源于纤维单胞菌的聚阿拉伯糖内切酶性质的研究

目的确定源于纤维单胞菌（Cellulomonose sp．）的聚阿拉伯糖内切酶的性质。方法SDS—PAGE和凝胶层析测定相对分子质量,离子交换层析估计等电点,TLC法测定酶活力,Lineweare—Burk双倒数做图法测定酶促反应动力学特性。结果相对分子质量为45kD,等电点约为6．0,酶促反应动力学符合Michaelis—Menten动力学规律,在37℃反应条件下,米氏常数Km为2．5mg／ml,最大反应速率Vmax为0．083μmol／L·min,最适pH为8．0,pH6．0～9．0时较稳定。最适温度为40℃,在40℃以下较稳定,超过50℃时酶活力开始下降。结论确定了一种聚阿拉伯糖内切酶的性质。     

多重耐药肺炎克雷伯菌致塑型性支气管炎一例

患儿,男,4岁1个月,主因"发热、咳嗽3d,加重伴呼吸困难5.5h"于当地医院转入烟台毓璜顶医院.体格检查:T39.4℃,P 166次/min,R 65次/min,Bp 111/88mm Hg(1 mm Hg =0.133 kPa),SPO2 80％,神志清,精神不振,面色发绀,鼻翼扇动,吸气三凹征阳性,呼吸运动右侧减弱,右肺叩浊音,右肺呼吸音低.血常规:WBC26.92×109 L-1、N 87.6％、HB 144 g/L、PLT426×109L-1,CRP 126 mg/L,降钙素原(PCT):1.72 ng/ml,血气分析:pH 7.375、PaCO2 5.08 kPa、PaO2 5.41 kPa、BE-2.5 mmol/L,胸片及肺部CT提示:右肺肺不张,纵膈右侧移位,左肺过度通气(图1A-1C).紧急气管插管、机械通气(MV),吸入氧体积分数(FiO2) 1.0下SPO2 75％ ～80％.给予美罗培南(日本住友)、万古霉素(美国礼来)联合抗感染.于入院0.5h急诊纤维支气管镜检查发现一"果冻样"痰栓堵塞右主支气管(图1D),支气管镜吸引不易清除,采用异物钳钳出多块黄白色长约2.5 ～5.0 cm支气管树样、柔软、黏性痰栓(图1E).     

不同剂型美托洛尔对不稳定型心绞痛患者QT离散度和心率变异性的影响研究

目的探讨两种剂型美托洛尔对冠心病不稳定型心绞痛患者心率变异性(HRV)及QT离散度(QTd)的影响并观察两种剂型美托洛尔对不稳定型心绞痛患者的临床疗效。方法选择2010年6月—2011年6月收入院的100例冠心病不稳定型心绞痛患者为研究对象,随机分为平片组及缓释片组,在常规冠心病治疗基础上,分别服用美托洛尔平片(25.00 mg,2次/d)和缓释片(23.75 mg,1次/d),治疗6个月。观察治疗前和治疗14 d后HRV及QTd的情况;观察治疗6个月时两种剂型美托洛尔治疗不稳定型心绞痛患者的临床疗效。结果治疗14 d后,两组患者24h正常R-R间期标准差(SDNN)、24 h内每5 min平均正常R-R间期值的标准差(SDANN)、相邻正常R-R间期差值的均方根(RMSSD)及相邻正常R-R间期差值≥50 ms的心搏数占总R-R间期数的百分数(PNN50)较治疗前提高,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗14 d后以上指标间差异有统计学意义(P<0.05)。治疗14 d后,两组患者QTd、校正的QT离散度(QTcd)均较治疗前缩短,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗14 d后比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗6个月时平片组有3例、缓释组有5例停止服药或改服其他药物;平片组显效15例,有效23例,无效9例,缓释片组显效18例,有效20例,无效7例,两组疗效间差异有统计学意义(u=0.807,P>0.05)。结论应用美托洛尔缓释片治疗不稳定型心绞痛在控制HRV及QTd方面的效果较美托洛尔平片更好,美托洛尔平片和美托洛尔缓释片均能改善不稳定型心绞痛患者预后。     

