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收费全文 | 409篇 |
免费 | 7篇 |
国内免费 | 29篇 |
学科分类
医药卫生 | 445篇 |
出版年
2021年 | 2篇 |
2020年 | 2篇 |
2018年 | 1篇 |
2017年 | 5篇 |
2016年 | 1篇 |
2015年 | 2篇 |
2014年 | 6篇 |
2013年 | 7篇 |
2012年 | 19篇 |
2011年 | 26篇 |
2010年 | 28篇 |
2009年 | 26篇 |
2008年 | 25篇 |
2007年 | 29篇 |
2006年 | 53篇 |
2005年 | 72篇 |
2004年 | 44篇 |
2003年 | 22篇 |
2002年 | 12篇 |
2001年 | 10篇 |
2000年 | 15篇 |
1999年 | 9篇 |
1998年 | 5篇 |
1997年 | 4篇 |
1996年 | 7篇 |
1995年 | 4篇 |
1994年 | 1篇 |
1993年 | 2篇 |
1991年 | 2篇 |
1990年 | 2篇 |
1988年 | 1篇 |
1987年 | 1篇 |
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41.
42.
目的 探讨慢病毒对大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)生物学特性的影响.方法 将含有绿色荧光蛋白基因的慢病毒感染第3代rMSCs.观察感染的rMSCs的形态学;感染的rMSCs与FITC标记的抗大鼠CD29抗体、PE标记的抗大鼠CD90抗体及APC标记的抗大鼠CIM5抗体孵育后,立即检测细胞表面CD29、CD90、CD45的表达水平;感染的rMSCs在成骨诱导培养基中培养21 d时,观察骨细胞的形成情况;感染的rMSCs在成脂肪诱导培养基中培养14 d时,观察脂肪细胞的形成情况;感染的rMSCs培养1、2、3、4、5、6、7、8 d时测定细胞活力;感染的rMSCs在琼脂培养基中培养21 d时,观察细胞克隆的形成情况;将感染的rMSCs接种于BALB/c-nu/nu裸鼠背部,观察接种后42 d内接种部位肿瘤的形成情况.结果 感染的rMSCs的形态学无改变,表达CD29+ CD90+ CD45-,具有形成骨细胞和脂肪细胞的能力,细胞活力无明显改变,无细胞克隆形成,接种裸鼠后接种部位未见肿瘤形成.结论 慢病毒对大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性无影响. 相似文献
43.
目的研究预注不同肌松药对罗库溴铵起效时间的影响。方法选择ASAⅠ~Ⅱ级全麻择期手术患者48例,随机分4组各12例。Ⅰ组单次静脉注射罗库溴铵0.60 mg8226;kg 1,Ⅱ~Ⅳ组分别预注罗库溴铵0.06 mg8226;kg 1、维库溴铵0.01 mg8226;kg 1、阿曲库铵0.05 mg8226;kg 1,间隔4 min后,静脉注射插管剂量罗库溴铵0.54 mg8226;kg 1。观察各组肌松药起效时间、气管插管条件及心血管反应。结果Ⅰ~Ⅳ组肌松起效时间分别为(116.3±16.5),(104.7±19.9),(71.2±13.4),(95.6±17.7) s。与Ⅰ组比较,仅Ⅲ组起效时间明显缩短(P<0.05)。气管插管条件及心血管反应各组间差异无显著性。结论预注0.2 ED95罗库溴铵、维库溴铵或阿曲库铵时仅维库溴铵能显著缩短罗库溴铵的起效时间。 相似文献
44.
目的:研究重组腺相关病毒载体介导的增强型绿色荧光蛋白基因在永生化大鼠神经前体细胞的转染效率及其表达情况. 方法:携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组腺相关病毒转染永生化大鼠神经前体细胞,持续观察转基因神经前体细胞绿色荧光蛋白的表达情况,并计算转染效率. 应用巢蛋白抗体和抗猿肾病毒40大T抗原抗体进行细胞鉴定,50 mL/L胎牛血清诱导细胞分化后,应用神经元和星形胶质细胞特异性标志物抗体检测其分化能力. 结果:荧光显微镜观察显示转染后24 h神经前体细胞即有绿色荧光蛋白表达,转染后72 h,大部分细胞表达绿色荧光蛋白,转染效率可达90%. 经传代培养8 wk后,表达绿色荧光蛋白的阳性细胞仍可高达70%~75%. 免疫细胞化学结果显示转绿色荧光蛋白神经前体细胞巢蛋白和抗猿肾病毒40大T抗原抗体染色均为阳性,50 mL/L胎牛血清可诱导其分化为神经元和星形胶质细胞. 结论:携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组腺相关病毒可高效转染永生化大鼠神经前体细胞,并可在细胞中长期稳定地表达,绿色荧光蛋白作为良好的示踪剂可应用于神经前体细胞的体内移植. 相似文献
45.
目的 筛选永生化小鼠小胶质细胞特异性P2X4siRNA.方法 转染FAM-siRNA16 h后,激光扫描共聚焦显微镜检测永生化小鼠小胶质细胞转染效率;将3条特异性siRNA经lipofectamine 2000介导转染永生化小鼠小胶质细胞;72 h后半定量RT-PCR观察干扰前后P2X4 基因mRNA水平表达,比较对应不同位点的三对siRNA片段对P2X4基因的干扰效果,分析RNA干扰的特异性,从中筛选出特异性最高的一条siRNA;转染该序列72 h后Western blot检测P2X4基因蛋白表达.结果 激光扫描共聚焦显微镜显示转染效率达80%;三对siRNA片段中siRNA-F1的沉默效率最高,最大干扰效率达72.2%;Western blot显示转染siRNA-F1后P2X4基因蛋白表达下调.结论 siRNA-F1可有效下调永生化小鼠小胶质细胞中P2X4 基因mRNA表达水平,并且能明显下调P2X4蛋白表达. 相似文献
46.
