慢性华支睾吸虫感染对脂多糖刺激巨噬细胞反应的影响

 目的：了解慢性华支睾吸虫（Cs）感染的免疫状态及其对巨噬细胞表型和炎症反应的影响。方法：选择Sprague-Dawley雄性大鼠,按随机数字表法分组进行2部分实验。(1) 经口华支睾吸虫虫卵灌胃感染70 d建立慢性Cs感染模型,分为正常对照组和慢性Cs感染组,每组10只,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清白细胞介素 4（IL-4)、IL-10、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和干扰素γ（IFN-γ）水平,腹腔灌洗获取巨噬细胞,流式细胞术检测腹腔巨噬细胞亚型;(2)腹腔灌洗获取巨噬细胞,按照腹腔巨噬细胞的来源,分为空白对照组、正常组和慢性Cs感染组,以脂多糖（LPS,10 μg/L）刺激孵育,用ELISA法动态监测LPS刺激后0、2、12和24 h细胞培养上清液的TNF-α和IL-10的变化。结果：(1) 慢性Cs感染组大鼠血清促炎因子TNF-α［(77.64±3.25) ng/L］和IFN-γ［(212.69±12.60)  ng/L］水平较正常组TNF-α［(55.13±3.25) ng/L］和IFN-γ［(108.15±10.49)  ng/L］升高（均P＜0.05）,而抗炎因子IL-4［(248.24±8.99) ng/L］和IL-10［(223.56±5.60) ng/L］水平较正常组血清IL-4［(52.40±3.97) ng/L］和IL-10［(60.18±5.36) ng/L］也显著升高（均P＜0.01）,并可使腹腔巨噬细胞向替代活化型（M2型）巨噬细胞分化;(2) 2组腹腔巨噬细胞培养上清液TNF-α水平在LPS刺激后2 h即开始上升,至24 h达到高峰,慢性Cs感染组巨噬细胞在LPS刺激后2、12和24 h上清液的TNF-α水平均显著低于正常大鼠组［2 h： （88.20±1.91） ng/L vs（123.45±2.98） ng/L;12 h：（123.66±4.31） ng/L vs（161.11±7.38） ng/L;24 h：（154.52±4.83） ng/L vs（227.85±10.67） ng/L,均P＜0.05］,而IL-10的水平较正常组升高［2 h：（105.46±12.28） ng/L vs（80.86±2.28） ng/L;12 h：（194.19±8.62） ng/L vs（117.56±8.02） ng/L;24 h：（280.02±11.31） ng/L vs（168.14±8.97） ng/L,均P＜0.05］。结论：慢性Cs感染时宿主血清的促炎因子升高,而抗炎因子升高得更明显,使巨噬细胞向M2型极化;体外实验表明慢性Cs感染宿主的巨噬细胞对LPS刺激产生耐受。     

阿利吉仑通过调控线粒体介导的凋亡通路改善心肌缺血再灌注损伤

目的通过体外构建心肌细胞缺氧复氧模型(H/R)模拟体内心肌细胞缺血再灌注,验证阿利吉仑(Aliskiren)对于改善心肌细胞缺血再灌注的药物效果,同时探究细胞凋亡在其中的机制。方法将细胞实验分为四组:正常氧供应组即对照组(Control)、缺氧复氧组(H/R)、阿利吉仑+缺氧复氧组(阿利吉仑+H/R)、NF-κB P65特异抑制剂+缺氧复氧组(bay11-7082+H/R)。使用CCK-8检测不同浓度阿利吉仑处理的心肌细胞存活率,ELISA检测各实验组炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平。Hoechst33258染色、Annexin V/PI双染流式细胞仪检测各组心肌细胞凋亡比例,JC-1试剂盒测量线粒体膜电位及心肌细胞ATP含量。同时采用Caspase-3试剂盒检测各组心肌细胞凋亡蛋白酶的活性。结果阿利吉仑小于20 mmol/L时,与心肌细胞活性存在正相关关系,而在20 mmol/L和80 mmol/L之间,两者之间存在负相关关系,文章中阿利吉仑的最佳处理浓度是20 mmol/L,此时的心肌细胞活性最高(76.40%±1.64%)。相比H/R组,阿利吉仑能降低TNF-α和IL-6水平[(129.33±5.86) ng/L比(319.00±4.58) ng/L,P0.05;(29.67±1.53) ng/L比(64.67±2.08) ng/L,P0.05],同时显著降低心肌细胞的凋亡率[(7.23%±1.14%)比(32.25%±3.15%),P0.05],并具有降低能量代谢障碍心肌细胞所占比例[(6.9%±1.6%)比(13.5%±1.7%),P0.05]、稳定线粒体膜电位的功能[(3.90±0.60)比(1.80±0.16),P0.05]。另外,抑制凋亡蛋白酶Caspase-3的活性[(2.26±0.35)比(3.26±0.62),P0.05],且阿利吉仑+H/R组与bay11-7082+H/R组的各项实验结果无统计学差异。结论阿利吉仑可以通过抑制炎症反应、调控线粒体受体介导的凋亡,改善缺血心肌细胞缺血再灌注损伤,且阿利吉仑的调控凋亡作用可能与NF-κB表达抑制有关。     

