微柱高效液相色谱分析基因工程药物rhG-CSF肽谱的应用研究

用二硫代苏糖醇还原基因工程药物产品中的二硫键，并用碘乙酰胺封闭巯基，再用胰蛋白酶裂解，经微柱高效液相色谱分离分析rhG－CSF产品的肽谱，3个批号批间结果完全一致。该方法具有系统操作误差小，用样品量少，较常现高效液相色谱检测灵敏度高，重视性好的优点。是适用于基因工程药物产品肽谱分析，衡量产品生产纯化工艺稳定性比较优秀的方法之一。     

双诱导模式原核表达系统的建立与应用

将hG－CSFCDNA片段克隆于T7噬菌体RNA聚合酶启动子系统的表达载体pJGW1中，并与可热诱导T7RNA聚合酶产生的质粒pGP1－2共同转化大肠杆菌DHSα。经化学诱导或温度诱导，hG－CSF重组蛋白表达率＞30％，并具有特异的生物活性。所构建的重组表达工程菌具有良好的稳定性。     

阿尔茨海默病患者淡漠综合征的综合评定

目的:综合评定阿尔茨海默病(AD)患者淡漠综合征。方法:采用简易精神状态检查量表(MMSE)、神经精神调查表淡漠分量表(NPI-apathy)、淡漠评价评定量表临床版(AES-C)、里尔淡漠评定量表院护版(LARS-I)、老年抑郁量表(GDS)、陪护负担量表(CBS)等对轻中重度AD 83例评定。结果:AD患者淡漠综合征发生率61.4%,NPI-apathy与淡漠综合征诊断标准相关系数为0.617。淡漠程度与认知功能呈负相关,与抑郁障碍无显著相关性,与陪护负担相关性高于抑郁及认知功能。AES-C和LARS-I标准效度较好。进一步分析淡漠综合征各维度表现,目的性认知活动减少或缺失发生率最高。结论:淡漠综合征在AD患者中较常见,影响认知功能和陪护负担。NPI-apathy、AES-C和LARS-I量表具有较好的标准效度。     

高免卵黄透析液转移迟发型超敏反应的实验研究

目的 :为了寻找一种新的制备特异性转移因子的方法。方法 :免疫前收集鸡蛋并制备对照卵黄透析液。然后用二硝基氯苯免疫鸡 ,当观察到迟发型超敏反应发生后 ,收集鸡蛋制备二硝基氯苯高免卵黄透析液 ,并将其注入昆明小鼠腹腔内 ,6d后用二硝基氯苯攻击小鼠并观察其迟发型超敏反应发生的情况。结果 :二硝基氯苯高免卵黄透析液组、对照卵黄透析液组和生理盐水组的皮肤反应 (OD值 )分别为 0 0 5 2± 0 0 2 2、0 0 2 8± 0 0 14和 0 0 32± 0 0 12 (P <0 0 5 )。结论 :高免卵黄透析液含有某些介导细胞免疫的小分子物质 (如转移因子等 )。     

PCR扩增CD23全基因

参照国外发表的ＣＤ２３全基因序列，自行设计并合成一对ＤＮＡ引物（２５个碱基和１８个碱基），ＵＣＤ２３阳性细胞株ＨＦＢｄ２／ＳＤＮＡ为模板，应用ＰＣＲ技术，在国内首次成功地扩增了ＣＤ２３全基因（９８６ｂｐ），为今后克隆和表达ＣＤ２３基因以及进一步在基因水平上探讨ＣＤ２３的生物学功能研究中提供了物质基础。     

抗人视网膜母细胞瘤单克隆抗体轻链可变区基因克隆、测序

肿瘤免疫导向治疗中与抗癌药物、放射性核素偶连的载体单克隆抗体 (monoclonal antibody ,Mc Ab)的异源性问题是束缚肿瘤免疫导向治疗临床应用的主要障碍 ,异源 Mc Ab的人源化改造是肿瘤免疫导向治疗研究的重点和难点[1 ] 。目前 ,抗视网膜母细胞瘤 (retinoblastoma,RB) Mc Ab基因人源化研究尚未见报道 ,现将我们这方面的部分研究结果报道如下。1　材料和方法分泌小鼠抗人 RB Mc Ab的杂交瘤细胞株 3C6由本病理室制备 ,Mc Ab亚型为 Ig G2 a。实验中所需要的酶类及测序载体p GEM - T Easy等为美国 Promega公司产品。 TRIZOL试剂购…     

综合性医院阿尔茨海默病就诊情况调查

目前,我国老年人口正以大于人口增长的速度(3.02%)增长,每年新增老年人口约258万,老年总人口已达1.03亿.阿尔茨海默病(AD)发病率与增龄老化密切相关,估计AD患者已有240万人.然而,有资料[1]显示AD的就诊情况并不尽如人意,本文调查综合性医院老年记忆障碍专病门诊首诊为AD患者的就诊情况.     

糖化终末产物与阿尔茨海默病

糖化终末产物是蛋白质非酶促糖化的最终产物，具有不可逆性，与糖尿病慢性并发症、正常老化有关。糖化终末产物脑内沉积通过受体和非受体途径参与老年性痴呆的发病过程，与异常的脑内蛋白交联存积、氧化应激、神经元丧失有关。抗糖化终末产物治疗可能成为治疗阿尔茨海默病的新途径。     

血管性痴呆患者血清及脑脊液神经元特异性烯醇化酶和血管生成素Ⅱ表达及其检测价值

目的检测血管性痴呆(VD)患者血清及脑脊液神经元特异性烯醇化酶(NSE)和血管生成素(Ang)Ⅱ表达,探讨其临床价值。方法抽取98例VD患者静脉血及脑脊液。同时选取正常成年人血清标本50例为对照组,应用放射免疫分析法检测血清中AngⅡ表达,应用酶联免疫吸附实验检测血清和脑脊液中NSE含量。结果与对照组比较,观察组患者血清NSE表达量显著降低(P<0.01),血清AngⅡ表达量显著增高(P<0.05)。观察组患者血清NSE和AngⅡ表达量与病情程度密切相关,血清NSE和AngⅡ表达量与脑脊液NSE和AngⅡ表达量呈负相关。结论 VD患者血清及脑脊液NSE和AngⅡ异常表达,二者共同促进疾病进展,早期检测NSE和AngⅡ表达可能对判断患者病情及指导治疗有一定意义。     

促红细胞生成素对低氧培养的海马神经元凋亡的影响

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对低氧条件下原代培养的海马神经元凋亡的影响及其可能机制.方法 培养7 d的大鼠海马神经元随机分为常氧对照组、低氧对照组和重组人促红细胞生成素(rHuEPO)低氧处理组(简称rHuEPO处理组,又分100 IU/mL、150 IU/mL两亚组),以四唑盐(MTT)比色法测定培养12、24、36 h的细胞存活率,以Western blot蛋白印迹法测定上述时间点B细胞白血病-淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达.结果 EPO可明显增加低氧培养的海马神经元存活能力(P<0.01),但两剂量组之间差异无统计学意义;rHuEPO处理组神经元Bcl-2表达比同时间点低氧对照组明显增多(P<0.05),而Bax表达比低氧对照组明显减少(均P<0.01).结论 EPO可明显增加低氧培养的海马神经元存活能力,其作用机制可能通过调控Bcl-2和Bax表达实现.