幽门螺旋杆菌根除失败的影响因素分析

目的分析根除幽门螺旋杆菌治疗失败的原因及其临床影响因素。方法选取幽门螺旋杆菌感染病人257例,按照幽门螺旋杆菌根除结果分为失败组77例和治愈组180例,收集病人一般资料及临床相关指标,分析根除幽门螺旋杆菌治疗失败的原因。结果幽门螺旋杆菌根除失败率为29.96%（77/257）。单因素分析显示,居住地、文化程度、有家庭成员感染、CagA阳性、口腔HP感染、治疗情况、不规则服药、耐药、未全程督导在失败组和治愈组之间差异均有统计学意义（P < 0.05~P < 0.01）。logistic回归分析显示,文化程度和不规则服药均为根除失败的独立影响因素（P < 0.01和P < 0.05）。结论文化程度、不规则服药等多种因素影响根除幽门螺旋杆菌治疗结果,临床应根据相关影响因素及早干预。     

蓬勃发展的西安老年大学

西安老年大学成立于1995年3月,十几年来经历了"创办起步、探索提高、蓬勃发展"三个阶段。现已初具规模,有分校23所,13个区县实现了"一片红",建立乡镇、街道和社区、村组老年学校80多所,四级办学网络在逐渐形成。目前共开设30多门专业课,360个教学班,1.6万多名学员(其中总校现有77个班,1926人)。     

胰腺腺泡细胞凋亡在大鼠急性胰腺炎病程中的作用及凋亡调控基因的表达

目的: 探讨胰腺腺泡细胞凋亡及凋亡调控基因--Bax的表达情况及其与急性胰腺炎严重度的关系. 方法: 在胰胆管共同通道内逆行注射不同浓度的脱氧胆酸钠,制备不同重症程度的急性胰腺炎模型.24只SD大鼠随机分为对照组(假手术组)、APⅠ组(0.75%剂量组)和APⅡ组(1.5%剂量组).分别于造模后6小时处死各组存活大鼠.用TUNEL法分析腺泡细胞凋亡情况,用免疫组化及WesternBlotting检测Bax的表达情况. 结果: APⅠ组大鼠较APⅡ组胰腺坏死减少、出血减轻,血清淀粉酶、IL-6和IL-8水平明显下降;病变程度轻的APⅠ组大鼠腺泡细胞凋亡指数比病变程度重的APⅡ组高(6.36±2.41vs2.34±1.15,P<0.05);正常腺泡细胞Bax的表达弱;产生急性胰腺炎时,腺泡细胞Bax的表达增强,病变程度轻的大鼠腺泡细胞Bax表达水平较病变程度重的强,与二者凋亡指数的差别相一致. 结论: 产生急性胰腺炎时,腺泡细胞凋亡与其病情严重程度呈负相关,腺泡细胞凋亡在急性期是一种保护现象;Bax的表达水平与腺泡细胞凋亡指数呈正相关,与胰腺炎的病变程度呈负相关.     

异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞蛋白双向电泳图谱的差异分析

目的利用蛋白质组学方法,识别异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc2 155细胞(SM细胞)后差异表达的蛋白质,为进一步深入探讨异烟肼抑制分枝杆菌生长的作用机制及寻找新的抗结核药物作用靶标奠定基础。方法观察不同浓度的异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌生长曲线,确定药物处理SM细胞的最佳时间和浓度,并提取在最佳处理时间和浓度条件下的SM细胞总蛋白,采用载体两性电解质pH梯度双向凝胶电泳技术分离异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc2 155细胞的总蛋白质,用PDuest7.3.1图像分析软件比较分析,以识别差异表达的蛋白质。结果在空白对照组检出159个蛋白斑点,在异烟肼处理组检出221个蛋白斑点,在相对分子质量30 000~90 000和pH值4.5~6.0范围内,异烟肼处理组蛋白斑点数均多于空白对照组。结论异烟肼处理前后耻垢分枝杆菌mc2155细胞的蛋白质组具有差异,提示异烟肼处理后促进了某些特定基因的表达。     

