壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜的制备及其与肌成纤维细胞的相容性

目的：制备防粘连壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜并观察其与肌成纤维细胞的相容性。方法：实验于2006-05/11在南方医科大学附属珠江医院中心实验室完成。实验材料：在透析后的壳聚糖与聚乙二醇琥珀酸酯或聚乙二醇共混后置入冻干机冻干制得壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜或壳聚糖/聚乙二醇膜，并将新生2～5d的SD大鼠骨骼肌成纤维细胞种植于膜片上。实验评估：①MTT法测定肌成纤维细胞接种在不同膜片上的吸光度值，计算相对贴附率。相对贴附率=不同膜的A490nm/培养板的A490nm×100%。②MTT法测定肌成纤维细胞在不同膜片上的生长1，5d后的吸光度值。③相差显微镜下观察肌成纤维细胞的生长形貌。结果：①肌成纤维细胞在不同膜片上的贴附率：肌成纤维细胞在壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜上能良好黏附、增殖，而在壳聚糖/聚乙二醇膜、壳聚糖膜上黏附性差。联合培养12h，5d后MTT法结果显示，壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯组的A值分别为0.074±0.009，0.141±0.031，分别为壳聚糖组的6.17倍和6.13倍（P〈0.05）。②肌成纤维细胞的生长特性：肌成纤维细胞在壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯膜上的活性最高，增殖能力最强，增长速度最快，其次为壳聚糖/聚乙二醇膜，但两者差异无显著性意义（P〉0.05），而细胞在壳聚糖膜上的增殖能力较低，膜上细胞数目较少，与其他组比较差异有显著性意义（P〈0.05）。③肌成纤维细胞与不同膜片联合培养1，5d时的生长形貌：壳聚糖膜上细胞未贴壁生长，为透明的圆球形，呈游离状态，未能很好舒展，且有些皱缩，生长活力也不旺盛;细胞与壳聚糖/聚乙二醇膜、壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯膜片联合培养的生长情况要明显好于壳聚糖膜，细胞相互融合成片，多呈长梭形，细胞间隙狭窄，紧密排列成束，成指纹状结构且聚集生长的趋势也更明显。结论：将接支琥珀酰基的聚乙二醇与壳聚糖共混组成的网状系统改进了膜片的力学性能，提高了膜片的柔韧性，使其成膜性更好;壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜具有良好的生物相容性，肌成纤维细胞在壳聚糖/聚乙二醇琥珀酸酯薄膜上的黏附及生长情况明显好于壳聚糖薄膜。     

四种新型仿生骨组织工程支架材料生物安全性评价价

背景:制备仿生骨组织工程支架材料材料的原材料生物活性玻璃已被临床广泛应用于软骨、骨组织的修复、替代,已通过生物安全性评价.目的:利用生物活性玻璃和胶原蛋白、透明质酸、磷酸丝氨酸等天然大分子复合制备4种新型仿生骨组织工程支架材料,观察4种新型仿生骨组织工程支架材料的生物安全性.设计、时间及地点:随机分组设计、动物对照实验,于2006-03/08在南方医科大学珠江医院血液科实验室完成.材料:健康昆明系小鼠60只,健康成年家兔11只.采用冷冻干燥和仿生矿化技术,以改性生物活性玻璃粉体和胶原、透明质酸钠、磷酸丝氨酸等天然生物分子复合制备生物活性玻璃,胶原蛋白/透明质酸/磷酸丝氨酸、生物活性玻璃/胶原蛋白/磷酸丝氨酸、生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸、生物活性玻璃/胶原蛋白4种仿生复合骨组织工程三维支架材料.方法:对4种新型仿牛骨组织工程支架材料进行生物安全性试验:全身急性毒性试验观察小鼠中毒症状.按50mL/kg尾静脉注射4种材料的浸提液.支架材料加入新鲜兔血进行溶血试验,离心后取上清液,测定吸光度值,计算溶血率.兔脊柱两侧皮内注射浸提液观察皮肤刺激反应.主要观察指标:注入浸提液后24,48,72h观察小鼠全身急性毒性反应和皮肤刺激反应,测定溶血率.结果:全身急性毒性试验结果表明,4组小鼠无死亡,无明显毒性表现、体质量下降等不良反应.溶血试验结果表明,4组支架材料的溶血率均<5%,满足医用生物材料的应用要求.皮内刺激反应试验结果表明,4组均未见任何刺激反应,无红斑、焦痂、水肿等皮肤反应现象.结论:仿生复合支架材料生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸/磷酸丝氨酸、生物活性玻璃/胶原蛋白/磷酸丝氨酸、生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸、生物活性玻璃/胶原蛋白无毒性,无刺激性,生物安全性能良好.     