多器官功能障碍综合征患者高级氧化蛋白产物的表达及其临床意义

目的 探讨高级氧化蛋白产物(AOPP)在多器官功能障碍综合征(MODS)发病中的作用及临床意义.方法 选择全身炎症反应综合征(SIRS)和MODS患者各90例.采用分光光度计法测定患者静脉血中C-反应蛋白(CRP)和AOPP的浓度;同时对MODS患者进行急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅲ(APACHE Ⅲ)评分,追踪患者1个月内的生存或死亡情况;分析CRP和AOPP浓度与器官功能障碍程度和病情转归的关系.以同期90例与患者年龄、性别相匹配的健康体检者作为健康对照组.结果 MODS组患者血CRP[(22.22±4.32)mg/L3和AOPP[(130.66±18.08)μmol/L]浓度均显著高于健康对照组[(2.38±0.89)mg/L和(33.20±5.32)μmol/L3和SIRS组[(5.32±1.22)mg/L和(48.58±6.03)μmol/L],差异均有统计学意义(P均<0.05),健康对照组与SIRS组间差异无统计学意义.MODS组中死亡患者(47例)血CRP和AOPP浓度显著高于存活患者(43例,P均<0.05);MODS患者血CRP、AOPP浓度与APACHE Ⅲ评分E(98.66±20.87)分]均呈高度正相关(rl=0.469,r2=0.528,P均<0.01).血CRP、AOPP浓度随衰竭器官数增加而明显升高(P均<0.05),AOPP浓度与CRP呈高度正相关(r=0.448,P<0.01).结论 AOPP可能参与了MODS的发病过程,AOPP浓度异常增高反映MODS患者体内存在严重氧化应激状态,可作为判断MODS患者器官功能障碍程度和预后的重要指标.     

不同左心室射血分数老年充血性心力衰竭患者药物治疗的临床研究

目的 探讨充血性心力衰竭（心衰）患者的临床特征和药物治疗情况以及不同左心室射血分数（LVEF）心衰患者的并发症与药物治疗情况.方法 连续调查2001年1月-2002年1月香港大学玛丽医院收住60岁以上的老年充血性心衰患者,符合ICD-9 CM诊断标准,并用弗明翰研究标准确诊,共计1 074例次,收集入院时及入院3 d内的超声心动图、心电图、X线胸片等检查结果以及患者出院时转归、出院带药情况.结果 ①女性充血性心衰患者几乎为男性患者的2倍,年龄≥65岁者占95.5%,≥80岁者占50.6%,按美国纽约心脏协会（NYHA）心功能分级,Ⅲ和Ⅳ级占70.2%, 521例（占48.5%）入院治疗1次.②充血性心衰的主要并发症为糖尿病和高血压.③399例次行超声心动图检查者中,208例次（占52.1%）LVEF〈0.50,191例次（占47.9%）LVEF≥0.50的患者更倾向于女性,年龄≥80岁,而冠心病及糖尿病较少发生,心房颤动84例次（占44.0%）占多数（P〈0.05）.糖尿病、完全性左束支传导阻滞及心肌梗死病史常伴随LVEF〈0.50的患者（P〈0.05）.④大部分患者均接受利尿剂治疗,LVEF〈0.50的患者中使用血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）131例次（占63.0%）,地高辛47例次（占22.6%）,β-受体阻滞剂25例次（占12.0%）,钙阻滞剂29例次（占13.9%）,而LVEF≥0.50的患者分别有119例次（62.3%）、67例次（35.1%）、18例次（占9.4%）和35例次（占18.3%）使用上述药物,地高辛多用在LVEF≥0.50的患者（P〈0.05）.结论 ①LVEF〈0.50与≥0.50的充血性心衰患者单从临床症状和体征上较难区别,目前强调对每个心衰患者尽可能进行早期超声心动图检查,这是区别两类心衰的重要手段.②ACEI、β-受体阻滞剂的使用与治疗指南还有一定距离.③尽早地区分LVEF〈0.50与≥0.50充血性心衰患者将有利于抗心衰治疗.     

