国家人类肝脏蛋白质组计划

贺福初，中国科学院院士。主要从事细胞生物学和遗传学研究。在国际上首次发现“发育相关进化”、“协同进化”、“协调进化”及“分子减速进化”等规律性现象；在国际上首次发现并克隆HPO、研制其重组品，并发现其两条信号转导通路；建立了目前国际上有关肝脏和胎肝最大规模、最系统的基因表达谱并从中发现数百种人源新基因；在国内率先倡导并积极开展了蛋白质组学研究，是国家“973”计划重大项目“人类重大疾病的蛋白质组学研究”的首席科学家；在国际上倡导并领衔启动了人类第一个组织、器官的“人类肝脏蛋白质组计划”，担任该项计划执行主席，这也是我国第一次领导大型国际合作计划。     

HMG20A对肝癌细胞体外增殖与迁移的影响及其机制

 目的  研究HMG20A在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展和转移中的功能与机制。方法  在不同转移能力和遗传背景的肝癌细胞Huh7和HCCLM3中分别构建HMG20A过表达和敲低稳定株,通过实时定量PCR (real time quantitative PCR,qPCR) 验证过表达和敲低该基因的效果。用CCK8试剂盒检测HMG20A对肝癌细胞增殖能力的影响,利用Transwell小室分析HMG20A调控肝癌细胞转移的能力。借助Western blot和qPCR分析HMG20A调控肝癌增殖和转移的机制。结果  体外实验表明,HMG20A能够促进肝癌细胞的体外增殖和迁移,显著上调促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路中p38 (p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)的活性和表达水平,同时上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的标志物Vimentin、抗平滑肌抗体(anti-smooth muscle antibody,alpha-SMA)、N-cadherin受到显著的正调控,E-cadherin受到显著负调控。结论  HMG20A可能通过促进EMT进程和MAPK通路促进肝癌细胞的体外增殖与迁移。     

肝窦内皮细胞的分离纯化及鉴定方法

肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSEC)是肝脏非实质细胞(nonparenchymal cell,NPC)的主要细胞群,占这些细胞数的40％左右,由LSEC组成的肝窦壁是全身毛细血管壁中唯一缺乏基底膜的毛细血管,同时LSEC具有特殊的标志性结构-窗孔.肝窦内皮细胞不仅在形态上与其他血管内皮细胞不同,在功能上也有不同.肝窦内皮细胞组成肝窦壁,构成血流与肝细胞间的屏障,在调节肝窦血流与周围组织的物质交换中起有效的中枢性作用,对于维持正常的肝功能起十分重要的作用.在物质代谢方面,L.SEC在脂质、胆固醇和维生素A的平衡和分配方面具有重要的作用,同时能通过特异的内吞作用清除变性的大分子脂质、某些细胞外基质成分,在维持肝窦的正常生理功能方面发挥重要作用;在免疫方面,ISEC的位置使其可以第一时间与抗原接触,启动免疫应答,同时近年来发现LSEC能诱导T细胞免疫耐受,这在肝移植中有重要意义;此外,研究发现LSEC损伤在肝脏冷保藏和缺血再灌注损伤中占中心地位,而LSEC在缺血再灌注损伤以及冷保藏中的损伤机制也是近几年的研究热点.     

泛素连接酶Smurf1与接头蛋白TRAF1相互作用并介导其泛素化降解

目的研究泛素连接酶Smurf1与接头蛋白TRAF1之间的相互作用,并检测TRAF1蛋白水平是否受Smurf1调控。方法在HEK293T细胞中共表达TRAF1与Smurf1,通过免疫共沉淀测定二者结合,并检测与Smurf1共表达时TRAF1蛋白水平变化,最后用AP-1报告基因测定TRAF1功能是否受Smurf1调控。结果 TRAF1可以特异性地与Smurf1相互作用,其在细胞内的蛋白水平可以被Smurf1所降低,而且TRAF1在AP-1报告基因中的抑制功能可以被Smurf1逆转。结论 TRAF1与Smurf1相互作用导致TRAF1在细胞内的蛋白水平降低而且在AP-1通路中的抑制作用减弱。     

