贵州省荔波县瑶族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷症基因突变研究

目的了解贵州省荔波县瑶族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺陷症的发生率、基因突变类型及特点。方法对贵州省荔波县瑶族586人采用四氮唑蓝定性法进行G6PD缺陷症初筛、G6PD／6PGD比值法验证,再经自然引物及错配引物介导的聚合酶链反应／限制性酶切分析法检测中国人常见的9种基因突变型。结果筛出G6PD缺陷阳性样本45例,基因频率为7．68％,其中检出G1388A突变15例、G1376T突变7例。结论贵州省荔波县瑶族是G6PD缺陷症的高发区,该地该民族常见突变型是中国人常见的G1376T、G1388A突变型。本调查为了解贵州省少数民族G6PD缺陷症的分布特征提供了原始数据。     

2型糖尿病与簇蛋白基因关联的初步研究

目的探讨2型糖尿病（T2DM）与簇蛋白（Glu）基因多态性的关联。方法聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）和DNA测序技术分析62例T2DM患者及60例正常对照者的Glu基因外显子2和外显子5基因多态性。结果Glu基因外显子2发现1个多态位点：1963（＋A）;外显子5发现3个多态位点：（1）7476（-A）,（2）7534（-C）,（3）7521C→T。结论Glu基因外显子2和外显子5多态性在2型糖尿病组和正常对照组多态性位点基因频率分布差异有统计学意义。因此,Clu基因外显子2和外显子5多态性可能与T2DM易感性有关联。     

燃煤型氟中毒病区人群外周血谷胱甘肽硫转移酶mRNA表达

目的 研究燃煤型氟中毒病区人群外周血谷胱甘肽硫转移酶(GST)基因的mRNA表达,了解氟中毒地区经综合干预后的效果.方法 采集贵州省毕节市燃煤型氟中毒病区患者(氟中毒组)和经综合干预后的患者(氟中毒干预组)外周血样本各50例,以非病区健康人外周血标本50例作为对照,Trizol-酚-氯仿一步法提取总RNA,以SYBR Green I为荧光介质.采用实时荧光定量PCR技术测定外周血细胞GST mRNA表达水平.结果 氟中毒组、氟中毒干预组和对照组外周血细 胞GST mRNA表达分别为38.28±27.22、70.56±37.23和103.46±46.62,组间比较差异有统计学意义(F=3.75,P<0.05).氟中毒组与氟中毒干预组GsT mRNA表达水平较对照组降低(P均<0.05),氟中毒干预组GST mRNA表达水平较氟中毒组升高(P<0.05).结论 燃煤型氟中毒能降低GST在外周血中的表达,经综合干预后可使GST表达有所回升.     

α7神经型尼古丁受体激动剂PNU282987对APP/PS1小鼠海马组织中AP180蛋白表达的影响

目的探讨特异性激动APP/PS1转基因小鼠中的α7nAChR后其海马组织中突触后膜蛋白的表达变化。方法选择16只经过鉴定的APP/PS1小鼠随机分为APP/PS1组(APP/PS1)和APP/PS1+PNU282987组(AP),每组各8只;另选16只野生型小鼠随机分为对照组(Control)和野生+PNU282987组(WP),每组各8只。饲养小鼠达到24周龄后,AP组和WP组于每天进行Morris水迷宫行为学测试前4 h腹腔注射PNU282987(1 mg/kg/d),之后利用Morris水迷宫进行行为学测试,Real-time PCR及Western blotting法分别检测各组小鼠海马组织中AP180 mRNA及蛋白水平的表达情况。结果与对照组比较,APP/PS1组海马组织中AP180 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P0.01,P0.01);而特异性激动α7 nAChR水平后,WP组中AP180 mRNA和蛋白水平升高(P0.01,P0.05);与APP/PS1组相比AP组小鼠大脑海马组织中AP180 mRNA和蛋白水平明显升高(P0.01,P0.01)。结论特异性激动APP/PS1转基因小鼠海马组织中α7 nAChR能够使网格蛋白介导的突触囊泡内吞过程中的关键蛋白AP180表达水平升高。这可能提示了α7nAChR对突触有一定的保护作用,进一步说明α7nAChR在阿尔茨海默病的发病中起着重要作用。     

冈田酸和β-淀粉样蛋白对大鼠CaMKⅡ与Tau蛋白磷酸化的影响

目的探讨冈田酸和β-淀粉样蛋白对大鼠CaMKⅡ与Tau蛋白磷酸化的影响。方法用立体定向方法将β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)(1mg/ml、5μl/只)注入SD大鼠海马CA1区,1w后注射冈田酸(OA)0.4nmol/L、2μl/只,隔天注射共注射7次,以建立类AD动物模型。采用水迷宫、Western blotting和Real-time等方法对类AD模型进行行为学和分子生物学分析,检测类AD大鼠海马组织CaMKⅡ、磷酸化Tau蛋白的表达水平以及大鼠学习记忆力的变化。结果与对照组相比Aβ1-42海马注射组、OA注射组及共同注射Aβ1-42和OA组均能引起大鼠学习记忆力降低,CaMKⅡmRNA及蛋白表达增加(P0.01),Tau蛋白Ser404磷酸化增加(P0.05)。Aβ1-42与OA具有协同增加CaMKⅡmRNA及蛋白表达及Tau蛋白Ser404磷酸化的作用。结论 Aβ1-42和OA可降低大鼠学习记忆能力,增加CaMKⅡ表达和Tau蛋白Ser404磷酸化。     

外源性H2S对血管性痴呆大鼠缺血再灌注后神经元线粒体损伤及其相关信号通路的影响

目的 以二血管(2-VO)法制作血管性痴呆(VaD)大鼠模型，探讨神经元自噬及相关信号通路的变化及外源性硫化氢(H₂S)的神经保护作用。方法 改良2-VO结扎SD大鼠双侧颈总动脉制作VaD模型，按缺血进程急性缺血期、缺血损伤期、损伤恢复期共设置1、7、30 d 3个时间段，每个时间段各有假手术(Sham)组、模型(VaD)组、阳性对照[尼莫地平(Nimodipine)组、硫氢化钠(NaSH)低剂量(Low-NaSH)组、NaSH高剂量(High-NaSH)组。为保持药物处理时间一致，1 d及7 d,各组术前灌胃给药30 d, 30 d各组术后灌胃给药30 d, VaD组和Sham组生理盐水灌胃，Nimodipine组Nimodipine灌胃给药，Low-NaSH组、High-NaSH组NaSH灌胃给药。利用水迷宫检测30 d各组学习记忆能力。Western印迹检测海马神经元线粒体蛋白中Beclin1、P62、蛋白激酶B(Akt)、P-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、P-mTOR表达。结果 术后1 d,与Sham组比较，VaD组Beclin1、P-Akt...