结核分枝杆菌wbbL蛋白质可溶性表达及鉴定

目的优化结核分枝杆菌wbbL基因在大肠埃希菌中的表达,获得大量可溶性产物并加以鉴定。方法不同条件下诱导pET16b-wbbL质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达;建立外源重组蛋白质与分子伴侣在大肠埃希菌中的共表达体系,优化其表达条件;超声破碎诱导表达的大肠埃希菌,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物;免疫蛋白印迹(Western blotting)法对重组蛋白质进行鉴定。结果共表达体系优化表达的蛋白质主要以可溶性形式存在,经0.5 g/L L-阿拉伯糖30℃诱导5 h、0.5 mmol/L异丙酸-D-硫代半乳糖苷30℃诱导2 h时,可溶性目的蛋白的产量最多,占细胞蛋白总量的55.6%,且所表达的蛋白质为wbbL基因产物。结论在大肠埃希菌中成功表达出大量可溶性结核分枝杆菌wbbL蛋白质,为研究其酶促反应动力学特征以及建立完善的筛选抗结核药物的酶反应体系提供了基础。     

GFP和RFP报道基因在人体不同细胞中转导率的比较研究

目的 比较慢病毒载体介导的绿色荧光蛋白（GFP）和红色荧光蛋白（RFP）报道基因在人体不同细胞中的转导率,为再生医学和组织工程学研究中报道基因的选择提供依据.方法 将构建的GFP和RFP慢病毒载体分别转染人骨髓间充质干细胞（hMSC）、人脐静脉内皮细胞株（Eahy926）和人肺泡上皮细胞株（A549）.4d后,用流式细胞仪检测GFP和RFP的转导率,并利用激光共聚焦显微镜观察GFP和RFP的表达特征.结果 GFP和RFP在hMSC、Eahy926和A549三种细胞间的转导率均有显著性差异（P﹤0.01）;在hMSC或Eahy926或A549的同种细胞中GFP和RFP的转导率也有显著性差异（P﹤0.01）;RFP在部分Eahy926和A549细胞局部高表达.结论 慢病毒载体介导的GFP和RFP报道基因在人体不同细胞中的转导率明显不同.     

儿童肺炎支原体感染合并肺动脉血栓形成一例并文献复习

目的分析儿童肺炎支原体(MP)感染合并循环血栓形成病例血栓栓塞及抗磷脂抗体(a PL)谱特点,以期提高对MP感染合并血栓栓塞事件的认识。方法报道1例肺炎支原体肺炎(MPP)合并急性肺动脉血栓形成儿童病例,并复习相关文献,纳入符合MP感染导致血栓栓塞事件的儿童,分析其临床及a PL水平变化,探讨MP感染合并血栓栓塞事件与a PL之间的关系。结果我们报道1例MPP合并急性肺动脉血栓形成和循环a PL阳性的患儿,同时检索相关文献,纳入病例14例,男8例(61.5%),年龄(7.78±2.74)岁,所有病例入院时均有肺部炎症,动脉系统栓塞7例(50%):脑动脉3例、脾动脉2例、椎动脉1例、左颈内动脉1例、双侧腘动脉1例;静脉系统栓塞7例(50%):肺动脉4例、右心房1例、左腘静脉1例、右髂外静脉1例。14例患儿中9例(64.2%)检测抗a PL:9例检测a CL、6例检测LA、4例检测抗β2GI;9例检测a CL均阳性,6例检测LA中阳性5例,4例检测抗β2GI病例中阳性3例。所有患儿均接受静脉用阿奇霉素以及治疗量抗凝治疗(持续静脉应用普通肝素钠并口服华法林)。随访3个月后,患者均痊愈,所有抗磷脂抗体均转阴。结论 MP感染合并循环血栓栓塞事件时可伴随a PL阳性,但为短暂阳性,与儿童抗磷脂综合征不同。     

