加味四君子汤对类脾虚小鼠的作用研究

为探讨脾虚的本质,寻找治疗脾虚证的有效方药,本实验选用利血平为致虚因素来复制脾虚动物模型,采用核技术手段进行检测、观察脾虚动物的T_4、环核苷酸含量等指标。结果显示,类脾虚证小鼠血清T_4含量比对照组低(P<0.025),而治疗组由于使用加味四君子汤,其血清T_4含量便接近对照组水平(P>0.05)。类脾虚证小鼠cAMP含量高于对照组(P<0.005),而血浆cGMP含量则低于对照组(P<0.001),而有使用加味四君子汤的治疗组,其血浆cAMP含量则较类脾虚组低(P<0.005),cGMP含量则较类脾虚组高(P<0.05)。提示加味四君子汤的作用机理与调节甲状腺素及环核苷酸水平有关。     

强肌健力饮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-性腺轴作用的实验研究

[目的]观察强肌健力饮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-性腺轴作用的影响.[方法]将SD大鼠随机分为正常对照组,肾阳虚模型组,强肌健力饮低、中、高剂量组(剂量分别为7.8、15.6、23.4 g·kg-1·d-1)、右归丸组(剂量为5.8 g·kg-1·d-1),除正常对照组外,均采用氢化可的松(剂量为25 mg·kg-1·d-1)肌肉注射复制肾阳虚大鼠模型.观察动物的一般状态,计算下丘脑、睾丸指数并对睾丸做组织形态观察,采用放射免疫分析法检测血清睾酮(T)和雌二醇(E2)含量.[结果]强肌健力饮能显著降低下丘脑指数,升高肾阳虚模型大鼠血清T含量及降低E2/T比值(均P＜0.01),而E2含量无明显变化(P＞0.05);组织形态学观察发现,强肌健力饮各剂量组睾丸曲精小管内精细胞体积明显大于肾阳虚模型组,精原细胞核染色质和初级精母细胞核染色体比较显著.[结论]强肌健力饮防治中医肾阳虚证的作用机制可能与其能调控性腺轴的水平有关.     

加味四君子汤对脾虚小鼠心钠素水平的影响

心钠素(ANF)是一种多肽类激素,对机体许多生理过程起着重要的调节作用。本文采用利血平所致脾虚小鼠模型,发现其血浆ANF水平较正常显著降低(P<0.001),而脾组织ANF水平升高显著(P<0.001),加味四君子汤对这种变化有明显的纠正作用,提示ANF与脾虚发病机理和加味四君子汤药理作用机理有一定关系。实验还表明,加味四君子汤使脾虚小鼠一般情况改善,并对脾虚模型小鼠体重及胸腺、脾脏、睾丸和子宫的湿重减轻有显著的保护作用。     

强肌健力口服液对脾虚小鼠DNA合成的影响

目的:观察强肌健力口服液对实验性脾虚证小鼠DNA合成的影响,探讨该方防治脾胃虚损型重症肌无力的作用途径及中医脾肾相关的分子生物学基础。方法:实验于2005-06/07在广州中医药大学核医学实验室完成。选择健康雄性NIH小鼠69只,随机分为5组,即正常对照组(n=12)、脾虚模型组(n=15)、强肌健力口服液26g/kg组(n=14)、强肌健力口服液13g/kg组(n=15)及四君子汤组(n=13)。除正常对照组外,各组小鼠均采用利血平复制脾虚证动物模型,腹腔注射利血平0.2mg/(kg·d)。①正常对照组腹腔注射生理盐水0.1mL/(只·d)。②强肌健力口服液26g/kg,13g/kg组灌胃强肌健力口服液(由北芪、党参、升麻、白术、甘草等组成,每毫升含生药1.204g),给药剂量分别为26,13g/kg,1次/d。③四君子汤组灌服四君子汤(由党参、白术、茯苓、灸甘草组成)26g/kg,1次/d。各组均连续用药16d。给药结束后,测定各组小鼠脾、胸腺、肾、肝、小肠等组织DNA含量的变化;并测定各组小鼠造模前及用药结束后体质量和脾、肾、胸腺、肝脏质量/体质量比值的变化。结果:69只小鼠全部进入结果分析,无脱失。①用药16d后脾虚模型组脾脏、胸腺、小肠DNA含量均比正常对照组显著降低(q=3.45～4.96,P<0.05～0.01),而肾脏组织DNA含量则升高(q=3.81,P<0.05)。②用药16d后强肌健力口服液26,13g/kg组脾脏、胸腺DNA含量显著高于脾虚模型组[(20.73±4.44,12.30±4.61,7.37±4.43;12.76±2.12,11.58±2.46,8.41±3.86)DPM×104/g(q=3.22～12.43,P<0.05～0.01)];强肌健力口服液13g/kg组肾脏、肝脏DNA含量显著升高(q=3.50,3.76,P<0.05);而且体质量也显著高于脾虚模型组(q=9.98,9.94,P<0.01),脾脏、胸腺、肾脏、肝脏组织质量/体质量比值也显著高于脾虚模型组(q=3.53～7.41,P<0.05～0.01)。结论:脾虚证的发生与DNA合成减少有关,强肌健力口服液能促进DNA合成,从而发挥其健脾益气、强肌健力的作用,但发现强肌健力口服液26g/kg组能促进DNA合成,而13g/kg组则有抑制DNA合成的倾向,其调控途径有待于进一步研究。而脾肾相关理论有助于指导临床辨证施治。     

