去甲斑蝥素对CIK细胞体外扩增及抗瘤活性的影响

目的 探讨去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)增殖及CIK细胞杀伤活性的影响。方法 采用Ficoll密度梯度法提取脐血单个核细胞,定向诱导成CIK细胞,实验分为加入终浓度为30μmoL/L NCTD的NCTD-CIK组和不加NCTD的对照CIK组。通过细胞计数法、流式细胞术及MTT法观察CIK细胞的增殖、免疫表型及细胞毒活性的变化。结果 NCTD-CIK组细胞增殖率和抗瘤活性均明显高于对照CIK组,差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 NCTD促进CIK细胞扩增,增强其抗瘤活性,为CIK细胞的过继性免疫治疗提供了一种新的方法。     

脐血来源CIK细胞的体外扩增培养

目的 研究人脐血来源的细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）体外培养扩增,并检测其功能。方法 应用Ficoll-Hypaque离心获得界面细胞,贴壁培养2h,获得悬浮单个核细胞,体外以重组人白介素-1、重组人白介素-2、γ-干扰素和CD3抗体诱导培养15d。在CIK发育过程中,在光镜下观察其生长情况,应用流式细胞仪检测CIK表型。采用MTT法检测CIK对肿瘤细胞的杀伤性。结果 CIK前3d细胞扩增不明显,在培养4d后,细胞增殖,呈团,可观察到不规则形的细胞．细胞体积增大,胞质少、胞核大、圆．有时可观察到细胞分裂相。培养12d后CIK细胞高表达CD3^＋CD56^＋,CD3^＋CD8^＋细胞缓慢增长,CD3、CD4细胞有所增加,在d7之后有所下降,CD3^＋细胞维持高水平且变化不明显。CIK细胞对2种来源于不同组织的肿瘤细胞均产生了明显的杀伤性。结论 人脐血经重组人白介素-1、重组人白介素-2、γ-干扰素和CD3抗体体外诱导培养,能诱导出CIK,并对恶性肿瘤细胞有明显的杀伤活性。     

康艾注射液对人结直肠癌Lovo细胞Th1/Th2类细胞因子的影响

Objective To explore the effect of Kang'ai injection on Th1/Th2 cytokine in human colon carcinoma cell line Lovo.Methods Lovo cells were cultured by conventional ways until they were in exponential growth phase and then divided into 4 groups:one control group and three experimental groups with different concentration of Kang'ai injection.After 72 hours culture,Th1 type cytokines (IL-2,IFN-γ) and Th2.type cytokines (IL-4,IL-10) in the culture supernatant of Lovo cells in each group were separately detected by double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorhent assay (ELISA).Results After the coculture of Lovo cells and Kang'ai injection,Th2 type cytokine levels in the supernatants were significant lower than the control group (P＜0.05),and Th1 type cytokines in each group were of little change.Conclusions Kang'ai injection markedly downregulated Th2 type cytokines in Lovo cells,and contributed to the switching from Th2 to Th1.     

荷CEA-rV的DC增强CD3AK对CEA阳性肿瘤的特异杀伤作用

癌胚抗原(carcino embryonic antigen,CEA)是一种常见的肿瘤相关抗原,是目前国际上公认的肿瘤标记物.在人体上皮细胞恶性肿瘤中,包括90%的胃肠道肿瘤、胰腺癌、80%以上的非小细胞肺癌和50%左右的乳腺癌,都呈CEA阳性.人们称这类肿瘤为CEA阳性肿瘤[1].罗超权等[2]用牛痘病毒构建的CEA-重组基因痘苗病毒(CEA-rV)既有CEA抗原的高表达,又可刺激机体产生CEA抗体.     