目的 评价CX3C趋化因子受体1(CX3 CR1)对骨癌痛大鼠吗啡耐受时脊髓背角μ受体和辣椒素受体(TRPVl)表达的影响.方法 清洁级成年雌性SD大鼠,体重180-200 g,月龄3月,经L3.4棘突间隙行鞘内置管,取鞘内置管成功的大鼠48只,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=12):对照组(A组)、鞘内注射生理盐水组(AM组)、鞘内注射IgG组(GM组)和鞘内注射CX3CR1中和抗体组(BM组).A组仪手术暴露右侧胫骨七段;其余3组右侧胫骨上段骨髓腔注入Walker256 乳腺癌细胞10μl(400个/ μl)建立骨癌痛模型,术后第10天开始鞘内注射吗啡20tg/kg,2次/d,连续7d,建立骨癌痛-吗啡耐受模型,注射吗啡第8天分别经鞘内注射相应溶液10μl,1次/d,连续3d.分别于接种Walker 256乳腺癌细胞前(T0)、接种后第3、6、9天、注射吗啡第3、7天、鞘内注射抗体第3天(T1-T6)时测定机械缩足阈值(MWT)和机械缩足持续时间(MWD),于T6时测定痛阈后处死大鼠,取脊髓L4-6节段组织,采用Western blot法检测脊髓背角小胶质细胞CX3 CR1蛋白的表达,采用免疫组化法检测神经元μ受体和TRPV1的表达.结果 与A组比较,BM组T2.3.5时、AM组和GM组T2,3,5,6时MWT下降,MWD升高,T6时CX3CR1蛋白和TRPV1表达上调,μ受体表达下调(P<0.01);与AM组和GM组比较,BM组T6时MWT上升,MWD降低,CX3CR1蛋白和TRPV1表达下调,μ受体表达上调(P<0.01).AM组和GM组上述指标差异无统计学意义(p>0.05).结论 CX3CR1可通过下调大鼠脊髓背角μ受体和上调TRPVI参与骨癌痛大鼠吗啡耐受的形成. 相似文献
47.
舒芬太尼与芬太尼复合异丙酚静脉麻醉的比较 总被引:29,自引:1,他引:29
目的:比较舒芬太尼与芬太尼复合异丙酚静脉麻醉时的作用。方法;选择40例ASAⅠ-Ⅱ级腹部手术病人,随机分为舒芬太尼-异丙酚静脉复合麻醉组合和芬太尼-异丙酚静脉复合麻醉组。分别观察围术期血淬这及血浆肾上腺素,去甲肾上腺素水平的变化以及苏醒时间。 相似文献
48.
49.
氯胺酮对吗啡慢性处理脊髓星形胶质细胞释放谷氨酸的影响 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 探讨氯胺酮对体外培养的吗啡慢性处理脊髓星形胶质细胞释放谷氨酸的影响。方法体外培养星形胶质细胞于融合状态,随机分为8组:对照组(不加吗啡)和吗啡依赖模型A、B1、B2、B3、C1、C2、C3组,48h后各组培养液均换成Neumbasal/B27无血清培养液,A组不加任何药物,B1、B2、B3组分别加入终浓度为0.1、1、10μmol·L-1的吗啡,C1、C2、C3组分别加入0.4、4、40μmol·L-1的氯胺酮,后6组加药15 min后再加入终浓度为10μmol·L-1纳络酮。用反相高效液相色潜分析法测定各组细胞外液中谷氨酸含量。结果 对照组谷氨酸含量[(2.52±0.33)μmol·L-1]与A组[(2.61±0.27)μmol·L-1]比较差异无显著性(P>0.05)。B1、B2、B3组内谷氨酸的含量均升高,其中B1组谷氨酸含量[(6.36±2.19)μmol·L-1]与A组[(2.61±0.27)μmol·L-1]相比差异有非常显著性(P<0.01).B2、B3组与A组相比,差异有显著性(P<0.05)。C1、C2、C3组内谷氨酸含量则随着氯胺酮预处理量的增加而逐渐降低。结论 星形胶质细胞可能通过调节胞外谷氨酸浓度的变化来参与吗啡依赖和戒断反应,而氯胺酮则通过减少星形胶质细胞释放谷氨酸来发挥抗戒断症状的作用。 相似文献
50.
选择30例择期心内直视术患者,治疗期间连续观察麻醉前后、术毕、术后第1、7、14天其外周血白细胞、中性粒细胞、T淋巴细胞亚群变化,借以判断麻醉与体外转流手术后上述免疫参数变化,为及时防治心内直视术患者术后并发症提供实验依据。结果发现静吸复合麻醉近1h后外周血淋巴细胞数急剧下降,术毕、术后第1至14天外周血白细胞、中性粒细胞数及其所占百分率显著升高,而淋巴细胞数及其百分率则明显下降。T淋巴细胞亚群分析发现麻醉后CD+3、CD+4细胞及CD+4/CD+8比值明显下降,术毕、术后第1天进一步下降,至术后第7天或14天恢复至麻醉前水平,这些参数变化是患者术后易并发感染等的原因之一。 相似文献