端粒酶基因的腺病毒包装条件优化及其 活性功能验证

[目的]构建携带人类端粒酶催化亚基基因(hTERT)的腺病毒载体并优化其包装条件,为进一步探究端粒酶与细胞重编程调控间的作用机理提供参考依据.[方法]利用腺病毒载体pAdEasy-1构建携带hTERT基因的重组腺病毒载体,分别采用脂质体法和电转法及不同浓度胎牛血清在HKE293A细胞中进行包装,筛选出最佳病毒包装条件,收集重组腺病毒rAd-hTERT并体外感染小鼠胎儿成纤维细胞,验证重组腺病毒rAd-hTERT的活性功能.[结果]以腺病毒载体pAdEasy-1为骨架质粒,成功构建获得携带hTERT基因的重组腺病毒载体(pAd-hTERT),其最佳病毒包装条件是采用脂质体法结合15%胎牛血清,此条件下收集获得的病毒滴度最高(1×1011 IFU/mL).以携带hTERT基因的腺病毒rAd-hTERT感染小鼠胎儿成纤维细胞72 h后,可扩增出片段大小约3450 bp的目的基因条带,即hTERT基因在小鼠胎儿成纤维细胞中成功表达.[结论]采用脂质体法结合15%胎牛血清包装获得的携带hTERT基因重组腺病毒具有较高病毒滴度,感染小鼠胎儿成纤维细胞能成功表达hTERT基因,进一步证实端粒酶具有蛋白功能的生物学活性.     

2006～2012年猪繁殖与呼吸综合征病毒东北毒株GP5和M基因变异分析

分离鉴定三株中国东北地区PRRSV,对其主要结构蛋白GP5和M基因RT-PCR扩增和测序,同时对2006～2012年东北地区PRRSV毒株进行遗传变异分析.结果表明,三株东北地区PRRSV分离株均属于美洲型高致病性毒株,JilinTN2株和HH12株可能由JXA1变异而来,GP5基因变异较大,而M基因相对保守;一些氨基酸变异会改变GP5和M蛋白的二级结构;GP5蛋白中和表位Q40和L41的突变和诱骗表位L28的新突变在2011和2012年黑龙江省PRRSV毒株中被发现,33～37 aa处氨基酸的变异对潜在糖基化位点的数量和位置影响较大,可能会干扰中和抗体对紧随其后的中和表位识别,减少病毒中和抗体应答;GP5中PRRSV毒力关键住点的新突变在2012年分离株中被发现.文章揭示东北地区PRRSV流行毒株GP5基因的变异特征,PRRSV仍在不断发生变异,需针对GP5基因变异采取相应防控措施.     

春季养羊科学防治四措施

1常见疾病 1．1羊传染病绵（山）羊痘、羊梭菌类疾病、羊布氏杆菌病、羊传染性胸膜肺炎、羊附红细胞体病。1．2寄生虫病羊吸虫病、羊肠道绦虫病、羊消化道线虫病、羊螨病。1．3营养代谢病骨软症、佝偻病、缺铁性贫血、硒元素维生素E缺乏症（白肌病）。     

我国木瓜相关发明专利现状分析

采用文献计量学的方法对1987～2008年我国木瓜相关发明专利进行了发明专利的数量、时间及内容统计、分析,揭示了我国木瓜知识产权的状况。     

端粒酶与体细胞重编程的最新研究进展

端粒酶与体细胞重编程是当今生物界最热门的研究领域之一。研究端粒酶能揭示生物体胚胎早期发育、衰老和癌症发生的机制;细胞重编程则有望从根本上解决体细胞克隆技术问题,从而开启生命再造新时代。文章通过对端粒酶与体细胞重编程及二者互作机制的最新研究进展进行详细阐述,发现细胞重编程面临的主要问题是效率低下,其根本原因是对其作用机制尚未完全了解;而最新研究证实,生殖细胞的端粒酶活性发生时序性变化可能在胚胎发育及细胞重编程过程中发挥重要调控作用。因此,揭示细胞重编程机制是今后研究工作的重心,尤其是揭示端粒酶在胚胎发育过程的分子调控机理及端粒酶调控细胞重编程可能开启的信号通路,对提高细胞重编程效率,推进克隆动物的生产实践并开启生命再造,以及为治疗癌症等人类重大疾病具有重要意义。     

食品安全检测中高效液相色谱技术的应用探析

自从改革开放以来,我国人民的生活水平显著提高,人们对食品安全及营养越来越重视。食品安全和食品营养是非常重要的,应该利用先进的检测技术全面检测食品的质量和安全。高效液相色谱法是一种非常有效且快速的检测技术,在食品领域被广泛应用,提高了食品检测的效率,在实际的食品安全和营养指标检测过程中发挥了重要的作用。文章阐述了食品安全营养问题和高效液相色谱的基本内容,并分析了高效液相色谱技术在食品安全及营养指标检测中的具体应用。     

33％安达星水分散粒剂与其他除草剂综合使用防除移栽水稻田杂草田间药效试验

33%安达星水分散粒剂与其他除草剂综合使用防除移栽水稻田杂草,当封闭性除草剂与安达星先后施用时,对杂草的株数防效在施药后15 d,30 d和45 d均高于85.7%,鲜重防效高于83.2%;当安达星与香附净或灵斯科混合使用时,药后15 d和30 d对杂草的株数防效不及前者,但好于安达星和灵斯科单用。药后45 d时,安达星与香附净或灵斯科混合用药对杂草的防效与安达星和封闭性除草剂2次用药防效相当,好于安达星、灵斯科单用,与稻杰单用防效相当。     

猪圆环病毒与大肠杆菌混合感染的诊治

<正>猪圆环病毒病是由圆环病毒2型(Porcine circovirus-2 PCV-2)引起的猪的一种传染病。PCV-2属于圆环病毒科圆环病毒属的成员,是迄今为止发现的一种最小的、无囊膜的、单股环状DNA病毒。圆环病毒病是危害当今世界养猪生产的重要免疫抑制疾病,主要引起仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)、皮炎肾病综合征(PDNS)、仔猪先天性震颤(CT)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、母猪繁殖障碍等症状。     

生猪寄生虫病防治及其效果

本院门诊中,曾遇有三个规模化养猪场内生猪突发了群体性病例,病情颇急。在接受求助后经过深入现场调查,症状观察,类症鉴别,分别诊断为仔猪蛔虫病、仔猪球虫病、猪疥螨病。在采取紧急措施后,猪群得以康复。