综合设计性实验教学法在《环境卫生学》实验教学中的应用

《环境卫生学》为医学与环境两门学科的交叉学科,讲述健康与环境之间的关系,去认识和解决相关科学问题,以培养预防专业本科生解决实际问题的能力为主要教学目标,实验教学是整个教学过程的关键环节.本研究在《环境卫生学》原有实验教学体系基础上,引入综合设计性实验教学模式,探索如何进行科学有效的引导式实验教学,从而培养学生独立思考和...     

透皮淋巴靶向长春新碱传递体

长春新碱(vincristine,VCR)临床主要用于治疗急性淋巴细胞白血病、何杰金及非何杰金淋巴瘤，疗效确切，但由于具有较大的神经系统毒性和局部刺激性，限制了其在临床上的应用。为增加VCR的淋巴靶向性，以增强疗效，降低其毒副作用，采用薄膜-超声分散法制备长春新碱传递体(VCR-T)，并考察其制剂学性质、药代动力学特征及靶向性。所制备的VCR-T平均粒径为63 nm，包封率为59%；改良Franz扩散池研究发现其体外透皮过程符合多项式方程，12 h累积透皮百分率为67.4%；HPLC法测定VCR在大鼠体内的药代动力学及组织分布，以VCR注射液为对照，VCR-T使VCR在血液中滞留时间延长了12倍，大鼠淋巴中靶向指数增加了2.75倍。传递体可良好地载带VCR透过皮肤进入体循环，具有较好的淋巴靶向性，可作为新型的淋巴靶向给药系统。     

西藏林芝地区肾综合征出血热自然疫源地血清流行病学调查

目的：查明西藏林芝地区是否存在肾综合征出血热（HFRS）自然疫源地。方法：选择有疫情报告地区,进行人间疫情调查;健康人群特异性抗体检测;在山地针,阔叶混合林及山间平原的农田和居民区,用夹夜法调查小兽数量;采集捕获动物肺,血和牛,羊血清标本,检测汉坦病毒感染情况,血标本用金标免疫斑点渗滤试验和间接免疫荧光法检测抗体;动物肺的冷冻切片用免疫荧光法检测汉坦病毒抗原。结果：在西藏自然区防疫站疫情资料中,有该病记载的1976年工布江达县1例,1980年林芝县9例,检测林芝地区医院住院者18人,西藏高考学生357人和其他体检人员117人血标本,仅从2名林芝县,2名工布江达县,1名察隅县的高考学生和1名住院产妇中检出抗汉坦病毒总体抗和IgG荧光抗体,被检人群隐性感染率为1．22％,检测中华姬鼠等脊椎动物肺115只,汉坦病毒抗原阳性的中华鼠1只,带病毒率0．87％,动物血抗汉坦病毒总体和IgG荧光抗体皆阳性的有中华姬鼠5只,高山田鼠1只,抗体阳性为5．22％,检测扣,羊310只血清,其中黄牛抗汉坦坦病毒总抗体阳性率0．85％（1／118）,绵羊总抗体和IgG抗体阳性率1．68％（3／179）,结论：西藏林芝地区有HFRS散发病例,健康人群,中华姬鼠,高山田鼠,黄牛和绵羊中有汉坦病毒感染,证实了林芝县山地针,阔叶混合林及山间平原地带和工布江达县境域内存在着HFRS自然疫源地。     

生物制剂在风湿免疫病中的治疗药物监测进展

生物制剂在风湿免疫病中应用广泛,表现出非线性药动学特征,且血药浓度在个体内和个体间呈较高的变异。治疗药物监测(TDM)可通过检测生物制剂的血药浓度和抗药物抗体指导用药方案的制定和调整,但因缺少指导性文件尚未常规开展TDM。本文从风湿免疫病治疗领域生物制剂的现状、药动学特点、TDM的常用生物分析方法及生物制剂开展TDM的临床研究等方面概述最新的研究进展,以期为生物制剂的个体化用药提供参考和借鉴。     

