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腺病毒介导的人内皮型一氧化氮合酶基因和增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:研究腺病毒载体介导人内皮型一氧化氮合酶(human endothelial nitric oxide synthase,heNOS)和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)在体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)的表达。方法:体外培养、扩增大鼠骨髓间充质干细胞,并对培养的细胞进行成骨、成脂肪诱导分化和细胞免疫表型鉴定;用Pme I线性化后去磷酸化的pShuttle-heNOS-EGFP转化含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态BJ 5183,使其在细菌内发生同源重组,获得阳性重组质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定正确后经PacⅠ酶切,转入AD 293细胞,包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP。用重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP对MSCs进行转染,并用荧光显微镜及免疫荧光染色法观察转染细胞内EGFP和heNOS蛋白质的表达。结果:pShuttle-heNOS-EGFP与pAdeasy-1在BJ 5183中成功地发生了同源重组,得到了重组腺病毒质粒pAdEasy-heNOS-EGFP。重组质粒在AD 293细胞中包装成重组腺病毒Ad-heNOS-EGFP。经基因转染的MSCs中高表达heNOS和EGFP。结论:采用腺病毒载体可以将外源性的heNOS基因转染至MSCs中,并得到有效表达,且携带的EGFP标记可以直观地检测靶细胞感染和外源基因的表达情况,这将为勃起功能障碍的细胞治疗提供一条新的途径。 相似文献
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老年病毒性肝炎的甲襞微循环 总被引:1,自引:1,他引:0
老年病毒性肝炎的甲襞微循环文/王一平文总结了我院住院的71例老年病毒性肝炎患者甲襞微循环的变化情况,并探讨其急性与慢性间的甲襞微循环差异。1资料、方法及结果所有71例患者均为大于60岁的老年肝炎住院患者,平均年龄65.8岁。其中急性肝炎42例,慢性肝... 相似文献
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探讨幽门螺杆菌( Hp)感染与胃癌发病的关系。收集49例经胃镜诊断为胃溃疡或十二指肠溃疡患者的血清和20例正常健康人血清,分别用放免法( R I A)测定血清中胃泌素水平, E L I S A 法测定血清中抗 Hp Ig G、 Ig A和 Ig M 水平,根据血清抗体检测的结果,分为4组观察患者血清对体外培养的人胃癌细胞 H A C803、人结肠癌细胞 H T29增殖的影响,细胞增殖试验采用 M T T 法测定。结果:胃及十二指肠溃疡患者血清胃泌素(139.6±3817pg/m l)明显高于正常人(63.12±28.7pg/m l),两者差异有显著性( P< 0.01)。胃及十二指肠溃疡患者血清中,高 Hp Ig G 抗体滴度组( A 组)和高 Hp Ig A 抗体滴度组( B组)对人胃癌细胞具有明显的促增殖作用 ( P< 005),尤其是高 Hp Ig A 抗体滴度 B组的作用更为明显。而4组患者血清对人结肠癌细胞都没有明显的促增殖作用( P> 005)。结论:受 Hp 感染的胃及十二指肠溃疡患者血清中,高滴度的 Hp Ig G 组和 Hp Ig A 组对胃癌细胞具有促增殖作用,而此作用与血清胃泌素水平无明确关系。 相似文献
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蛋白尿是肾小球疾病最常见的临床表现.蛋白尿在进展性肾功能衰竭的发展中起一定作用,积极治疗非常重要。我们应用雷公藤多甙片治疗肾小球性蛋白屎30例疗效肯定,且副作用低,报道如下。 相似文献
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目的 利用高分辨率食管测压(HRM)和24 h 食管多通道腔内阻抗pH 监测(24 h pH-MII)
探讨内镜阴性烧心患者的食管动力及反流特点。方法 选取在四川省医学科学院·四川省人民医院消化内科
门诊就诊的以反流症状为主的问卷调查量表(GerdQ)评分>8 分和胃镜阴性患者303 例,分为非糜烂性反流
病(NERD)组、高敏感性食管(HE)组及功能性烧心(FH)组。搜集指标:食管远端收缩积分(DCI)、
下食管括约肌静息压(LESP)、有效蠕动百分比及食管- 胃连接部(EGJ)分型;阻抗基线值、不同性质及
性状反流次数及近端反流次数。结果 ①食管基线阻抗值:NERD 组、HE 组低于FH 组(P <0.05);②酸
反流:NERD 组DeMeester 评分、最长反流时间(AET)、立/ 卧位AET 高于HE 组、FH 组(P <0.05);③
化学及物理反流:NERD 组以酸、液体及混合反流为主,HE 组以弱酸、液体及混合反流为主,FH 组以非酸
及气体反流为主;④动力指标:NERD 组食管LESP 低于HE 组、FH 组(P <0.05),NERD 组和HE 组DCI
低于FH 组(P <0.05),FH 组有效蠕动比高于其他两组(P <0.05),NERD 组EGJ Ⅱ型比例(29%)多于HE
组(9%)、FH 组(1%)(P <0.05)。结论 ① NERD 在食管动力及反流事件方面更符合GERD 的发病机制;
② HE 患者较FH 在食道动力的减弱及反流事件中增多更明显,FH 患者在食道动力及反流方面无明显异常;
③食管HRM 联合24 h pH-MII 在诊断内镜阴性烧心上更有优势,给临床治疗提供依据和指导。 相似文献
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