慢性氟中毒大鼠脑组织中c-Jun氨基末端激酶表达水平观察

目的 观察慢性氟中毒大鼠脑组织中c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号转导激酶表达变化,进一步揭示慢性氟中毒神经损伤的分子机制.方法 SD大鼠随机分为3组:对照组、低氟组、高氟组,每组24只,饮用水含氟量分别为＜0.5和5.0、50.0 mg/L,实验期为6个月.用氟离子选择电极法测定大鼠尿氟及血氟,用Western blotting和免疫组织化学方法检测脑组织中JNK信号转导激酶的表达和分布,并分析血氟与活化的JNK激酶的相关关系.结果低氟组和高氟组大鼠尿氟[(2.56±0.91)、(5.73±3.14)mg/L]和血氟[(0.36±0.14)、(0.50±0.18)mg/L]均较对照组[(0.92±0.30)、(0.12±0.07)mg/L]升高(P均＜0.05).高氟组(1.74±0.69)脑组织phospho-JNK表达高于对照组(1.00±0.37)和低氟组(1.20±0.28,P均＜0.05);total-JNK蛋白表达水平3组间比较,差异无统计学意义(F=0.046,P＞0.05).phospho-JNK、total-JNK阳性表达神经元主要集中在皮质、海马和背侧丘脑,其中高氟组大鼠phospho-JNK在顶叶皮质(119.3±14.1)、枕叶皮质(112.7±5.4)、海马CA3区(100.6±8.9)、背侧丘脑(117.8±10.4)及橄榄核(112.6±5.9)中阳性表达较对照组(104.1±8.9、106.6±9.6、106.6±9.7、108.9±6.4、100.3±8.4)和低氟组(96.7±17.1、102.5±8.3、106.4±6.5、110.2±9.3、102.4±4.7、102.5±9.8)明显增高(P均＜0.05),而total-JNK在各组大鼠脑组织中阳性表达分布未见明显改变(P均＞0.05).相关分析结果发现,随大鼠血氟升高,脑组织中phospho-JNK表达呈增高趋势,二者存在正相关关系(r=0.677).结论慢性氟中毒导致脑组织中磷酸化JNK表达改变,并与机体中氟蓄积量存在相关关系,这些改变可能与慢性氟中毒导致的神经损伤有关系.     

MP-IgM抗体检测与微生物快速培养检测对小儿肺炎支原体感染的诊断价值

目的探讨MP-IgM抗体检测与微生物快速培养检测对小儿肺炎支原体(MP)感染的诊断价值。方法选取2017年1月至2019年12月贵州中医药大学第二附属医院收治的260例MP感染患儿为研究对象,所有患儿入院后均进行MP-IgM抗体检测、微生物快速培养检测以及PCR法+测序法检测MP,并比较检测结果与诊断效能。结果260例患儿中采用PCR法+测序法检测出155例阳性,105例阴性;MP-IgM抗体检测出真阳性144例,真阴性87例;微生物快速培养检测出真阳性116例,真阴性77例。MP-IgM抗体检测的灵敏度、特异度均高于微生物快速培养检测。结论MP-IgM抗体检测小儿肺炎支原体感染的诊断价值优于微生物快速培养检测,值得临床推广应用。     

贵州三个少数民族谷胱甘肽S-转移酶M1、T1和P1基因多态性

目的研究贵州省从江县侗族、威宁县彝族、荔波县瑶族的谷胱甘肽S-转移酶基因(GSTs)多态性。方法在隔离自然人群(从江县侗族108人、威宁县彝族104人、荔波县瑶族109人)中,采用多重等位基因特异聚合酶链反应方法分析GSTM1和GSTT1基因多态性,采用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性方法分析GSTP11578(A→G)基因多态性。结果贵州省从江县侗族、威宁县彝族、荔波县瑶族的GSTM1和GSTT1纯合缺失基因型频率分别为59.6%～71.2%、39.4%～72.5%。其GSTP11578(A→G)基因型频率分别是:AA为63.3%～75%、AG为23.2%～35.8%、GG为0～1.9%。等位基因频率:A为81.2%～86.6%,G为13.4%～18.8%。结论GSTT1基因型频率在贵州从江侗族、威宁彝族、荔波瑶族中存在差异,其分布特征可能与人群中不同种族以及同一种族不同民族相关。     

贵州苗族CBS基因与MTHFR基因多态性研究

目的对贵州雷山西江苗族胱硫醚合酶（cystathionine beta-synthase,CBS）基因与亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR）基因多态性进行研究。方法采用PCR-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）、PCR-变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）-基因测序（Gene sequenceing）的方法检测贵州雷山西江苗族CBS基因与MTHFR基因的基因频率及基因型的分布。结果CBS基因的699C→T等位基因频率为5.6%、833 T→C等位基因频率为29.4%。MTHFR基因的677C→T等位基因频率为10.64%、1298 A→C等位基因频率为48.66%。结论同一民族,胱硫醚合酶基因与亚甲基四氢叶酸还原酶基因存在群体差异,这种群体差异可能与人群对多种疾病的群体易感性有关。     