心房颤动对慢性心力衰竭伴左室射血分数≥0.50患者预后的临床研究

目的 探讨左室射血分数(LVEF)≥0.50的住院慢性心力衰竭(心衰)患者中心房颤动(房颤)的发生和分布类型,及房颤对此类心衰预后的影响.方法 调查患者417例次,按LVEF＜0.50与≥0.50分为两组,根据患者入院前是否有房颤病史分为阵发性房颤、持续性房颤及入院后新发房颤.随后观察并记录严重恶性事件发生情况及因慢性心衰而再人院次数及每两次住院的间隔时间.结果 LVEF＜0.50的慢性心衰更多见于男性,一年内心肌梗死的发病率较LVEF≥0.50者高[15.6%(34/218)比8.0%(16/199),P<0.01],且房颤使得患者脑卒中发生率较不伴房颤者明显增高(24.3%(27/111)比8.4%(9/107),P＜0.05),急性冠脉综合征、心血管死亡事件例数及死亡数也高于不伴房颤者;在LVEF≥0.50的慢性心衰患者中新发房颤数量较LVEF＜0.50者明显增多(51比30,P＜0.05),房颤可见伴发在近2/3的患者中,且再入院次数较不伴房颤者增加[(2.78±1.79)次比(2.00±1.35)次,P＜0.01],前两次入院间隔时间亦较不伴房颤者缩短[(117±107)d比(154±130)d,P＜0.05].结论 房颤更易发生在LVEF≥0.50的慢性心衰患者,导致更短的再入院间隔,强调治疗和管理这类房颤的重要性.     

肌钙蛋白cTnT进行性升高——误诊心肌淀粉样变一例

1 病历介绍 患者,男,54岁,因"鼻衄、关节痛半月余,咳嗽气促10余天"于2011-05-27就诊于中山大学附属第一医院急诊科.患者于半个多月前无明显诱因出现鼻衄、四肢关节痛,于当地医院就诊,检测血肌酐783 μmol/L、BUN 47.4mmoL/L,在当地行多次血液透析治疗.10余天前无明显诱因出现咳嗽,伴气喘,当地医院行胸部CT提示:双肺散在片状影,考虑肺水肿或炎症;右肺下叶散在大小不一病灶,考虑肺结核可能性大,不能排除癌变,建议活检;气管右前方淋巴结肿大.因当地医院无法行肺活检,遂转到中山大学附属第一医院急诊,就诊过程中反复出现呼吸困难加重、端坐呼吸,且心梗组合检查提示肌钙蛋白呈持续升高趋势,不排除急性非ST段抬高型心肌梗死,并有急性左心衰,予抗心衰等对症处理后症状有所缓解,拟诊"气促查因"收入院作进一步诊治.既往患有"高血压病"2年,未系统监测血压及规则服用药物治疗,否认糖尿病、冠心病,否认肝炎、结核等传染病史,否认食物、药物过敏史.否认家族遗传病史.     

大肠癌检出率及患者心理健康调查分析

目的了解大肠癌患病率及年龄、性别分布和其心理健康情况,为实施针对性预防措施及心理干预提供参考。方法分析2007～2008年2 000例因肠道疾病行电子结肠镜检查结果及经病理检查确诊为大肠癌患者性别、年龄分布特点,采用症状自评量表(SCL-90)测评其心理健康状况。结果 2 000例中,确诊为大肠癌126例(6.30%),男女检出率分别为7.76%、4.90%,男女比例为1.52∶1;41～50岁组和>70岁组男性大肠癌的检出率显著高于同年龄段女性(均P<0.05);男性强迫症因子得分显著高于女性,女性抑郁因子得分显著高于男性(均P<0.05)。结论对40岁以上有肠道症状的人群,尤其是男性患者应加强大肠癌的一级预防;对不同性别的大肠癌患者心理干预应有侧重性,以降低大肠癌发生率。     

