三峡库区富营养化评价方法探讨

三峡水库由河流变为水库后,由于水力及水文条件的改变,增加了水体产生富营养化的可能。水体富营养化是世界范围的现象,国内外对富营养化水体评价方法进行了数10年的研究,取得了部分成果。根据国内外富营养化研究成果,以三峡水库为研究对象,对营养物质负载模型、预测模型和生态学模型进行了比较。营养物质负载模型适用于对氮、磷营养元素负荷的统计计算;预测模型适用于对三峡库区水环境富营养化状况的简便评价;生态学模型综合了湖泊水库富营养化产生的条件及结果,对于富营养化的长期研究和评价具有重要意义。     

基于Moldflow软件的汽车OBD外盖数值模拟研究

以某车型OBD外盖为研究对象,借助Autodesk Moldflow Insight模拟分析软件,研究注射时间、熔体温度、模具温度、保压时间和保压压力对薄壁OBD外盖产品翘曲变形的影响,寻找影响OBD外盖翘曲变形量最小的最优工艺参数组合,为实际的注塑实验提供理论基础。     

汽车电器设备理实一体化教学改革与探索

为适应现代社会人才培养需求、培养出适合社会发展的现代技术人才,根据职业教育特点提出了以改善教学内容、改建实践平台、改变考核方法为核心的理实一体教学模式。汽车电气设备是汽车检测与维修专业的重要专业课程,其理论性和实践性强。通过课程改革,证实理实一体化教学符合职业教育的规律和特点,是一种成功的教学方法。     

海口美孝村古村落防御系统解读

通过对美孝村走访探查,从村落布局、院落格局、历史背景、宗教文化等方面进行研究,推演并还原出美孝村原初村落的可能形态,在此基础上研究其防御系统,发现美孝村古村落在空间上形成了"植物—围墙—村口—石门—道路—院落—建筑"的多方面多层次防御系统。解析美孝村防御系统特点,并探究其形成原因。     

紫花苜蓿不同刈割期产量比较

为了确定紫花苜蓿(Medicago satiua)最佳刈割利用时期,在有限的耕地中获得较高的产量和效益,采用小区试验的方法研究了3种不同刈割高度对苜蓿IS - 1085、Maximus、IS - 1075、07 01399 ALFALFA、CA - 0504 ALFALFA、WL903HQ等6个品种草产量的影响.结果表明:刈割高度对苜蓿鲜草产量和风干草产量有较大的影响.6个品种孕蕾期刈割的鲜草产量和风干草产量平均为7.41kg/m2和1.73 kg/m2,比30 cm高刈割平均产量5.75 kg/m2、1.28 kg/m2增产28.87％和35.17％;比45 cm高刈割平均产量5.93 kg/m2、1.35 kg/m2增产24.96％和28.15％,差异均极显著(P＜0.01),30 cm与45 cm高刈割的产量和6个品种同一刈割高度产量间差异不显著.     

杏CCD1和CCD4启动子克隆及顺式作用元件分析

以‘轮台小白杏’杏果实为材料,根据转录组数据库中的CCD1和CCD4基因片段,通过基因组步移法克隆了两个启动子pPaCCD1和pPaCCD4,获得了长度分别为2 233和1 838 bp的启动子序列。利用PlantCare数据库对启动子序列的顺式作用元件进行预测分析,结果表明两个启动子均含有多个光响应、脱落酸和茉莉酸甲酯等共有顺式作用元件,此外,PaCCD1启动子中含有刺激诱导和种子特异性调控等响应元件,PaCCD4启动子中含有赤霉素、低温和增强转录水平等响应元件,这暗示PaCCD1和PaCCD4的表达可能受光信号、激素和胁迫等多种信号的共同调节。为进一步确定其启动子核心区,基于基因结构特征与顺式作用元件的分布情况,分别构建两个不同长度缺失启动子与GUS基因融合的表达载体并瞬时转化烟草叶片。GUS活性检测发现,在PaCCD1的启动子上游–2 174 ~–1 700 bp、–1 700 ~–1 200 bp、–1 200 ~–600 bp区间内均包含影响启动子活性的顺式作用元件;PaCCD4启动子在上游–1 740 ~–1 200 bp和–1 200 ~–600 bp这两个区间内含有顺式作用元件,随着启动子片段的缺失,PaCCD1和PaCCD4的GUS活性逐渐减弱。PaCCD1的启动子核心区域在–1 200 ~ 2 174 bp区段内,PaCCD4的启动子核心区域在–1 200 ~ 1 740 bp区段内。     

猪圆环病毒2a型和2b型Cap蛋白的原核表达及鉴定

为制备猪圆环病毒2a型（PCV2a）和2b型（PCV2b）Cap蛋白,用生物信息学软件优化PCV2a Cap基因和PCV2b Cap基因密码子、克隆至p ET28a载体中、转化BL21(DE3)、构建重组蛋白表达菌株,通过优化原核表达的温度、IPTG浓度等条件进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果显示：重组PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白的分子量约为30 k Da,在不同温度下都以包涵体形式存在,在37℃下以终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达的Cap蛋白表达量最高。试验成功制备了PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白,为制备PCV2二价疫苗及其诊断方法的研究提供了基础材料。     

1株猪腺病毒3型的分离培养及其fiber蛋白多克隆抗体的制备

本研究旨在对临床1份腹泻病料进行病原的分离培养并探究该病原编码的主要抗原蛋白的生物学特点。采用巢式PCR检测病料猪腺病毒3型（Porcine adenovirus type 3,PADV3）核酸并进行病毒分离培养,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法（IPMA）进行病毒血清学鉴定,PCR扩增fiber基因,将其ORF区克隆至pET-28a（+）载体并转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导重组fiber蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组蛋白,将纯化的重组蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体并测定抗体免疫活性。结果表明,病料为PADV3核酸阳性,感染ST细胞产生典型的"葡萄串"细胞病变效应（CPE）,P5~P11代次中的PADV3核酸稳定,分离的毒株P5代为PADV3型血清学阳性,fiber基因开放阅读框（ORF）为1 296 bp（GenBank登录号：MT774498）,与PADV3毒株的核苷酸相似性最高（86.1%）,与其他毒株相似性均低于40%;原核表达的重组fiber蛋白分子质量为45.2 ku,fiber蛋白多克隆抗体与PADV3感染的细胞呈特异性的细胞核染色。本试验成功分离得到1株PADV3毒株,命名为PADV3-HY1812,所制备的fiber蛋白多克隆抗体具有良好的免疫活性。