细胞因子诱导的杀伤细胞上清液的细菌内毒素检测

目的:通过试验建立细胞因子诱导的杀伤细胞(cyto-kine induced killer cells,CIK细胞)上清液细菌内毒素的检查方法。方法:参照中国药典(2005年版二部附录ⅪE)细菌内毒素检查法进行干扰试验。结果:用灵敏度0.25EU.mL-1的鲎试剂,同时将样品稀释40倍,进行细菌内毒素检查,可消除干扰作用。结论:细菌内毒素检查法可以用于CIK细胞上清液的细菌内毒素检测,对CIK细胞制剂进行质量控制。     

丁苯酞对脑出血合并肺部感染患者神经功能与炎性因子表达的影响

目的探究丁苯酞对脑出血合并肺部感染患者神经功能及炎性因子表达的影响。方法选取2014年1月-2017年4月医院收治的脑出血合并肺部感染患者192例为研究对象,随机分为研究组和对照组,各96例,对照组采用常规治疗,研究组在对照组的基础上加用丁苯酞注射液治疗。比较两组患者治疗前后的国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,检查治疗前后两组患者白细胞介素-2(IL-2)、降钙素基因相关肽(CGRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果治疗后,研究组临床疗效优于对照组(P0.001);治疗后,两组患者NIHSS评分及IL-2、CGRP、TNF-α均降低(P0.05),且研究组NIHSS为(9.13±4.38)分低于对照组(13.84±6.42)分(P=0.003);研究组IL-2、CGRP、TNF-α分别为(0.47±0.21)ng/ml、(27.13±8.53)ng/L、(4.37±0.05)mg/L低于对照组(P0.05)。结论丁苯酞治疗脑出血合并肺部感染具有较好的临床疗效,能改善神经功能缺损,抑制炎症,具有一定的临床价值。     

CIK细胞治疗恶性肿瘤的临床观察和护理

目的研究用脐血单个核细胞制备CIK细胞的抗肿瘤作用,探讨肿瘤生物治疗近期疗效的免疫指标及临床应用中的护理规范。方法分离脐血单个核细胞,用IL-2,CD3Ab和IFN-γ等细胞因子诱导CIK细胞;测定肿瘤患者用CIK细胞治疗前后外周血单核细胞(PBMC)的NK杀伤活性.静脉滴注过程中严密观察患者的体温和脉博等反应。结果肿瘤患者输注CIK细胞一疗程后,其PBMC的NK杀伤活性由62%升高到83%,平均升高29%,发热反应不到3%,大多在38℃以下,未经处理自行清退。结论(1)CIK细胞输注能明显提高肿瘤患者PBMC的NK活性。(2)CiK细胞输注临床应用安全有效,无明显副作用。(3)肿瘤病人PBMC的NK活性测定可望成为肿瘤生物治疗的一个近期疗效参数。     

HSPA5基因3′UTR区多态性与肝细胞癌的相关性

目的调查70kDa热休克蛋白5（HSPA5）基因3′非翻译区（UTR）的多态性与HCC发病风险之间的关系。方法从576例肝细胞癌患者和539例在性别和年龄上匹配的健康对照者外周血中提取DNA,采用TaqMan检测HSPA5基因3′UTR区的rs16927997、rs1140763和rs12009。结果连锁不平衡的分析确定了3种单倍型和6种双倍型。等位基因、基因型、单体型和双体型在肝癌患者和正常对照组之间的分布没有显著差异。结论本研究表明,HSPA5基因3＇UTR的多态性不是有效预测肝细胞癌风险的诊断标志物。     

HSPA5基因3′非翻译区多态性与肝细胞癌预后的关系

目的调查70 kDa热休克蛋白5（HSPA5）基因3′非翻译区的变异与肝细胞癌预后的关系。方法从288例肝细胞癌患者外周血中提取DNA,采用TaqMan检测HSPA5基因的rs16927997、rs1140763和rs12009。Kaplan-Meier方法和Log-rank检验用于评价总生存率。结果 HSPA5单体型的分布与临床特性不相关。单变量分析显示等位基因、基因型、单体型和双体型不影响生存。多重比较结果显示临床特征与病人总的预后无关（P〉0.05）。结论中国人HSPA5基因3′非翻译区的变异对HCC的预后没有明显影响。