兔外周血与骨髓源性内皮祖细胞培养鉴定及生物学特性的研究

目的:探索并建立兔内皮祖细胞(EPCs)的体外培养、鉴定方法。方法:采用密度梯度分离法分别从兔外周血和骨髓中分离出单个核细胞,接种于预包被明胶的培养瓶,并应用培养基(EBM-2)诱导培养,诱导分化为EPCs;在倒置显微镜下观察两种源性细胞生长过程;台盼蓝法测定细胞传代成活率;通过绘制生长曲线法、MTT法、DNA周期检测比较两种源性获得的EPCs增殖情况;采用免疫荧光染色观察EPCs相关抗原CD34、CD31、CD133及vWF因子的表达。结果:两种源性EPCs均于培养3～4d完全贴壁,呈克隆样生长,7～9d形成类似成熟血管内皮细胞形态,细胞数量逐渐增多,细胞成活率均为95%。两种源性获得的第2代细胞生长曲线近似"s"形、MTT法显示3～5d细胞增殖较明显,外周血源性EPCs G0-G1期和S+G2+M期所占比例分别为96.48%和3.52%,骨髓源性EPCs G0-G1期和S+G2+M期所占比例分别为97.11%和1.84%。第2代EPCs进行免疫荧光鉴定结果显示:两种源性内皮祖细胞均阳性表达CD34、CD133、vWF因子,CD31弱阳性表达。结论:两种源性的EPCs均可高效获得且在体外稳定培养。与传统的骨髓源性EPCs相比较,从外周血源获得的EPCs是一种可靠、简便的培养方法,为组织工程学提供理想的细胞来源。     

原子力显微镜定量检测人骨髓间充质干细胞等效黏附力的实验研究

目的 建立原子力显微镜检测体外培养人骨髓间充质干细胞（hMSCs）黏附力的方法. 方法 对原子力显微镜施加不同垂直方向力所引起的体外培养hMSCs细胞宽度的变化进行测量,并根据力学原理推算细胞对抗垂直力的等效黏附力.设引起细胞宽度降低10%的垂直力为临界等效黏附力,引起细胞完全脱离培养基质面的垂直力为最大等效黏附力. 结果 培养24 h后,末包备培养皿中hMSCs细胞的临界和最大等效黏附力分别为0.8319和1.1092 nN,纤维黏连蛋白包备基质培养皿中hMSCs的临界和最大等效黏附力分别为0.5546和0.8319 nN.培养72 h后,2组细胞的等效黏附力没有改变. 结论 建立了原子力显微镜垂直方向力模式直接测量体外培养hMSCs等效黏附力的方法.     

早期测定血清神经元特异性烯醇化酶水平对心跳呼吸骤停复苏后住院患儿转归以及神经学预后的预测作用

目的探讨早期检测血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平对发生心跳呼吸骤停（CRA）住院患儿复苏后转归以及神经学预后的预测作用。方法选择2006年1月至2008年12月发生CRA的住院患儿,分为死亡组和存活组,对存活患儿随访6个月,分为神经学预后不良组和预后良好组。比较患儿年龄、性别、骤停类型、CPR时间、ROSC后Glasgow昏迷评分（CCS）、瞳孔对光反射恢复、需要镇静与否;在复苏后24～36h随机测定外周静脉血清NSE浓度,比较组间采样时间以及血清NSE水平。利用受试者工作特征（ROC）曲线,分别取NSE对复苏后死亡和6月时神经学不良预后诊断特异度（Sp）为100％、敏感度（se）最高的点为截断（cutt-off）值,并计算阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）和正确度。结果最终纳入病例87例,ROSC43例,存活出院19例,死亡24例;随访6月后,神经学预后不良12例,预后良好7例。死亡组与存活组以及神经学预后不良组与良好组间比较,CPR时间、GCS、瞳孔对光反射恢复、需要镇静与否以及NSE血清水平存在显著统计学差异（P均〈0．05）。NSE水平与CPR时间呈显著正相关（r=0．901,P=0．00）;与GCS呈显著负相关（r=-0．813,P=0．00）。NSE对复苏后ROSC患儿转归的ROC曲线下面积为0．846±0．065（95％CI：0．720-0．973,P=0．oo）,截断值为90．6ng／ml,Se、Sp、PPV、NPV、准确度分别为20．8％、100％、100％、50％、53．5％;NSE对神经学预后的ROC曲线下面积为0．929±0．072（95％CI：0．788—1．069,P=0．002）,截断值为50．7ng／ml,se、Sp、PPV、NPV、准确度分别为50％、100％、100％、53．8％、68．4％。结论ROSC后早期血清NSE水平对复苏后患儿转归和神经学预后有预测意义。