TUN和MCAF在治疗Miller Ⅰ/Ⅱ类牙龈退缩中的临床疗效及术后美观对比

目的 评估冠向复位瓣术和隧道瓣术结合上皮下结缔组织移植物在治疗Miller Ⅰ/Ⅱ类牙龈退缩治疗中的临床效果及术后美观对比。方法 选择符合Miller Ⅰ/Ⅱ类牙龈退缩诊断标准的10例患者,随机分为试验组 (TUN+ CTG)和对照组(MCAF+CTG),其中5例11颗患牙纳入试验组,5例11颗牙纳入对照组。在术前 (基线)及术后6月测量并记录牙龈退缩的量、牙周探诊深度、角化龈宽度及患者主观评价和根面覆盖美观评分等指标。结果 两组间术前PD、RD、KTW无统计学差异(P>0.05),两组术后6个月RD和KTW较术前均有所改善(P<0.05);两组间术后PD、RD无统计学差异(P>0.05),但CRC实验组(95.2%)略大于对照组的(92.5%)。患者术后2周TUN组疼痛VAS(2.36±0.81)略大于MCAF组(2.0±0.63),而日常活动影响TUN组VAS(2.91±0.7)小于MCAF组(3.36±0.81);术后6个月RES评分两组无统计学差异。结论 TUN和MCAF 对改善Miller Ⅰ/Ⅱ类牙龈退缩均有较好临床效果,美学效果较好,且TUN+CT...     

视神经肿瘤的MRI诊断

目的:探讨视神经肿瘤的MRI表现。方法:回顾了18例经MRI检查并经临床病理确诊的视神经肿瘤的病例。结果:视神经脑膜瘤8例,表现为视神经增粗1例,梭形肿块5例,软组织肿块2例。MR T1WI呈等或稍低信号,T2WI呈高信号。视神经胶质瘤6例,表现为视神经梭形增粗2例,椭圆形肿块4例,MR T1WI呈等信号,T2WI呈高信号。视神经转移瘤4例,3例为视网膜母细胞瘤累及视神经,MRI表现为眼球内病变侵犯视神经和视交叉,T1WI呈稍低信号,T2WI呈稍高信号;1例为乳腺癌转移至视神经,MRI表现为视神经椭圆形增粗,T1WI呈等信号,T2WI呈高低混杂信号。结论:MRI是检查和诊断视神经肿瘤的重要检查手段,对大多数病变可做出明确诊断。     

稳定表达EGFP-LC3蛋白SH-SY5Y细胞系的构建

目的:建立稳定表达微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)与绿色荧光蛋白(EGFP)形成的融合蛋白(EGFP-LC3)的人神经母细胞瘤株SH-SY5 Y细胞系,验证EGFP-LC3点状聚集物能够实时直观地反映自噬小体和自噬流.方法:以人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)的cDNA为模板,克隆LC3,并连接EGFP绿色荧光蛋白.将EGFP-LC3连接入慢病毒载体GV348中,构建慢病毒表达载体EGFP-LC3-GV348.慢病毒转染人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5 Y细胞),使用3μg/mL嘌呤霉素筛选并处理细胞1月,筛选得到EGFP-LC3稳转系.诱导自噬后,用共聚焦显微镜观察LC3荧光斑点并定量分析.Western blot检测目的蛋白表达情况.结果:经酶切证实,EGFP-LC3-GV348慢病毒表达载体构建正确.在激光共聚焦显微镜下,可以观察到细胞内的绿色荧光EGFP代表的自噬小体,活体染料LysoTracker Red DND-99将溶酶体染成红色荧光,红色荧光与绿色荧光重叠代表自噬溶酶体.无血清诱导自噬后,自噬小体(绿色荧光斑点)明显增加,差异有统计学意义(P<0.001).Western Blot免疫印迹可见EGFP-LC3融合蛋白表达条带.结论:成功构建了稳定表达EGFP-LC3的SH-SY5 Y细胞系,EGFP-LC3荧光斑点可以直观实时反映自噬囊泡,为进一步探讨神经退行性疾病的自噬机制提供了实验基础.     