微管结合蛋白NuSAP的组织表达谱分析

目的探讨微管结合蛋白NuSAP的组织分布特征。方法利用组织斑点杂交和Northern杂交分析NuSAP在多种组织中的分布情况,RT-PCR分析NuSAP在多种肿瘤细胞系中的mRNA水平,Western印迹分析NuSAP在多种肿瘤细胞系中的蛋白水平。结果 NuSAP的组织表达谱分析表明该基因在胸腺、胎肝、骨髓中高表达,提示NuSAP在造血免疫中可能发挥重要功能;在多数肿瘤细胞中均可检测到NuSAP的表达,为分析该基因的功能提供了线索。结论本研究揭示了NuSAP是一种组织特异性的微管结合蛋白,可能在造血/免疫组织中发挥重要功能,研究结果对肿瘤、免疫等疾病的防治具有一定的科学意义。     

肝再生调控研究

肝脏是机体重要的器官之一，至少承担着５０００种以上的生理功能是其损伤后具有惊人的组织修复与代偿性增生能力即肝再生能力。正常状态下，人肝细胞的平均寿命为２００天以上，每数万个肝细胞才见到一个核分裂，９９．９％以上的肝细胞处于非增殖状态即Ｇ０期。但当肝脏受到损伤时，多数细胞迅速进入增殖状态，损伤的肝组织在短时间即可由再生肝代偿。这一过程主要表现为肝实质细胞、间质细胞及细胞外基质的增生     

细胞凋亡抑制基因Bcl－2对NIH3T3细胞增殖及辐射敏感性的影响

以含Ｂｃｌ－２的重组逆转录病毒转染包装细胞系ＰＡ３１７，经Ｇ４１８抗性筛选，获得单克隆细胞，扩增并收集培养上清感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，进而完成Ｂｃｌ－２基因向ＮＩＨ３Ｔ３细胞的导入。后者软琼脂集落形成率与细胞增殖速率均高于对照组，而辐射敏感性低于对照组。表明Ｂｃｌ－２基因对ＮＩＨ３Ｔ３细胞的增殖和辐射敏感性均具有一定的影响。     

人肝再生增强因子的cDNA克隆、高效表达及生物学活性研究

人肝再生增强因子的ｃＤＮＡ克隆、高效表达及生物学活性研究１００８５０北京军事医学科学院放射医学研究所杨晓明，谢铃，贺福初，宫锋，何浩，邱兆华，吴祖泽关键词细胞活性因子；肝疾病中国图书资料分类号Ｑ２６人胎肝组织中存在一种热稳定性、特异性促进肝细胞增殖的...     

人乳腺癌肿瘤移植裸鼠模型的构建及其肿瘤浸润髓系细胞的分离

目的：人乳腺癌肿瘤移植裸鼠模型的构建及其肿瘤浸润髓系细胞的分离。方法将pHAGE-EF-ZsG-DEST质粒与病毒包装质粒pMD2．G和psPAX2首先通过磷酸钙转染方式包装带绿色荧光的慢病毒,再利用包装好的慢病毒感染BT474细胞,通过流式分选筛选阳性细胞,扩大培养后,种植于裸鼠乳腺脂肪垫,应用活体荧光成像仪和体外测量肿瘤大小,对人－裸鼠肿瘤移植模型的构建效果进行评价;通过机械法分离该小鼠模型的肿瘤浸润髓系细胞。结果筛选出带绿色荧光的BT474稳定株,种植于裸鼠乳腺脂肪垫,构建了人－裸鼠肿瘤移植模型,并分离出其肿瘤浸润髓系细胞。结论成功分离出了肿瘤浸润髓系细胞,为后续研究肿瘤浸润髓系细胞的功能奠定了基础。