华南地区质粒介导超广谱β-内酰胺酶的基因分型研究

目的：了解华南地区质粒介导超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）的发生率及基因型特征。方法：收集2001年4月－9月革兰阴性菌临床分离无重复株共1184株，采用NCCLS表型筛选和确认试验进行了ESBLs产酶的识别，E-test法检测各亚型ESBLs的MICs值，质粒接合及电转化实验，耐药质粒提取及酶切指纹分析，等电聚焦电泳，PCR通用引物扩增TEM、SHV、CTX－M、VEB、PER、SFO基因及其克隆测序进行ESBLs基因分型和质粒定位。结果：革兰阴性苗ESBLs的检出率为14．6％（173／1184）；获得产ESBLs接合子67株，电转化子11株，其中产CTX－M－14型ESBLs为33．3％（26／78）、CTX－M－3为23．1％（18／78）、CTX－M－9为14．1％（11／78）及SHV-2a为2．6％（2／78），未定型为5．1％（4／78）；29．5％（23／78）野生株伴广谱酶TEM－1或SHV－1型；各型ESBLs基因约定位在35－190kb大小的可接合性低执行者拷贝数天然质粒上；CTX－M型ESBLs以对头孢噻肟高水平高耐为特征。结论：华南地区质粒介导的ESBLs以CTX－M型衍生酶为主，其次是SHV型酶。     

肺动脉高压的发病机制、治疗进展

肺动脉高压是多种因素导致的内皮功能受损所致,病理机制的研究进展为治疗开辟了新思路,提出了如钾离子通道开放剂、内皮素受体拮抗剂、蛋白激酶C抑制剂、PDE-5抑制剂和血栓素抑制等治疗方法.     

Parkin基因启动子区-258T/G多态性与广西地区散发性帕金森病的相关性分析

Objective To investigate the association between the-258T/G polymorphism.in the pro-moter of parkin gene and the risk for sporadic parkinson's disease (SPD) in Guangxi Province, and in relationto the age of onset, of PD patients. Methods PCR-RFLP and sequence analysis were used to determine thegenotype of-258T/G polymorphism between all patients and healthy controls. Results The G allele was morecommon in patients than controls (55.20%:43.33% ,x2=6.898, P<0.05, OR=1.61, 95% CI: 1.13 ～2.30). The frequency of GG genotype was higher in patients than in controls (28.00 %: 18.33%, x2=7.159, P<0.05, OR=2.75, 95% CI : 1.31 ～ 5.77). The frequency of TG + GG genotype was higher in pa-tients than in controls (82.40%:68.33%, x2=6.551, P<0.05, OR=2.17.95%CI: 1.20 ～3.93). Afterbeing stratified by onset age, the frequencies of the G allele and GG genotype were significantly higher in pa-tients with onset age over 50 years than those in controls respectively. On the other hand, the frequency was notsignificantly different between the younger onset PD patients and the controls. Conclusion The parkin promot-er-258T/G polymorphism might be a risk factor for PD in Guangxi Province, and the G allele was increasedwith increasing age.     

腺病毒编码人TRP2修饰DC诱发抗小鼠黑色素瘤免疫的研究

目的比较腺病毒载体(Ad)介导人和小鼠酪氨酸酶相关蛋白2(tyrosinase-relatedpro-tein2,TRP2)修饰小鼠骨髓来源的树突状细胞(BM-DC)诱发抗小鼠黑色素瘤免疫的差异。方法Ad编码人或小鼠TRP2(AdhTRP2或AdmTRP2)体外感染小鼠BM-DC并体内皮下免疫C57BL/6小鼠,7d后取出被免疫小鼠脾细胞行体内细胞毒性T淋巴细胞杀伤试验(invivoCTL)和细胞内IFN-γ染色(ICS)分析CTL的杀伤活性和IFN-γ的产生;或给免疫后小鼠皮下接种小鼠B16.F10黑色素瘤细胞,观察荷瘤小鼠的成活情况。结果invivoCTL和ICS分析显示,AdhTRP2/BM-DC免疫小鼠,其6hCTL杀伤率为(98.7±1.2)%,IFN-γ产生的CD8+T细胞占总CD8+T细胞的(1.25±0.21)%;而AdmTRP2/BM-DC免疫的小鼠,其6hCTL杀伤率和产生IFN-γ的CD8+T细胞比例分别为(28.6±6.3)%和(0.24±0.06)%。荷瘤试验表明,AdhTRP2/BM-DC免疫小鼠后1周皮下接种106B16.F10细胞,观察3个月100%的小鼠无瘤生长;而接种5×104B16.F10细胞至AdmTRP2/BM-DC免疫1周的小鼠,3个月后小鼠成活率仅为40%。结论Ad介导异种(人)TRP2较自身(小鼠)TRP2修饰的BM-DC更为有效地打破肿瘤免疫耐受、诱导强烈的抗黑色素瘤免疫反应,是一种高效的以DC为基础的肿瘤疫苗。     