绝经后2型糖尿病患者LDL/HDL比值与骨强度以及骨折风险的相关性研究

目的探讨LDL/HDL比值与绝经后女性2型糖尿病患者骨强度以及骨折风险的相关性。方法选取2014年1月至2018年1月在我院内分泌科就诊的女性2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者226例,其中113例已绝经,将患者分为未绝经组与已绝经组。运用超声骨密度仪(QUS)分别测量受试者的骨强度指数(stiffness index,SI),同时收集患者一般资料如年龄、体质量指数(bone mass index,BMI)、糖尿病病程等,测定血脂、糖化血红蛋白、骨钙素(BGP)、血清Ⅰ型原胶原N-端前肽(PINP)、血清1型胶原交联β-C-末端肽(β-CTX),并计算TC/HDL比值(THR)、LDL/HDL比值(LHR)。采用骨折风险预测工具模型(FRAX)计算患者10年任何重要部位骨质疏松性骨折(PMOF)、髋部骨折(PHF)概率。采用线性回归分析不同血脂指标与SI相关性,进一步评估LHR与骨代谢、PMOF和PHF等的相关关系。结果 (1)与未绝经组相比,已绝经组SI[(79. 96±11. 35) VS (92. 50±15. 95),P0. 001)]、BGP[(13. 47±4. 11) VS (21. 00±10. 90),P=0. 039)]、PINP [(34. 59±16. 16) VS (56. 70±37. 33),P=0. 016]降低,β-CTX[(590. 71±263. 24) VS (423. 07±198. 04),P=0. 021]、LHR[(2. 16±0. 76)VS (1. 89±0. 81),P=0. 040)]、PMOF[(3. 67±1. 28) VS (1. 50±0. 14),P=0. 009]、PHF[(1. 44±0. 61) VS (0. 65±0. 12),P=0. 005]升高,差异有统计学意义;(2) Pearson相关性分析结果提示SI与PMOF、PHF呈负相关(β=-0. 749;β=-0. 681,P均0. 001);(3)分别校正年龄与BMI(β=-0. 245,P=0. 006),Hba1c与病程(β=-0. 240,P=0. 009),年龄、BMI、Hba1c、病程和肌酐(β=-0. 248,P=0. 005),绝经后2型糖尿病患者LHR与SI均有显著负相关;(4) LHR与PMOF、PHF、β-CTX呈正相关(β=0. 336;β=0. 319;β=277,P均0. 05),与BGP、PINP呈负相关(β=-0. 310;β=-0. 298,P均0. 05)。结论绝经后2型糖尿病患者LHR与SI、FRAX骨折风险评分以及骨代谢指标相关,高LHR可能引起SI下降、骨折风险增高,其机制可能与成骨减少、破骨增加有关。     

广东菲牛蛭中有效抗凝物质的分离纯化

目的从广东菲牛蛭鲜体中分离纯化有效抗凝物质,并对其生化性质进行测定。方法用水提醇沉、离子交换、反相层析法等分离纯化广东菲牛蛭中的抗凝物质,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其蛋白的分子质量,并运用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS／MS）进行分析。结果从广东菲牛蛭中分离出得到一种电泳纯的活性多肽,其相对分子质量为19．2kDa。所得菲牛蛭抗凝活性多肽每克蛋白所含单位抗凝活性≥2548000ATU,活性回收率约为53％。结论从广东菲牛蛭鲜体中分离出的活性抗凝多肽对凝血酶具有极强的抑制作用,开发应用前景广阔。     

肾移植术后上尿路结石个体化治疗策略

目的:探讨肾移植术后移植肾上尿路结石的个体化治疗策略。方法:回顾性分析2003年12月～2017年9月于我院泌尿与碎石中心治疗肾移植后移植肾上尿路结石10例患者的临床资料。其中男6例,女4例,平均年龄(42.1±8.6)岁。6例移植肾及输尿管上段结石,4例移植肾输尿管中下段结石。单发结石4例,多发结石6例,平均结石负荷(1.0±0.6)cm。所有患者均有不同程度肾积水,8例肾功能异常,4例尿路感染。结果:6例移植肾及输尿管上段结石患者中,1例行体外冲击波碎石(ESWL)成功;5例行经皮肾镜取石术(PCNL)成功。4例移植肾输尿管中下段结石患者,1例输尿管支架更换术中膀胱镜下活检钳取石成功;1例输尿管镜取石术(URS)成功;1例URS失败改PCNL成功;1例URS和PCNL处理结石均失败,留置造瘘、透析治疗。所有患者术后肾积水得到缓解,肾功能恢复,感染得到纠正。无患者出现术后发热。3例患者接受输血治疗。结论:肾移植结石患者情况特殊且病情相对复杂,术者应根据患者具体情况决定个体化的治疗策略,从处理结石的多种方法中选择最适合患者的手术方式和治疗方案。虽然清除结石是重要治疗目标,但应充分考虑患者身体耐受程度,不可盲目追求结石的清除效果。