过氧化氢酶基因-262C/T及-21A/T多态性与燃煤型氟中毒相关性的研究

目的 探讨过氧化氢酶(CAT)基因启动子区-262C/T、-21A/T多态性与燃煤型氟中毒之间的关系.方法 2007年,在贵州省毕节市鸭池镇燃煤型氟中毒非改灶村抽取150名村民作为非干预组,于该市长春镇燃煤型氟中毒改灶村抽取150名村民作为干预组,于非地方性氟中毒长顺县白云山镇抽取150名村民作对照组,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法,分别检测各组CAT-262C/T、-21A/T多态的基因型.结果 非干预组、干预组和对照组CAT-262C/T、CAT-21A/T多态的基因型频率分布符合Hardy-weinberg遗传平衡定律(P＞0.05).在研究人群中检测到CAT-262C/T多态的两种基因型CC和CT,未检测到TT基因型;检测到CAT-21A/T多态的三种基因型AA、AT和TT.对照组、干预组和非干预组CAT基因-262C/T多态位点的基因型(CC、CT)频率分别为89.33%(134/150)、10.67%(16/150)、88.67%(133/150)、11.33%(17/150)、9333%(140/150)、6.67%(10/150);对照组、干预组和非干预组C等位基因频率分别为94.67%(284/300)、94.33%(283/300)、96.67%(290/300);T等位基因频率分别为5.33%(16/300)、5.67%(17/300)、3.33%(10/300).对照组,干预组和非干预组CAT基因-21A/T多态位点基因型(AA、AT、TT)频率分别为48.67%(73/150)、46.00%(69/150)、5.33%(8/150)、52.67%(79/150)、38.00%(57/150)、9.33%(14/150)、51.33%(77/150)、38.00%(57/150)、10.67%(16/150);对照组、干预组和非干预组A等位基因频率分别为71.67%(215/300)、71.67%(215/300)、70.33%(2ll/300);T等位基因频率分别为28.33%(85/300)、28.33%(85/300)、29.67%(89/300).CAT-262C/T和CAT-21A/T基因型频率及等位基因频率在对照组,干预组和非干预组中的分布,组间比较差异均无统计学意义(x2=0.331、0.336,P均＞0.05).结论 CAT基因-262C/T、-21A/T多态性与燃煤型氟中毒无明显的相关性.

Abstract：

Objective To explore the relationship between -262C/T and -21A/T polymorphisms of catalase(CAT) gene and coal-burning borne fluorosis. Methods In 2007, 150 villagers were taken as a nonintervention group in Bijie city from the village of coal-burning borne fluorosis areas with unchanged cooking stoves;150 villagers were taken as the intervention group from the town of Changchun county where cooking stoves changed; 150 villagers were taken as control from non-endemic fluorosis areas in Baiyun town of Changshun county.PCR-restriction fragment length polymorphism were employed to detect genotypes of CAT-262C/T and CAT-21A/T polymorphism of CAT gene. Results The genotypic frequencies of CAT-262C/T and CAT-21A/T in nonintervention group,intervention group and control group were in line with Hardy-Weinberg equilibrium law (P＞ 0.05 ).The genotypes of CC and CT were detected while no TT were detected for CAT-262C/T polymorphism; the genotypes of AA, AT and TT were detected for CAT-21A/T. The genotype frequencies of CAT-262 CC, CT in control group, intervention group and non-intervention group were (89.33%(134/150), 10.67%(16/150); 88.67%(133/150), 11.33% (17/150),93.33% (140/150),6.67% (10/150), respectively. The gene frequency of C in control group, intervention group and non-intervention group were (94.67% (284/300), 94.33% (283/300),96.67%(290/300), respectively. The gene frequency of T in control group, intervention group and non-intervention group were 5.33%(16/300), 5.67%(17/300), 3.33%(10/300), respectively. The genotype frequencies of CAT-21 AA,AT and TT in control group, intervention group and non-intervention group were 48.67%(73/150),46.00%(69/150),5.33%(8/150) ,52.67%(79/150) ,38.00%(57/150) ,9.33% (14/150) ,51.33%(77/150) ,38.00%(57/150), 10.67%(16/150), respectively. The gene frequency of A in control group, intervention group and non-intervention group were 71.67%(215/300),71.67%(215/300),70.33%(211/300), respectively. The gene frequency of T in control group, intervention group and non-intervention group were 28.33% (85/300),28.33% (85/300),29.67% (89/300),respectively. CAT-262C/T and CAT-21A/T genotype and allele frequencies in the control group, the intervention group and non-intervention group showed no significant differences in the distribution(x2= 0.331,0.336, all P ＞0.05 ). Conclusion CAT-262C/T and CAT-21A/T polymorphism is not associated with coal-burning borne fluorosis.