠多巴胺能神经元损伤的影响及其机制.方法:50只2月龄雄性SD大鼠,随机分为对照组(control)和6-羟基多巴胺注射组(6-OHDA).通过大鼠右侧纹状体注射6-OHDA溶液构建PD模型.运用旋转实验和圆筒实验检测平均旋转...     

脑通复方制剂对血管性痴呆大鼠治疗作用的探讨

目的：研究脑通复方制剂对血管性痴呆大鼠脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量的影响,探讨中药对血管性痴呆（VaD）大鼠空间学习记忆减退的防治作用。方法：采用改良Pulsinelli四血管阻断（4-VO）法制造VaD模型,设脑通复方制剂组、模型组、假手术组、盐酸多奈呱齐（安力申）组,分别测定干预后各组大鼠大脑海马组织中的SOD活性、MDA含量。结果：灌胃30 d后,与模型组相比,脑通复方制剂可改善VaD大鼠学习记忆能力,显著提高大鼠海马组织中SOD活性、明显降低MDA含量。结论：脑通复方制剂对血管性痴呆大鼠空间学习记忆减退有明显防治作用,其机制可能与其提高VaD大鼠脑组织中SOD活性、降低MDA含量作用有关。     

微小RNA-155和脑源性神经生长因子在砷对PC12细胞损伤中的表达及意义

目的 探讨微小RNA-155(miR-155)和脑源性神经营养因子(BDNF)在砷对PC12细胞损伤中的作用及机制。方法 培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤12(PC12)细胞株,将细胞分为对照组和2.5、5、10、 20μmol/L NaAsO₂染毒组;MTT检测细胞存活率,电镜观察各组细胞的超微结构,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-155和BDNF mRNA表达,蛋白印迹(Western blot)检测BDNF蛋白的表达。结果 电镜下发现各染毒组出现不同程度的细胞器损伤;与对照组比较,NaAsO₂各染毒组(除2.5μmol/L组外)随染毒剂量的增加,PC12细胞存活率逐渐下降(P<0.05)、miR-155的表达量逐渐增加(P<0.05)、BDNF mRNA和蛋白表达量逐渐降低(P<0.05)。结论 NaAsO₂对PC12细胞有直接毒性作用,miR-155及BDNF表达水平随染砷浓度增加而改变,其可能是致PC12细胞损伤的机制。     

贵州省地方性氟中毒地区人群GSTP1基因Ile105Val位点多态性分析

目的 探讨贵州省毕节市燃煤型氟中毒地区人群谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)活性及GSTP1基因Ile105Val位点多态性.方法 在贵州省毕节市鸭池镇燃煤型氟中毒非改灶村抽取160名村民作为非干预组,在毕节市长春镇燃煤型氟中毒改灶村抽取153名村民作为干预组,在非病区长顺县白云山镇抽取151名村民作对照组,用比色法分别测定各组GSTs活力;PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLR)法检测各组GSTP1基因Ile105Val位点多态性[野生纯合型(AA)、突变杂合型(AG)、突变纯合型(GG)].结果 GSTs活力组间比较差异有统计学习意义(F=51.71,P<0.05).其中对照组[(24.30±6.27)kU/L]高于干预组[(20.78±6.20)kU/L]、非干预组[(12.44±4.97)kU/L],组间两两比较差异有统计学意义(P均<0.05);同组性别间比较差异无统计学意义(P均>0.05).GSTP1基因Ile105Val位点多态性,干预组[AA:67.3%(103/153),AG:29.4%(45/153),GG:3.3%(5/153)]、非干预组[AA:66.9%(107/160),AG:30%(48/160),GG:3.1%(5/160)]与对照组[AA:74.8%(113/151),AG:25.2%(38/151),GG:0(0/151)]比较,差异有统计学意义(χ2=6.04、6.07,P均<0.05);干预组与非干预组比较,差异无统计学意义(χ2=0.02,P>0.05).结论 氟中毒能导致机体GSTP1基因lle105Val基因位点的多态性发生变化,人为干预对氟的摄入可改善氟对机体的影响.     