健脾补肾药对脾虚大鼠环核苷酸及甲状腺激素水平的影响

背景：健脾补肾中药对实验性脾虚证有较好的防治作用，环核苷酸及甲状腺激素水平的变化是否与药物作用机制有关?目的：观察健脾补肾方药对实验性脾虚证大鼠环核苷酸及甲状腺激素水平的影响，探讨该方防治脾虚证的作用机制及脾与肾相互关系的意义。设计：随机对照的实验研究。地点和材料：实验地点为广州中医药大学核医学教研室。实验动物为雄性SD大鼠，体质量190～230g，3月龄，普通级，由中山大学实验动物中心提供(动物合格证号为2001A032)。干预：将大鼠随机分为正常对照组(n=10)、脾虚模型组(n=12)，健脾补肾方高剂量组(n=12)和健脾补肾方低剂量组(n=12)，采用大黄复制脾虚证动物模型，分别给予生理盐水、大黄、健脾补肾方煎液(高剂量：22g／kg，低剂量：11g／kg)灌胃。各组动物于最后1次给药后1h从眼球取血，观察各组大鼠血浆环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)，环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate， cGMP)，及甲状腺素(tHyroxine，t4)、三碘甲腺原氨酸(thiodothyronine，T3)、促甲状腺素(thyroid stimulating hormone，TSH)水平的变化。主要观察指标：各组大鼠cAMP，cGMP，T4，T3，TSH水平。结果：脾虚模型组大鼠血浆cAMP含量[(30．29&;#177;6．55)mmol／L]及cAMP／cGMP(2．94&;#177;1．13)比值均比正常对照组升高，T3[(1.55&;#177;0．23)nmol／L]，T4[(67．73&;#177;14．17)nmol／L]含量比正常对照组下降，差异有显著性意义(q=5．87，7．91，5．61，P均&;lt;0.01)。高剂量健脾补肾方药能降低实验性脾虚证大鼠体内cAMP含量[(20．81&;#177;3．75)nmol／L]及cAMP／cGMP比值(1．34&;#177;0．52)，提高T3[(2．19&;#177;0．38)nmol／L]，T4[(89．70&;#177;21．27)nmol／L]含量，与脾虚模型组比较，差异有显著性意义(q=6．49，6．56，7．86，4．87，P均&;lt;0．01)；升高脾脏、胸腺质量比值，减轻肾脏组织质量。结论：健脾补肾中药可以消除大黄的药物影响，防止出现脾虚症候，其作用机制与调节cAMP、cGMP及甲状腺激素水平有关。     

强肌健力方及黄芪多糖对脾虚大鼠胃肠激素水平的影响

目的 观察强肌健力方及其有效组分黄芪多糖对脾虚大鼠血清淀粉酶(AMS)、胃泌素(Gas)和血浆胃动素(MTL)水平变化的影响,探讨强肌健力方防治脾虚证的作用机理.方法 将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、脾虚模型组、强肌健力组、黄芪多糖组、强肌健力方去黄芪加黄芪多糖组(简称强肌多糖组),除正常对照组灌服蒸馏水外,其余各组采用大黄复制脾虚模型,分别给予强肌健力方、黄芪多糖、强肌多糖药液灌胃,连续15d.第16天从眼球眶下静脉采血,放射免疫分析法测定Gas和MTL的含量,比色法检测AMS的含量.结果 脾虚模型组大鼠血清AMS、Gas和血浆MTL含量均比正常对照显著降低(P均＜0.01);而强肌健力和强肌多糖组能使大鼠血清AMS、Gas和血浆MTL含量显著升高,与脾虚模型组比较有统计学差异(P均＜0.01),但黄芪多糖组对其影响不明显.结论 强肌健力方能改善和促进消化道机能及胃肠动力学,其作用机理与调节Gas和MTL分泌水平有关.但黄芪多糖对Gas和MTL分泌没有调节作用,需与方中其他药物联合应用方能显效.     

