抗肿瘤药物体外诱导新鲜癌组织及其外周血淋巴细胞mdr-1基因表达的相关性研究

目的: 通过对恶性肿瘤患者的癌组织细胞及其外周血淋巴细胞进行抗肿瘤药物的体外诱导,用RT-PCR法检测其mdr-1基因表达状况,从而找出两者之间的相关性,从基因水平解决非手术癌患者化疗用药个体化.方法:在采集手术标本的同时抽取该患者外周血,用8种抗肿瘤药物进行体外诱导,RT-PCR法检测32例恶性肿瘤患者癌组织细胞及其外周血淋巴细胞的mdr-1基因表达状况.利用SAS软件计算两者之间的相关关系.结果:32例恶性肿瘤患者的新鲜癌组织细胞与其外周血淋巴细胞的抗肿瘤药物体外诱导mdr-1基因表达呈正相关关系.结论:对于失去手术机会或病灶很小不能取材的患者可以用外周血淋巴细胞替代癌细胞做RT-PCR体外药敏检测.这将从基因水平为肿瘤患者个体化用药提供一个新的途径.     

一例8号染色体三体继发t(9;22)(q34;q11)的急性粒细胞性白血病

患者男,69岁,因乏力、间断皮肤青紫、齿龈出血1个月来院就诊。查体:轻度贫血貌,浅表淋巴结不肿大,胸骨无压痛,腹软,肝脾肋下未扪及。血象:Hb75g/L、白细胞2×109/L、血小板26×109/L。骨髓象:有核细胞增生活跃,原粒73%、早幼粒1%、单核细胞4.5%。POX染色强阳性28%,弱阳性7%,阴性65%,红系明显受抑,巨核细胞数全片0,血小板显著减少。本例按FAB标准诊断为急性粒细胞性白血病(acute myeloidleukemia,AML)-M2a。流式细胞仪检测白血病细胞的表面抗原。采用RHG显带技术进行核型分析,染色体异常按《人类细胞遗传学国际命名体制(ISCN)》描述…     

全反式维甲酸、四硫化四砷、化疗三联方案在急性早幼粒细胞白血病维持治疗中的应用

目的比较全反式维甲酸（ATRA）、四硫化四砷（As4S4）、化疗三联方案与ATRA、化疗二联方案在急性早幼粒细胞白血病（APL）维持治疗中的疗效差异。方法60例APL患者经ATRA诱导分化达完全缓解（CR）后，用联合化疗巩固治疗。随后随机分为两组，三联组30例用ATRA＋As4S4＋化疗维持治疗，二联组30例仅应用ATRA＋化疗维持治疗。分析两种治疗方案的疗效、不良反应及对PML-RARα融合基因转阴的影响。结果三联组3年累计持续完全缓解（CCR）率为90．0％，二联组为63．3％，三联组PML—RARα融合基因转阴率明显高于二联组（分别为90％和63％，P〈0．05）。加用As4S4治疗不良反应未明显加重。结论APLCR患者巩固治疗后应用ATRA＋As4S4加化疗维持治疗，CCR率高，不良反应轻。     

bcr-abl mRNA检测在慢性粒细胞白血病诊治中的意义

 目的　探讨bcr-abl mRNA在慢性粒细胞白血病（CML）诊断、治疗及微小残留病变监测中的意义。方法　采用实时定量聚合酶链反应（real-time PCR）方法检测324例CML患者518份标本的bcr-abl mRNA表达情况。结果　CML慢性期、加速期和急变期患者的bcr-abl mRNA定量结果逐渐增高,分别为12.6 %、25.4 %和57.2 %（P＜0.05）。异基因造血干细胞移植后的bcr-abl mRNA定量结果随时间延长逐渐降低,一般在移植6个月后转阴,服用伊马替尼（商品名：格列卫）与异基因造血干细胞移植病程相似,但融合基因转阴所用时间较长。结论　real-time PCR检测bcr-abl mRNA对于诊断、评价疗效、监测微小残留病变以及预测疾病进展具有重要的临床应用价值。     

