莱姆病螺旋体优势抗原BmpA分子克隆、高效表达与亚细胞地位

目的以伯氏疏螺旋体标准株B31株基因组DNA为模板,PCR扩增bmpA全基因序列,定向克隆和高效表达重组BmpA并纯化。方法 1)以伯氏疏螺旋体标准株B31株基因组DNA为模板,设计定向克隆引物,PCR扩增bmpA全基因序列,定向克隆入表达载体pGEX-6p-1,酶切鉴定后转化大肠埃希菌BL21菌株,获得bmpA重组菌;2)从重组菌培养温度,诱导时间,诱导剂的剂量,菌密度(A600)等方面优化诱导条件,确定高效表达重组BmpA的最佳方案;3)用GSH柱纯化重组BmpA,探索纯化BmpA的最佳条件。结果 1)在基因水平和蛋白水平上均得到目的条带和目标峰,确定表达载体bmpA-pGEX-6p-1构建成功并表达重组BmpA;2)重组质粒在37℃,IPTG诱导浓度为0.1mmol/L,诱导时间为6h,菌液的A600值为0.5～1.0以及在LB培养基上培养GST-bmpA融合蛋白表达量达到最大;3)在最佳表达条件下1L重组菌能得到2.9～3.1mg纯化BmpA蛋白。结论成功构建了表达重组蛋白BmpA的大肠埃希菌原核表达系统,确定了高效表达重组BmpA的最佳方案,并证明用GSH柱纯化重组BmpA效果较好。     

中药马蹄香散剂和5种治疗胃肠病药物中微量元素含量的测定和比较

目的:深入认识马蹄香治疗病毒性肠炎的有效成分和作用机制。方法:本研究应用日本岛津公司ICPS-1000Ⅱ型等离子体发射光谱仪测定了马蹄香散剂和5种治疗胃肠病药物中微量元素含量。结果:发现在马蹄香中常量元素的量CaMgSP,微量元素的量AlFeMnZnSrCuCr。在不同药中微量元素Fe的量:蒙脱石散盐酸小檗碱片马蹄香其他;Cu的量:马蹄香盐酸小檗碱片参苓健脾胃颗粒其他;Zn的量:复方谷氨酰胺马蹄香盐酸小檗碱片其他;Mn的量:蒙脱石散马蹄香复方谷氨酰胺其他;P的量:马蹄香复方谷氨酰胺参苓健脾胃颗粒其他;Al的量:蒙脱石散马蹄香参苓健脾胃颗粒其他;S的量:马蹄香复方谷氨酰胺蒙脱石散其他;Cr仅在盐酸小檗碱片中测出。结论:马蹄香散剂中常量元素Ca、Mg、S、P及微量元素Al、Fe、Mn、Zn、Sr和Cu的含量均较高,这些元素的含量与马蹄香治疗病毒性肠炎的有效性即促进受损肠粘膜的修复可能有相关性。     

天然植物药物IHA-01体外对微管聚合影响作用的研究

目的研究天然植物药物IHA-01对猪脑微管蛋白的影响,探讨其可能的抗肿瘤机制。方法通过在体外对温度进行两次循环调控,应用超速离心机从新鲜猪脑中提取纯化出微管蛋白,体外建立微管蛋白亚单位聚合-解聚平衡系统,在此平衡系统中通过测量其吸光度值的变化来检测药物对微管的作用。结果 IHA-01抑制微管蛋白亚单位聚合过程中吸光光度值升高。结论抑制微管蛋白聚合可能是天然植物药物IHA-01抗癌机制之一。     

角色互换教学法在内科学教学过程中的应用

目的 探讨在内科学教学过程中应用角色互换教学法的教学效果。方法 在同一班级的不同章节，分别采用传统授课教学法、角色互换教学法，用课前课后随堂测验和问卷调查的方式进行评价。结果 和传统授课法相比，课前、课后测试成绩的平均分相比，观察组高于对照组，差异有显著性(P<0.05);观察组的课前、课后≥80分的人数高于对照组，但差异无显著性(P>0.05);各小组间授课效果差异无显著性；课后有78.1%的学生愿意继续选择互动教学方式。结论 角色互换教学法可以达到和超过传统教学方式的教学效果；在内科学教学中具有明显优势，为医学教学改革提供新的思路，但在教学设计中要做好合理的时间规划。