强肌健力方对脾肾两虚证大鼠胸腺增殖细胞核抗原表达的影响

目的观察强肌健力方对脾肾两虚证大鼠胸腺组织的作用及机理。方法将72只SD大鼠随机分为5组,即正常对照组(10只),模型组(16只),强肌健力方组(15只),黄芪减量方组(15只),单味黄芪组(16只)。采用灌服大黄复制脾虚模型(14天),在脾虚基础上采用肌肉注射氢化可的松复制肾虚模型(10天)。造模同时分别给予蒸馏水、强肌健力方、黄芪减量方、单味黄芪灌胃,连续给药24d后,取胸腺组织行HE染色,光学显微镜下观察各组大鼠胸腺组织形态学的变化,用免疫组化的方法测定增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果模型组体质量比正常对照组显著减轻(P<0.01),而各用药组均可使大鼠体质量升高(P<0.05或P<0.01);模型组大鼠胸腺组织有不同程度损伤,而强肌健力方组、单味黄芪组能使已遭损伤的胸腺组织得以修复;与正常对照组比较,模型组胸腺组织PCNA蛋白表达减少,阳性面积率显著降低(P<0.01);而强肌健力方能使胸腺组织PCNA表达升高(P<0.05)。结论强肌健力方能有效促进脾肾两虚证大鼠胸腺组织细胞增殖,并对受损的胸腺组织具有保护作用,其健脾益气的作用机理与升高PCNA表达有关。     

强肌健力方对脾肾两虚大鼠细胞因子水平的影响

目的：观察强肌健力方对实验性脾肾两虚证大鼠血清细胞因子含量变化的影响,探讨脾肾两虚证与细胞因子的关系,以期进一步了解该方药对改善脾肾两虚证的意义及黄芪在方中的作用。方法：采用随机法将72只SD大鼠分为五组,正常对照组10只,脾肾两虚组16只,强肌健力方组15只,黄芪减量组15只,黄芪组16只。造模分两个阶段完成。第1d～14d采用大黄造模;第15d～24d采用氢化可的松复制脾肾两虚证大鼠模型。应用大黄及氢化可的松造模,分别给予蒸馏水、强肌健力方、黄芪减量方,黄芪方灌胃,连续给药24d后,采用放射免疫分析观察各组动物血清IL-2、IL-6、TNF水平的变化。结果：脾肾两虚组大鼠血清IL-2、TNF含量比正常对照组低（P〈0.05～0.01）,而IL-6含量则升高（P〈0.01）。强肌健力方组能升高IL-2、TNF含量和降低IL-6含量（P〈0.01）。黄芪减量组能使TNF含量升高及降低IL-6含量。黄芪组能使IL-6含量降低,但对IL-2、TNF含量没有影响。结论：脾肾两虚证的发生与细胞因子网络调节系统的失衡有关,强肌健力方可以改善脾肾两虚证大鼠这种免疫功能失衡,通过健脾益气功效来调节细胞因子水平,从而达到增强免疫功能的作用。这为脾肾两虚证时体内细胞因子水平的改变提供了理论依据,同时也提示该方重用黄芪可能是防治脾肾两虚的一个关键。     

毛冬青甲素对3’,5’—环一磷酸腺苷磷酸二酯酶活性的影响

为探讨毛冬青甲素提高血小板 cAMP 的含量的机理,实验通过测量经磷酸二酯酶(PDE)水解作用后剩余的 cAMP 量来计算 PDE 的活性,井探讨不同浓度毛冬青甲素对 PDE 活性的影响。实验结果表明:0.1g/L 及0.5g/L 两种不同浓度的毛冬青甲素溶液其被水解的 cAMP 量分别为91.90±7.91pmol 和66.40±2.84pmol,与对照组(128.00±7.38pmol)比较,p<0.05或 p<0.01。提示毛冬青甲素能抑制PDE 的活性,说明毛冬青甲素能提高血小板 cAMP 水平,抑制血小板的凝集作用是通过抑制血小板的3′,5′-环一磷酸腺苷磷酸二酯酶的活性而实现的。