造血移植物中CD3~+CD8~(low)和CD3~+CD4~-CD8~(low)细胞亚群的检测及分析

目的检测造血移植物(正常人骨髓、脐血及动员后外周血)中CD3+CD8low和CD3+CD4-CD8low细胞亚群,探讨其促进造血干/祖细胞植入异基因骨髓的功能,以期拓宽脐血移植的应用范围。方法直接三色免疫荧光标记流式细胞术检测。结果CD3+CD8low和CD3+CD4-CD8low细胞亚群占CD3+细胞亚群的比例在骨髓中最高,为(8.61±1.40)%,动员后外周血次之,为(5.11±0.76)%,脐血最低,为(3.31±0.88)%(P<0.01);"初始"T(CD45RA+CD45RO-)细胞亚群占CD8low细胞亚群的比例为脐血(94.26±2.46),骨髓(58.68±7.57),动员后外周血(73.21±3.60),"初始"T占CD8high细胞亚群的比例为脐血(82.63±3.16),骨髓(38.69±3.24),动员后外周血(51.58±4.23),各移植物中"初始"T细胞亚群占CD8low细胞亚群的比例均高于其占CD8high细胞亚群的比例(P<0.01),CD8low细胞亚群中"初始"T与"记忆"T(CD45RA-CD45RO+)细胞亚群的比例均高于二者在CD8high细胞亚群的比例。结论脐血CD8low和CD8lowCD4-细胞占CD3+细胞的比例明显低于骨髓,可能是脐血移植植入延迟的原因之一;"初始T与"记忆"T细胞亚群的比例增高,可能与CD3+CD8low细胞亚群维持和诱导免疫耐受,不引起移植物抗宿主病有关。     

达沙替尼一线治疗费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病四例并文献复习

目的 探讨二代酪氨酸激酶抑制剂（TKI）达沙替尼一线治疗费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病（Ph^＋ALL）的临床疗效.方法 应用达沙替尼一线治疗4例Ph^＋ ALL患者并进行文献复习.结果 4例患者用达沙替尼一线治疗4～6周后均获完全血液学反应（CHR）,其中1例患者已达完全细胞遗传学反应（CCyR）;治疗10～12周后均获完全分子生物学反应（CMR）.1例化疗3个周期未缓解的难治性Ph^＋ALL患者用单药达沙替尼治疗6周后达CHR及部分细胞遗传学反应（PCyR）.4例患者的无进展生存期（PFS）分别为10.5、24.0、8.5、10.0个月.结论 达沙替尼治疗Ph^＋ALL临床疗效显著,可获得深度分子生物学反应,同时耐受性良好,可考虑作为Ph^＋ALL的一线治疗.     

bcr—abl融合基因在慢性粒细胞白血病诊治中的意义

目的探讨定量检测bcr-abl融合基因在慢性粒细胞白血病（CML）诊断、治疗及微小残留病变监测中的意义。方法应用实时定量PCR（RQ—PCR）方法检测145例CML患者bcr—abl融合基因的表达情况。结果abl和bcr-abl的标准曲线相关系数均大于0．99,批内差及批间差均小于4％;11例不同分期的CML患者同时检测外周血和骨髓中bcr—abl水平,8例外周血较骨髓低,3例较骨髓高;急变期的bcr—abl表达情况较加速期和慢性期均明显增高。结论RQ—PCR技术检测bcr—abl融合基因准确可靠,对于评价疗效、监测微小残留病变以及预测疾病进展具有重要的临床应用价值。     

儿童急性髓系白血病M6型转化为M2型一例

患者男,3岁。因“间断发热7d,发现血象异常1d”于2012年2月29日入我院。患者7d前无明显诱因发热,峰值38．3℃,伴阵发性咳嗽,咳少量白痰、食欲缺乏、乏力,按“上呼吸道感染”治疗效果欠佳。既往体健,无血液及其他系统疾病史,无化学毒物及放射性物质接触史,否认家族有类似疾病史。     