静脉用免疫球蛋白对脓毒症患儿免疫状态及转归的影响

目的 探讨静脉用免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)对脓毒症患儿免疫状态以及转归的影响.方法 2008年8月至2010年4月入住我院儿童重症医学科符合脓毒症诊断的患儿84例,分为对照组(48例)和治疗组(36例),治疗组一次性输注IVIG l g/kg,分别于用药前(0 h)及用药后24h、72 h和5d抽取两组患儿外周静脉血,在流式细胞仪上进行免疫细胞(CD3+、CD4+、CD56+、CD19+、CD8+)计数,采用ELISA法检测细胞因子[肿瘤坏死因子-d(TNF-α)、白细胞介素(IL)-10、IL-17]水平并计算TNF-α/IL-10.比较两组患儿各时间点免疫细胞计数、细胞因子水平以及TNF-α/IL-10变化,并观察比较两组患儿28d病死率.结果 治疗组患儿CD3+、CD4+、CD56+、CD19+细胞计数,TNF-at、IL-17以及TNF-a/IL-10在应用IVIG后24h、72h、5d均明显低于对照组(P＜0.05),并且呈进行性下降趋势;而IL-10则明显增高(P＜0.05),呈上升趋势;CD8+细胞计数无明显变化.治疗组28 d死亡10例(27.7％,10/36),对照组死亡8例(16.6％,8/48),两组比较差别无统计学意义(x2=1.50,P=0.169,OR=1.92,95％ CI:0.671～5.510).结论 IVIG可使脓毒症患儿机体处于免疫麻痹状态,并不能提高存活率.     

组织蛋白酶S抑制剂对兔血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 研究组织蛋白酶S抑制剂对培养的兔血管平滑肌细胞凋亡的影响及其机制.方法 获取兔主动脉组织,传代培养血管平滑肌细胞,将细胞分为对照组、单药组(血管紧张素Ⅱ)、联合组(组织蛋白酶S抑制剂+血管紧张素Ⅱ);采用流式细胞术和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测血管平滑肌细胞凋亡,蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤基因-2蛋白、B细胞淋巴瘤基因-2相关蛋白X及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3的表达.结果 ①流式细胞术检查及TUNEL染色结果均显示,联合组血管平滑肌细胞晚期凋亡数量明显低于单药组;TUNEL染色10 h和12 h时点,单药组与联合组差异有统计学意义[ 10 h:(23607±176)比(36058±269)个,12 b:(29813±205)比(39146±263)个,均P＜0.05];②蛋白质印迹检测结果显示,与单药组相比,联合组B细胞淋巴瘤基因-2相关蛋白X/B细胞淋巴瘤基因-2蛋白明显下降,组间差异有统计学意义(P＜0.05);联合组半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3表达明显降低,组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 组织蛋白酶S抑制剂可能通过下调B细胞淋巴瘤基因-2相关蛋白X、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3表达减轻血管平滑肌细胞凋亡.     

器官移植病人外周血淋巴细胞表面蛋白分子表达与移植器官功能和活组织病理学改变时相比较

目的系统比较移植后外周血淋巴细胞表面蛋白分子表达时相与病理改变时相间的差别,探讨外周血淋巴细胞免疫活性变化与移植器官排斥反应时间进程间的关系。方法分别通过对临床4例肾移植、4例心脏移植和1例单肺移植病人的观察,利用病理学、流式细胞术等技术,系统比较了移植器官功能改变时相、移植器官的病理改变时相、外周血淋巴细胞表面蛋白分子表达时相的时间进程的差别和先后顺序。结果 (1)9例器官移植病人中有4例在发生急性排斥反应,免疫抑制剂不能完全阻断脏器移植排斥反应的发生;(2)肾移植术后早期,对外周血淋巴细胞表面蛋白分子CD3、CD4、CD8和TCR表达水平的监测可以帮助发现和判断急性排斥反应的时间进程,并可较准确地监测抗排冲击的疗效,减少免疫药物冲击疗程的盲目性;(3)心脏移植排斥反应病人淋巴细胞HLA-DR分子于移植后24～72 h期间出现高于没有排斥反应病人的表达高峰,比活组织检查诊断排斥反应时间提前5～7 d;(4)9例病人24 h内平均淋巴细胞表面蛋白分子CD3、CD4、CD8、HLA-DR、ICAM-I、MHC-Ⅱ、TCR等负调表达,淋巴细胞活性被一过性抑制;(5)9例病人24～48 h期间,平均淋巴细胞表面蛋白分子CD3、CD4、HLA-DR、ICAM-I、MHC-Ⅱ、TCR等正调表达。结论外周血淋巴细胞表面蛋白分子的测定对临床急性排斥反应的早期发现和时间进程的监测、抗排斥反应药物治疗效果的判断与监测具有一定的指导意义。     