燃煤型氟中毒病区人群外周血谷胱甘肽硫转移酶mRNA表达

目的：研究燃煤型氟中毒病区人群外周血谷胱甘肽硫转移酶（GST）基因的mRNA表达,了解氟中毒地区经综合干预后的效果。方法：采集贵州省毕节市燃煤型氟中毒病区患者（氟中毒组）和经综合干预后的患者（氟中毒干预组）外周血样本各50例,以非病区健康人外周血标本50例作为对照,Trizol-酚-氯仿一步法提取总RNA,以SYBRGreenI为荧光介质,采用实时荧光定量PCR技术测定外周血细胞GSTmRNA表达水平。结果：氟中毒组、氟中毒干预组和对照组外周血细胞GSTmRNA表达分别为38·28±27·22、70·56±37·23和103·46±46·62,组间比较差异有统计学意义（F=3.75,P〈0.05）。氟中毒组与氟中毒干预组GSTmRNA表达水平对照组降低（P〈0.05）,氟中毒干预组GSTmRNA表达水平较氟中毒组升高（P〈0.05）。结论：燃煤型氟中毒能降低GST在外周血中的表达,经综合干预后可使GST表达有所回升。     

贵州三个民族亚甲基四氢叶酸还原酶基因的遗传多态性

目的研究贵州汉族、布依族、苗族亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)基因多态性，为贵州少数民族基因多态性数据库的建立提供相关数据。方法应用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性检测贵州荔波汉族、布依族、雷山苗族MTHFR基因两个单核苷酸(677及1298位)多态位点的基因频率及基因型频率。结果汉族、布依族、苗族MTHFR677位T等位基因的分布频率分别是22．8％，16．1％，10．6％，MTHFR1298位C等位基因的分布频率分别是28．9％，39．1％，48．7％，677CT／1298AC双杂合子的分布频率分别是16．66％，22．7％，11．1％。在苗族还发现1例677TT／1298CC双纯合子。结论．MTHFR C677T和A1298C多态性存在群体差异；贵州雷山苗族、荔波布依族．MTHFR 1298位有较高的C等位基因频率，贵州雷山苗族MTHFR 1298位C等位基因频率是目前文献报道最高的民族。     

贵州省地方性氟中毒地区人群GSTP1基因Ile105Val位点多态性分析

Objective To investigate plasma glutathione S-transferase(GSTs) activity and GSTP1 gene Ile105Val polymorphism in Bijie City, Guizhou Province, a coal-burning fluorosis endemic area. Methods One hundred and sixty villagers from Yachi Twon using non-improved cooking stoves were selected as the non-intervened group in Bijie City, Guizhou Province where coal-burning fluorosis was prevailing; 153 villagers as the intervented group were chosen from Changchun Twon, where cooking stoves were improved; 151 villagers were served as the control group from Baiyunshan Twon, Changshun County without endemic fluorosis. The activity of GSTs was tested by colorimetric analysis with spectrophotometer. The genotype of the GSTP1 gene Ile105Val polymorphism, presenting as either homozygous wild-type (AA), or heterozygous mutation type (AG), or homozygous mutation type (GG), was detected through the PCR-RFLP procedure. Results The activity of GSTs in plasma of non-intervened group [(12.44±4.97) kU/L]was significantly lower than that of intervened group (P < 0.05), and that of intervened group[(20.78±6.20)kU/L]was significantly lower than that of control group[(24.30±6.27)kU/L, P< 0.05]. The difference of the enzyme activity of three groups were statistically significant (F = 51.71, P < 0.05), but this enzyme activity did not vary significantly in each sex of each grnup(P > 0.05). Compared intervened group [AA:67.3%(103/153), AG:29.4%(45/153),GG:3.3%(5/153)]and non-intervened group[AA:66.9%(107/160), AG:30%(48/160), GG:3.1%(5/160)]with control group[AA:74.8%(113/151), AG:25.2%(38/151), GG:0 (0/151)], the Ile105Val polymorphism site of GSTP1 gene had significant difference(χ2= 6.04,6.07, both P< 0.05), but not significant between intervened and non-intervened groups(χ2 = 0.02, P>0.05). Conclusions Fluorosis can decrease the activity of GSTs and introduce the GSTP1 gene Ile105Val polymorphism, intervention with the fluorine intake will improve the effect of fluoride on the body.     

NBT纸片定性法与G6PD/6PGD比值法在大样本G6PD缺陷症筛查中的联合应用

目的：探讨联合应用葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）四氮唑蓝（NBT）纸片定性法与G6PD／6PGD比值定量法在大样本筛查中的可行性。方法：用NBT纸片定性法对501例贵州省江口县土家族、525例从江县侗族、586例荔波县瑶族共1612例成人进行定性初筛，再用G6PD／6PGD比值法对初筛阳性样本定量复查。结果：NBT纸片定性法共初筛出G6PD缺陷患者129例，G6PD／G6PD比值法确诊G6PD缺陷123例，2种方法的符合率高达95．35％。结论：对大样本G6PD缺陷症的筛查，先用NBT纸片定性法进行初筛，再用G6PD／6PGD比值法复查确诊，2法联合应用可以提高G6PD缺陷症检出率和节约大量经费和时间。