间期荧光原位杂交技术检测多发性骨髓瘤基因组异常的临床意义

目的 探讨I-FISH技术检测MM基因组异常的临床意义.方法 应用CC技术(常规R显带)和I-FISH技术[包括GLP13q14(RB1基因)、GLP17p13.1(P53基因)、GLP13q14.3(D13S319)、GLP1q21及GLP14q32(IgH基因)DNA序列探针]分别对20例初治的MM患者(按Bataille分期,Ⅰ期7例、Ⅱ期5例、Ⅲ期8例)进行基因组检测;比较两种方法对MM染色体和基因组异常的检出率;并分析基因组异常与Bataille分期的关系.结果 CC技术从20例MM患者中检出1例[5%(1/20)]染色体异常,且为复杂核型--46,XX,-2,del(3)(p21),add(6)(q26),der(10)(q26),der(14)(32),+mar,inc[6].I-FISH检出12例[60%(12/20)]基因组异常,其中基因组异常发生频率在RB1、D13S319和P53均为30%(6/20),IgH和1q21均为20%(4/20);经配对χ2检验,I-FISH的检出率高于CC技术(χ2=9.09,P=0.001).在20例MM患者中,RB1基因异常的6例,Ⅰ期占1/20,Ⅱ期占1/20,Ⅲ期占4/20;D13S319异常的6例,Ⅰ期占2/20,Ⅱ期占1/20,Ⅲ期占3/20;P53基因异常的6例,Ⅰ期占2/20,Ⅲ期占4/20;1q21异常的4例,Ⅰ期和Ⅲ期占2/20;IgH基因异常的4例,Ⅰ期占1/20,Ⅲ期占3/20.结论 I-FISH对MM患者基因组异常检出率较高,其可检出不同Bataille分期的MM患者.

Abstract：

Objective To investigate the clinical significance of I-FISH for detection of genomic abnormalities in MM. Methods Twenty newly diagnosed MM patients(seven cases at stage Ⅰ , five cases at stage Ⅱ and eight cases at stage Ⅲ according to Bataille staging) were analyzed by combining the technique of CC (R-binding stain) and I-FISH [ including GLP13q14 (RBI gene), GLP17p13. 1 (P53 gene),GLP13q14. 3(D13S319) ,GLP1q21 ,GLP14q32(IgH gene) DNA sequence probes]. These two methods were compared for the detection rates of chromosomal and genomic abnormalities in MM and the association between genomic abnormalities and Bataille stages was also analyzed. Results CC examination showed only 1 case [5% (1/20) ] was found complex chromosomal abnormalities--46,XX,-2,del(3) (p21) ,add(6)(q26) ,der(10)(q26),der(14)(q32), + mar, inc[6]. While I-FISH assay showed that 12 cases [60%(12/20) ] were found genomic abnormalities. The frequencies of RB1, D13S319 and P53 were all 30%(6/20), and the frequencies of IgH gene and 1q21 were both 20% (4/20). The detection rate of the I-FISH was much higher than CC (χ2 = 9. 09, P = 0. 001) according to paired χ2 test. Of 20 patients,6 cases had RB1 gene abnormality, 1 case at stage Ⅰ , 2 cases at stage Ⅱ and 4 cases at stage Ⅲ. Of 20 patients, 6 cases had D13S319 gene abnormality, 2 cases at stage Ⅰ , 1 case at stage Ⅱ and 3 cases at stage Ⅲ. Of 20 patients, 6 cases in 20 had P53 gene abnormality, 2 cases at stage Ⅰ and 4 cases at stage Ⅲ. Of 20 patients, 4 cases had 1q21 gene abnormality, 2 cases at stage Ⅰ and 2 cases at stage Ⅲ. Of 20 patients, 4 cases had IGH gene abnormality, 1 case at stage Ⅰ and 3 cases at stage Ⅲ. Conclusion Ⅰ-FISH has higher detection rate for the genomic abnormalities in MM and can be used in detection of MM patients in different Bataille stages.     

获得性21三体为惟一遗传学异常的急性粒-单核细胞白血病1例

21三体通常被认为是与先天愚型密切相关的原发性核型改变，而获得性21三体则是恶性血液病中较为常见的数目异常，常与其他异常伴发，其作为孤立异常出现的病例并不多见。近来本室发现1例获得性21三体为惟一异常的急性粒-单细胞白血病，现报告如下。