一种可注射性骨水泥在骨组织内的降解状态

目的:研制一种新型的、可注射的磷酸钙骨水泥,并测试该骨水泥的成分、理化学特性及其在骨内的生物降解和成骨特性。方法:实验于2003-10/2004-06在南方医科大学珠江医院骨科中心实验室完成。雄性新西兰大白兔12只,体质量2～2.5kg。根据相关文献合成一种含有β-磷酸三钙(β-TCP)、磷酸二氢钙、碳酸钙和纳米相羟基磷灰石的磷酸钙骨水泥,并用含藻酸钠的液相成分将该骨水泥调制成可用注射器和16号穿刺针操作的注射物。在新西兰大白兔的股骨髁部钻取直径为2mm的骨洞,并注射入该骨水泥。在术后4,8,12,16周分别取标本,骨脱钙后石蜡包埋并行苏木精-伊红(HE)染色,光镜及扫描电镜下观察该骨水泥在股骨髁的降解及再生新骨情况。能谱分析测定降解区钙磷比,X射线衍射图(XRD)检测骨水泥在骨内剩余物的成分。结果:采用Gillmore双针法测试该型骨水泥的初凝时间为25～30min,终凝时间为17～20h,扫描电镜发现骨水泥的颗粒小、孔隙率高。术后切片见骨水泥在骨内相容性良好,4周后体内降解反应明显,8～12周为降解反应的高峰期,16周时降解反应基本完成;降解同时有大量的骨小梁生成。能谱分析证实降解区钙离子含量显著升高,降解区以外钙离子含量较低;XRD显示术后12周时骨水泥的剩余成分为β-TCP。结论:该型磷酸钙骨水泥具有可操作     

“开窗技术”治疗老年退变性腰椎管狭窄症的安全性及疗效

目的探讨初次使用"开窗技术"治疗老年退变性腰椎管狭窄症(DLSS)的安全性及长期效果。方法回顾性分析1999年12月至2005年12月间连续收治的80例,年龄≥60岁,初次"开窗技术"治疗患者的术前风险和基础病、手术操作、围术期并发症及临床效果。结果平均随访67.6个月,80例患者中,无围术期死亡或瘫痪病例,64例(80%)对手术效果满意,55例(66.8%)优良,有并发症者32例(40%),5例为主要并发症,经再次手术后好转;27例为次要并发症,经对症及内科联合处理后治愈。3节以上减压患者长期疗效比单节或2节差,单节和2节之间无明显差异。结论初次使用"开窗技术"治疗DLSS能取得较满意的长期效果且安全,长节段(≥3)减压的患者效果较差。     

三维CT重建测量对下颈椎椎弓根置钉点的定位研究

目的 定位下段颈椎椎弓根的置钉点。 方法　37套成人颈椎CT数据, 三维重建下透视模拟椎弓根在侧块背面的投影,标记其中轴点为置钉点。观察各节段置钉点的分布特征,将侧块背面外上象限等分为九个区域, 观察各节段置钉在九区的分布。以置钉点为原点, 建立直角坐标系, 测量其距侧块背面上外界的坐标值x、y 。结果　C3 、C4节段置钉点多位于W2区和Z2区, C5、 C6节段置钉点大多位于Z2区, C7 节段置钉点则多位于N2区。置钉点距侧块背面外界的分布,在C3 、C4 、C5 、C6节段< C7节段（P<0.05）, 置钉点距侧块背面上界的分布, C3～C7 各节段特征接近( P>0.05)。从C3 到C7, 置钉点分布表现为从外向内的特征,C3 ～C6特征接近, C7特征较特殊。结论 侧块外上象限的九分法有别于其他定位方法,具有较高的临床可行性。     

生物活性颈椎椎间融合器的生物力学研究

目的 评价由羟基磷灰石(HA)/左旋聚乳酸(PLLA)复合研制的生物活性颈椎椎间融合器(BCFC)植入椎间后重建颈椎稳定性及抗最初脱位趋向.方法 在6具颈椎标本上,前路颈5-6分别植入BCFC和髂骨,三维运动稳定性实验测量运动范围;颈4-5分别植入BCFC和髂骨,拔出力学实验测试最大拔出阻力.结果 BCFC组在前屈、左右侧弯和左右轴向旋转的运动范围均较髂骨组减少,较髂骨组稳定,差异有统计学意义(P<0.005);在后伸状态下BCFC组和髂骨组较正常组运动范围增大,但差异无统计学意义(P>0.05).BCFC的最大拔出阻力平均为117.87N(最小值97.5N,最大值135.1N)较骼骨的57.65N(最小值48.6N,最大值68.2N)大,抗脱位趋向较髂骨好,差异有统计学意义(P<0.01).结论 BCFC具有良好的生物力学性能,能重建颈椎稳定性,可满足颈椎椎间支撑融合的要求.     

