CIK细胞体外逆转多药耐药性的研究

目的:研究CIK细胞体外逆转多药耐药(multidrug resistance,MDR)可行性。方法:用人外周血分离出的单个核细胞,在不同细胞因子诱导下培养成细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)及树突状细胞(DC),然后将其与成熟DC进行共培养,作为效应细胞,以K562敏感株与耐药细胞株为靶细胞进行体外逆转研究。流式细胞术检测靶细胞的P-gp表达及细胞内的ADR相对含量,MTT法测定其细胞毒作用,RT-PCR检测mdr-1基因耐药性逆转表达状况。结果:K562/ADR耐药细胞株ADR含量经效应细胞细胞作用后,细胞内的ADR含量分别提高了13.80%、39.50%,(P<0.01);,P-gp分别降低12.00%、42.69%,(P<0.01),mdr-1基因表达呈下调趋势,效应细胞对靶细胞的细胞毒作用分别达45.8%、78.9%,(P<0.01)。结论:CIK+K562/ADR-DC对P-gp高表达K562/ADR耐药细胞株具有特异性的细胞毒作用,有效提高了细胞内的ADR含量,下调了P-gp、mdr-1表达,使免疫效应细胞体外逆转多药耐药的效果得以显现。     

CMV感染监测在同种异基因造血干细胞移植中的应用

目的 探讨不同方法CMV监测在同种异基因造血干细胞移植中应用的可行性.方法 应用荧光定量VCR(FQ-PCR)和酶联免疫(ELISA)试剂盒分别检测13名 allo-HSCT 受者、170份标本的血浆 DNA 负荷量和血清IgM抗体.同时应用流式细胞术(FCM)检测94份标本白细胞pp65 抗原.结果 FQ-PCR、FCM、ELISA 栓出率分别为:35.51%、30.85%、13.08%.FQ-PCR与FCM方法对CMV感染的阳性检出率差别无统计学意义(P>0.05),ELISA的阳性检出率明显低于 FQ-PCR 和 FCM,其差别具有统计学意义(P<0.05).结论 FCM检测pp65抗原和FQ-PCR检测DNA负荷量可用于allo-HSCT后CMV感染的早期诊断.     

应用自动磁性细胞分选器分选人CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞

目的:建立应用自动磁性细胞分选器(autoMACS)分选人CD4+CD2+5免疫调节T细胞(Tregs)的方法。方法:应用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,应用autoMACS分选其中的CD4+CD2+5T细胞,流式细胞技术检测分选细胞的纯度。结果:分别从5.7×107及5.6×107外周血单个核细胞中分选出6.9×105及6.7×105个CD4+CD2+5T细胞,其纯度>98%。结论:应用autoMACS可高效分选出高纯度的CD4+CD25+T细胞,为深入研究其功能打下了基础。     

RP-HPLC法测定雾化温度对吸入用布地奈德混悬液稳定性的影响

目的:建立雾化温度对吸入用布地奈德混悬液稳定性影响的测定方法。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以Gemini C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 m)为分离柱,以甲醇+水82∶18(V/V)体积比为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为244 nm,柱温约为25℃,测定雾化温度对吸入用布地奈德混悬液稳定性的影响。结果:布地奈德的保留时间约为6 min,布地奈德与其他组峰的分离度>1.5;方法精密度试验RSD为0.46%;供试品溶液在24 h内稳定。布地奈德在浓度0.01~0.15 mg/ml范围内与峰面积呈现良好的线性关系,回归方程为:A=5×107 c+20336(r=0.9999)。不同批次样品测量平均回收率为96.35%(RSD=1.01%,n=3)。超声雾化仪药杯底部中心点最高温度≤46℃,供试品溶液在80℃以内稳定。结论:RP-HPLC法测定吸入用布地奈德混悬液的含量,其精密度好、准确度高,布地奈德在雾化过程中能够保持稳定,不受温度变化的影响。     

急性髓系白血病患者NPM1、FLT3和C-KIT基因突变的检测及其预后分析

本研究旨在评估NPM1、FLT3和C-KIT基因突变在急性髓系白血病（AML）患者中的发生频率和对预后的影响,并探讨这些突变与临床特点、细胞遗传学及生存情况的关系。对我院2010年8月至2012年10月收治的78例初治AML患者,采用PCR扩增产物直接测序法或毛细管电泳法检测NPM1、FLT3和C-KIT基因的突变情况,了解这些突变阳性患者的临床特征。结果显示,NPM1突变患者在AML中的发生率为14.1%,在正常核型AML中的发生率为26.7%。NPM1基因突变者发病年龄偏高（P〈0.05）,外周血白细胞和血小板数高（P〈0.05）,CD34低表达（P〈0.05）,而在性别比例、骨髓原始细胞比例、血红蛋白浓度、CD117和HLA-DR表达水平、完全缓解（CR）率、总生存（OS）率、复发率方面差异无统计学意义（P〉0.05）。78例AML患者中9例（11.5%）FLT3-ITD突变阳性,3例FLT3-TKD（3.8%）突变阳性,无同一患者同时发生这两种突变;FLT3-ITD突变者外周血白细胞和骨髓原始细胞比例较高（P〈0.05）,总生存率偏低（P〈0.05）,多见于正常核型（P〈0.05）,而在性别比例、年龄、外周血血小板数、血红蛋白浓度、完全缓解率、复发率方面差异无统计学意义（P〉0.05）。FLT3-TKD突变例数较少,未单独进行统计学分析。6例（7.7%）C-KIT突变阳性。C-KIT突变在异常核型AML中的发生率较高（P〈0.05）,复发率较高（P〈0.05）,总生存率较低（P〈0.05）,而在性别、年龄、骨髓原始细胞比例、外周血象、完全缓解率方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：NPM1、FLT3和C-KIT突变检测有利于指导AML患者的治疗及预后评估。     

呼吸康复治疗研究进展2017

呼吸康复的适应证已有质的发展,除了慢性阻塞性肺疾病以外,还包括支气管扩张、支气管哮喘、间质性肺病、 肺动脉高压、误吸、慢性气道疾病和胸部围手术期、晚期肿瘤等。慢性阻塞性肺疾病急性加重患者早期进行康复锻 炼是安全有效的,维持康复有利于延长强化康复效果的持续时间。瑜伽呼吸、穴位经皮神经电刺激和营养成分补充 具有康复治疗意义,居家康复和综合康复是提高呼吸康复依从性方法。     

红细胞沉降率 抗结核抗体及结核菌素试验在肺结核诊断中的价值

目的 探讨红细胞沉降率(下称血沉)、抗结核抗体及结核菌素试验(PPD)在肺结核诊断中的价值.方法 收集2009年5月至2011年10月103例初诊为肺结核疑似患者的临床资料,其中肺结核组47例,非结核组56例,对两组患者的血沉、抗结核抗体及PPD结果进行比较分析.结果 确诊肺结核组患者的血沉、抗结核抗体、PPD阳性率均明显高于非结核组(P＜0.05).结论 血沉、抗结核抗体及PPD在肺结核的诊断与鉴别诊断中具有较高的临床价值,值得临床推广.