亚低温对兔心肺复苏后凝血及脑微循环的影响

目的 探讨亚低温治疗对兔心肺复苏后凝血异常及脑微循环血流变化的干预作用.方法 本实验在中山大学卫生部辅助循环重点实验室进行.24只成年新西兰大白兔随机(随机数字法)分为常温(normothermic,NT)治疗组和亚低温治疗(therapeutic hypothermia,TH)组,每组12只,采用交流电致颤的方式建立心肺复苏(CPR)模型,自主循环恢复后(ROSC)NT组动物置于室温下观察12 h,TH组动物采用体表降温的方法诱导亚低温,达到目标温度后维持12 h.所有动物CPR前及ROSC后4,8,12 h分别测定PT,APTT,INR,D-D,血小板计数(BPC);测定抗凝血酶Ⅲ活性(AT-Ⅲ)和血浆蛋白C活性(PC);用PERIMED Multichannel Laser Doppler系统监测大脑皮层微循环血流.各组数据依据正态检验结果用单因素方差分析或秩和检验,多重比较用LSD-t检验,两样本均数的比较用成组t检验,相关性采用Pearson相关性分析,以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 NT组动物ROSC后PT,APTT,INR逐渐缩短的趋势,ROSC后12 h APTT明显短于基础值(P=0.025),而AT-Ⅲ和PC活性显著下降.和NT组相比,TH组PT,APTT,INR值显著增大,差异具有统计学意义;但AT-Ⅲ,PC活性、D-D浓度,两组差异无统计学意义.CPR前、ROSC后4,8和12 h NT组大脑皮层血流分别(401.60±11.76),(258.86±34.58),(317.59±23.36)和(371.98±5.79)mL/min,TH组为398.18±12.91.336.19±19.27,347.76±13.80和383.78±3.29 mL/min.ROSC后各时间点TH组大脑皮层血流量明显高于NT组(4 h:t=-6.025,df=16,P=0.000;8 h:t=-2.942,df=12,P=0.012;12 h:t=-3.959,df=8,P=0.004).Pearson相关分析显示ROSC后大脑皮层血流和APTT正相关(4 h:R=0.503,P=0.033;8 h:R=0.565,P=0.035;12 h:R=0.774,P=0.009),与其他凝血指标无关.结论 ROSC后亚低温治疗使凝血功能下降的同时伴随脑微循环血流的增加,CPR后亚低温治疗对ROSC后凝血失衡的影响可能是其发挥脑保护作用的机制之一.

Abstract：

Objective To study the effects of mild hypothermia (MH) on blood coagulation and cerebral microcirculation in rabbits after cardiopulmonary resuscitation (CPR). Method A total of 24 New Zealand rabbits were randomly (random number) divided equally into normothermic group (NT) and MH group. CPR model was established by ventricular fibrillation induced by using alternating current. The rabbits of NT group were observed for 12 h in room temperature after restoration of spontaneous circulation (ROSC). The mild hypothermia was induced in the rabbits of group MH by surface cooling after ROSC, and maintained for 12 h after the aimed low temperature reached. The PT (prothrombin time), APTT (activated partial thromboplastin time), INR (international normalized ratio of prothrombin), D-dimmer (DD) , blood platelet count (BPC) , anti-thrombin Ⅲ activity (AT-Ⅲ) and protein C activity (PC) were measured before CPR and 4 h, 8 h and 12 h after ROSC, and at the same time the cerebral microcirculation was measured by using PERIMED Multichannel Laser Doppler system. One-way ANOVA or Mann-Whitney rank was used to determine the statistical significance between two groups. LSD-t test was used for multiple comparisons,t test for comparisons of means between two independent samples, and Pearson correlation test for correlation analysis. Results The PT, APTT and INR showed a trend of gradually shortening during the course. The APTT in 12 h after ROSC was significantly shorter than that before CPR (23.32 ±5.19 vs. 29.53 ±5.10,P = 0.025), and the activity of AT- Ⅲ and PC were decreased significantly. Compared with the group NT,the PT, APTT and INR in group MH were increased significantly, while there were no differences in the activity of AT- Ⅲ, PC and D-D between two groups. The rates of cerebral microcirculation in group NT before CPR and 4 h, 8 h and 12 h after ROSC were 401.60 ± 11.76 mL/min, 258.86 ± 34. 58 mL/min,317.59 ± 23.36 mL/min and 371.98 ± 5.79 mL/min, respectively, and those in group MT were 398.18 ±12.91 mL/min, 336.19 ± 19.27 mL/min, 347.76 ± 13.80 mL/min and 383.78 ± 3.29 mL/min, respectively. There were significant differences between two groups at each interval after ROSC (4 h: t = - 6.025,df=16, P=0.000;8 h: t= -2.942, df=12, P=0.012;12 h: t= -3.959, df=8, P=0.004). The Pearson correlation test showed that the rate of cerebral microcirculation was positive correlated with APTT after ROSC (4 h:R =0.503,P=0.033;8 h:R=0. 565,P=0. 035;12 h:R=0. 774,P=0. 009), and was not correlated with the other blood coagulants. Conclusions The mild hypothermia led to the inhibition of blood coagulation and improved the cerebral microcirculation concomitantly, which may be one of the mechanism of cerebral protection.     

改良TBL结合模拟教学在医学生早期临床思维教学中的应用

目的 探讨改良以团队为基础的教学(team-based learning,TBL)结合模拟教学的方法对低年级医学生早期临床思维能力培养的效果.方法 采用对照试验的方法,选择2020年秋季学期40名选课医学生为试验组,采用改良TBL结合模拟教学的方法,以2017年秋季和2018年秋季两学期选课的各40名医学生分别为对照组...