HPLC法测定补肾活血片中淫羊藿苷的含量

目的 建立高效液相色谱测定补肾活血片中淫羊藿苷含量的方法。方法 采用HPLC方法 ,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(25∶75),流速为1.0mL.min-1,检测波长为270nm。结果 淫羊藿苷浓度在16.16μg.mL-1～323.2μg.mL-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9997,平均回收率为99.66%,RSD为0.78%。结论 该测定方法操作简便、结果准确、重现性好,可用于补肾活血片的质量控制。     

不同剂量人脐带间充质干细胞异种移植对大鼠血液学及肝肾功能影响的研究

目的 观察不同剂量的人脐带胶样组织间充质干细胞(hUMSCs)经静脉移植入大鼠体内对血常规及肝肾功能等指标的影响.方法 ①体外培养人脐带间充质干细胞;利用流式细胞仪鉴定第4代hUMSCs表面抗原的表达;标准试剂盒鉴定第4代hUMSCs向脂肪细胞和成骨细胞分化的潜能;②182～203 g的50只SD大鼠随机分为5组:空白对照组;盐水组;3.5×107/kg干细胞移植为干细胞Ⅰ组;3.5×108/kg干细胞移植为干细胞Ⅱ组;3.5×109/kg干细胞移植为干细胞Ⅲ组;注射后第11天,腹主动脉取血,监测和比较血常规和生化指标,分析比较各项指标的变化和差异.结果 ①第4代hUMSCs特异性表面抗原CD73、CD90和CD105表达强阳性,能分成脂细胞和成骨细胞,比例分别为98.4％和95.7％;②注射干细胞后实验动物全部存活,第11天时实验组24项血常规指标与空白对照组相比差异无统计学意义;③于细胞组血糖较空白对照组明显降低[(8.4±1.6),(7.7±1.6),(7.1±1.6) mmol/L比(9.6±4.9)mmol/L];干细胞组糖化血清白蛋白较空白对照组明显降低[(0.69±0.10),(0.68±0.12),(0.65±0.08) mmol/L比(0.85±0.14) mmol/L];干细胞组的心肌酶水平较空白对照组明显降低[(184±8),(155±24),(144±18)U/L比(223±21) U/L,P＜0.05].结论 不同剂量hUMSCs经尾静脉注射入大鼠体内引起血糖、糖化血红蛋白和心肌酶等的降低,且与剂量相关,选择适当剂量的干细胞移植将对临床治疗效果起到重要的作用.     

家庭特殊人群的安全用药

近几年随着非处方药的出现,人们自我诊断、自行选择使用药品的现象日趋增多,家庭中使用药品的安全隐患也不容忽视,尤其是家庭特殊人群的用药安全更需引起重视。1特殊人群之一:老年人老年人用药比其他年龄段的人群要多,并且经常是多种药物同时服用,而其生理功能却在逐渐衰退,肝脏代谢与肾脏消除的能力也减弱,严重影响了药物的吸收、分布、代谢和排泄,其不良反应的发生率就相对增加。这就提示我们,老年人用药时要     

人心肌肌球蛋白轻链基因启动子驱动的GFP和Luc报告基因在人心肌细胞系中的表达

目的:构建人肌球蛋白2v基因启动子(pMLC2v)驱动的绿色荧光蛋白(GFP)和萤光素酶(Luc)报告基因慢病毒载体并观察其在人心肌细胞系(HCM)和人肺癌细胞株A549中的整合表达特征。方法:应用去毒化的人类I型免疫缺陷病毒和pMLC2v-GFP或pMLC2v-Luc报告基因构建慢病毒示踪载体,转染HCM和A549细胞,激光共聚焦显微镜及生物发光检测仪观察2种报告基因在不同细胞生长进程中的表达特征。非特异性启动子驱动的GFP(GFP_C)和红色荧光蛋白(RFP_C)报告基因作为对照。结果:2种细胞转染GFP_C和RFP_C后第3 d,都表达GFP和RFP;而HCM只在转染pMLC2v-GFP和pMLC2v-Luc 21 d后表达GFP和Luc,A549细胞不表达。结论:pMLC2v主要在培养21 d后新增殖的人心肌细胞中驱动GFP和Luc报告基因表达,这为监测干细胞向心肌细胞的分化进程提供了可靠的病理及活体示踪工具。