流式细胞术检测细胞毒方法的建立

目的：建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法。方法：用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞，再用碘化丙碇(PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞。效靶比为100：1—6．25：1，共孵育时间为1-6小时，流式细胞仪收集1000个靶细胞并测定被杀细胞的百分率。结果：CFSE是合适的标记靶细胞的荧光染料，18小时后也能很好地区分效靶细胞；靶细胞的自然死亡率低于5％；杀伤百分率随着效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为50：1—25：1，共孵育时间为2—4小时。结论：CFSE／PI双荧光染料标记的流式细胞分析检测细胞毒具有多个优点：避免放射性试剂的应用，敏感性增强，单细胞水平的分析。     

固脱汤对失血性休克大鼠糖皮质激素受体的影响

目的和方法：以［３Ｈ］地塞米松为配体，用放射配体结合法测定了正常对照组、失血休克组和固脱汤加失血休克组大鼠肝胞液及胸腺细胞糖皮质激素受体（ＧＲ），用竞争性蛋白结合分析法测定了血浆中皮质酮（ＣＣ）的浓度。结果：固脱汤加失血估克组失血１２ｈ后肝胞液及胸腺细胞ＧＲ高于失血组（Ｐ＜００１）。和正常对照组的差别不显著。失血休克组及固脱汤加失血休克组血浆ＣＣ的浓度的差别不显著，但均高于正常对照组（Ｐ＜００１）。结论：固脱汤可在一定程度上防止失血休克时ＧＲ的减少而不影响血浆ＣＣ的水平，为固脱汤抗休克从受体水平提供了依据     

动态脑电图在昏迷病人中的应用

目的：探讨动态脑电图监测对昏迷病人的应用价值。方法：对107例昏迷患者采用多次动态脑电图监测，分析脑电图改变与临床结局的关系。结果：平坦波型昏迷死亡率较高(94．7％)，慢波型昏迷死亡率较低(30．3％)，且预后较好。结论：对昏迷病人实施动态脑电图监测，可提高对预后评估及脑死亡的正确判断率。     

眼外肌薄层断面与MRI对照研究

目的 提供首例中国女性可视化人体有关眼外肌的形态学信息，为眼外肌病的影像学识别与诊断提供薄层解剖学依据。方法 应用首例中国女性数字化可视人体数据集，提取眶区的横断面图像，与相应的MRI轴位图像对照观察。结果在人体横断面标本与相应的MRI轴位图像上，清楚显示眼外肌的形态及毗邻关系。结论采用可视人技术能为临床提供眶内精细结构断面数据，断面图像与MRI图像之间有良好的对应关系。     

胰腺癌P53蛋白表达与AgNORs量及组织学分级的关系

目的：研究胰腺癌P53蛋白表达与癌细胞核仁组成区嗜银蛋白（AgNORs）量及组织学分级的关系。方法：用免疫组织化学法检测56例胰腺癌组织及25例正常胰腺组织中突变型P53蛋白的表达； AgNORs染色技术检测胰腺癌细胞的AgNORs含量；观察肿瘤的组织学分级。结果： 56例胰腺癌中P53蛋白表达阳性28例（50％），正常胰腺细胞均为阴性，P53蛋白在胰腺癌组织和正常胰腺组织中的表达有显著差异(P<0.01)。28例P53蛋白阳性的胰腺癌组织，AgNORs计数为9.14±2.08；28例P53蛋白阴性的胰腺癌中，AgNORs计数为5.99±1.84，二者有显著差异（P<0.01）。P53蛋白表达与肿瘤组织学分级呈显著负相关。不同的组织学分级之间，AgNORs计数有显著差异（P<0.01）。结论：胰腺癌发生发展的过程包含了〖STBX〗p53〖STBZ〗基因的突变。P53蛋白表达和AgNORs含量可反映胰腺癌的恶性程度，是一个有效的判断胰腺癌预后的指标。     

腰大肌作用力与脊柱伸展应力关系的生物力学实验研究

目的:探讨腰大肌作用力带动脊柱伸展应力的生物力学关系。方法:取家兔12只,分3组,每组4只,解剖后保留枢椎以下完整之脊柱及骨盆、髋关节、上段股骨,不损伤脊柱前、后纵韧带、椎间盘及所附着之腰大肌,保留脊柱背侧的竖脊肌、棘上韧带,置于生物力学拉伸测试仪(日本岛津制作所产AGS-J系列)。上端十字头分别夹枢椎(颈胸腰段)、第1胸椎(胸腰段)和第12胸椎(腰段),下端十字头夹股骨上部;分别作有腰大肌状态下和切断腰大肌状态下,股髋自屈曲位到过伸带动脊柱自屈曲位到过伸位拉伸试验,测定两种不同状态下脊柱各节段的伸展应力(N/mm2)。结果:有腰大肌状态和切断腰大肌状态下,股-髋-脊柱拉伸后脊柱伸展应力分别为:颈胸腰全段平均为306.6675N/mm2:78.7167N/mm2;胸腰段为680.8417N/mm2:373.0375N/mm2;腰段为1990.7944N/mm2:523.0608N/mm2;经统计学分析,具显著性差异,P<0.01。结论:腰大肌作用力对脊柱伸展应力影响显著,颈胸腰段占74.33%、胸腰段占45.21%,腰段占73.73%的伸展应力源自腰大肌。脊柱在腰大肌作用下产生腰椎向腹部的弯曲。