腰椎‘U’型弹性内固定棒的有限元研究

目的：探讨一种腰椎‘U’型弹性内固定器的力学特征,为进一步临床应用提供理论依据。方法：采用螺旋CT对弹性内固定器进行层厚1.0mm的连续水平扫描,将所得的图像进行轮廓提取和阈值分割后,借助ANSYS8.0软件,建立弹性内固定棒的实体模型与有限元模型,分别施加压缩、前屈及拉伸等各种生理载荷, 观察各模型不同载荷下弹性内固定器的应力分布,并与传统的钛合金内固定棒进行比较。结果：建立了“U”型弹性内固定棒的有限元模型,可以预测内固定棒在变形过程中其本身结构中各节点、单元的受力、位移情况。 结论: 在加载相同的纵向载荷条件下,U型弹性内固定器的应力分布在U型连接棒的“U”型区上,应力应变曲线表现出较好的弹性作用,该内固定棒可能成为治疗下腰痛的新型节段内固定器。     

抑肽酶/氨甲环酸改良可注射性纤维蛋白凝胶的体外实验

背景：可注射性纤维蛋白凝胶为软骨缺损组织工程完全再生修复的临床应用带来了新的方向，其降解速度的调控是其中的关键问题之一。 目的：在可注射性纤维蛋白凝胶中引入不同浓度的抑肽酶和氨甲环酸，观察其对纤维蛋白凝胶支架降解速率的影响。 设计、时间及地点：体外细胞学实验，于2008-02/08在广东省构建与检测实验室进行。 材料：以纤维蛋白原、凝血酶及氯化钙制备纤维蛋白凝胶。 方法：取3周龄新西兰幼兔的关节软骨制取软骨细胞，体外单层培养、扩增后植于标准纤维蛋白凝胶支架和改良纤维蛋白凝胶支架（加入抑肽酶7 500，12 500，17 500 MIU/L及氨甲环酸15，20，25 g/L复合液）上，进行体外培养、扩增6周。 主要观察指标：支架降解情况。 结果：支架细胞复合物体外培养3周时，标准组已完全崩解，改良各组体积尚不到原来1/2。培养6周时仍能保持其一定的外形，具有一定的厚度及弹性。不同浓度的抑肽酶和氨甲环酸，在体外环境下均显著地减缓了纤维蛋白胶的降解速度，低于1 2500 MIU/L的抑肽酶和20 g/L氨甲环酸对软骨细胞的繁殖、表型的维持、基质的分泌无明显不良影响，而高于此浓度的抑肽酶和氨甲环酸的加入明显抑制了细胞的增殖、表型的维持和基质的分泌。 结论：通过调节纤维蛋白凝胶中抑肽酶和氨甲环酸的含量，可实现对纤维蛋白凝胶降解速度的调控。     

Gene expression of inducible nitric oxide synthase in injured spinal cord tissue

ＮＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ ,ＺｈｕｊｉａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ,ＴｈｅＦｉｒｓｔＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ 5 10 2 82 ,Ｃｈｉｎａ (ＬｉｕＣＬ ,ＪｉｎＡＭ ,ＺｈｏｕＣＳａｎｄＣｈｅｎＢ)ＴｈｉｓｗｏｒｋｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ (Ｎｏ :3980 0 16 6 )ｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ (ＮＯ) ,ａｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅ ,ｉｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎ…     

广泛膨出型腰椎间盘突出症的内固定治疗：与单纯开窗治疗比较*☆

背景：对于广泛膨出型腰椎间盘突出症的治疗采用内固定还是单纯手术仍存在争议。 目的：比较内固定与单纯开窗治疗广泛膨出型腰椎间盘突出症的疗效。 方法：回顾性分析2004-12/2009-12珠江医院收治的有根性症状的152例广泛膨出型腰椎间盘突出症患者,55例行单纯开窗减压髓核摘除治疗(单纯组),97例行髓核纤维环摘除,椎间撑开植骨融合,椎弓根钉内固定(融合组)。治疗后定期进行随访。 结果与结论：影像学检查显示,治疗后6个月和6年时,单纯组椎间隙相对高度明显下降,而融合组椎间隙高度比术前增高(P < 0.05)。治疗前及治疗后6个月,两组患者疼痛目测类比评分和Oswestry功能障碍评分差异无显著性意义(P > 0.05),治疗后6年,融合组的疼痛目测类比评分和Oswestry功能障碍评分均优于单纯组(P < 0.01)。提示,对于广泛膨出型腰椎间盘突出症,行髓核及突出纤维环摘除,椎间撑开植骨融合,椎弓根钉内固定的远期疗效优于单纯髓核摘除。 关键词：纤维环膨出;腰椎间盘突出症;融合;内固定;髓核摘除 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.13.008