Jk(a-b-)表型分子机理的初步研究

目的　研究Jk(a-b - )表型的分子机理。方法　在标准血清学鉴定的基础上 ,对Jk(a -b - )表型进行第 4～ 11外显子及部分内含子DNA扩增 ,PCR产物经割胶纯化后直接进行测序分析。结果　Jk(a -b - )表型在第 5内含子 3’端拼接接受位点G突变为A ;第 3内含子 3’端第 78位A→G ;第 8内含子 5’端第 84位C→T ;外显子第 5 88位A→G(第 7外显子内 ) ;第 838位G→A(第 9外显子内 )。其中第 5内含子 3’端拼接接受位点G突变为A导致转录后外显子 6的缺失。结论　第 5内含子 3’端拼接接受位点的碱基G突变为A可能是Jk(a -b - )表型的分子遗传机理之一。     

献血人群红细胞血型意外抗体的筛选

目的:分析献血人群中红细胞血型意外抗体的情况,并对抗体特性进行确认。方法:应用O型红细胞结合PK7200血型检测系统筛选红细胞血型意外抗体,利用谱细胞鉴定抗体特性。结果:在献血人群中红细胞血型意外抗体阳性率为0.025%,意外抗体以抗M和冷凝集素为主。发现两例类孟买型血型和两例p血型。结论:献血人群中存在低比例的红细胞血型意外抗体,在献血者血型检测中应加以重视。     

一例由α1,2岩藻糖基转移酶基因两碱基缺失引起的类孟买型血型

目的　研究类孟买型血型的分子基础。方法　采用血清学方法鉴定个体的红细胞表型 ,用聚合酶链反应 ( polymerase chain reaction,PCR)扩增类孟买型表型个体的 ABO基因第 6、7外显子、α1 ,2 岩藻糖基转移酶基因编码区序列和 Se基因编码区序列 ,PCR产物经割胶纯化后直接进行测序分析。结果　类孟买型的α1 ,2 岩藻糖基转移酶基因核苷酸第 5 4 7～ 5 5 2位中的两碱基 AG缺失 ( CAGAGAG→ CAGAG) ,导致阅读框架发生移码 ,提前形成终止密码。先证者父母为杂合缺失携带者。结论　 α1 ,2 岩藻糖基转移酶基因两碱基缺失可引起类孟买型血型     

RhD基因检测方法在Rh阴性血型基因鉴定中的应用

目的：探讨RhD基因检测方法在中国汉族人Rh阴血型鉴定中的应用价值。方法：对于68例各种表型的Rh阴性中国汉族样本,用扩增RhD基因外显子3,4,5,7,10的5种方法,检测RhD基因的存在与否。结果：68例样本,总阴性率为52．95,其中29例含有C抗原的Rh阴样性本,5种方法鉴定皆为阴性的仅有1例（3．4％）,而表型为C阴性的38例样本,34例（89．5％）为阴性。结论：以检测RhD基因存在与否为基础的Rh阴性血型基因鉴定方法,不适用于C抗原阳性的中国汉族Rh阴性血型基因鉴定,仅有扩增RhD外子3,4,10的方法,适用于含C抗原的Rh阴性血型的基因鉴定。     

RHD基因测序方法的建立及其在弱D表型分子鉴定中的应用

目的 建立RHD基因的测序方法并对9例弱D表型作分子鉴定.方法用间接抗人球蛋白试验（IAT）筛选弱表达的D变异体,聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR-SSP）方法 扩增RHD基因特异的外显子及其侧翼序列,PCR产物直接序列分析测定核苷酸的变异.结果 用PCR-SSP方法特异扩增RHD基因,50份随机Rh阴性（ccdee）样本呈阴性结果,51例随机Rh阳性样本呈阳性结果.扩增产物测序结果表明,15份代表性Rh阳性单倍体型的RHD基因序列和标准序列一致.用所建立的方法对9份弱D表型样本进行测序分析,发现5份有845G＞A突变,3份有1 227G＞A突变,1例有1013T＞C突变.结论 所建立的RHD基因测序方法可以用于弱D的分子鉴定.9份弱D表型的分子机理得到明确.     

抗体鉴定问题的解析

1 前言 抗体检测和鉴定是免疫血液学的基础。抗体鉴定可以作为抗体临床重要性判定的指南，并为选择合适血液输注提供信息。在某些情况下，抗体鉴定可能是一个困难和费时的过程，因而可能延误患者的治疗。已经有抗体检测、ABO血型和D定型的操作指南，但很少有抗体鉴定必要程序的指南。     

一种新的B3变异型相关的B糖基转移酶基因M142T突变研究

目的 研究中国人个体ABO血型系统中具有混合外观凝集特征的B3变异型的分子遗传背景.方法 血型血清学方法鉴定2例ABO血型疑难样本的红细胞表型,应用连续凝集方法和13个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点检测法,排除外源性或内源性DNA嵌合的可能.对ABO基因第6、7外显子和部分内含子进行聚合酶链反应和DNA序列分析,并进一步通过克隆测序法鉴定2个样本的ABO基因单倍型.结果 2个无关个体红细胞与抗-B和抗-AB发生混合外观凝集,连续凝集法和STR检测排除了样本的外源性DNA污染和内源性遗传嵌合子,根据血清学特征确定这2个个体红细胞均为A183血型.单倍型序列分析发现2个样本为A1B杂合子,其中B等位基因与B101相比,差异仅在第7外显子的425T>C错义突变,导致B糖基转移酶多肽链M142T替换.结论 在中国人群中发现一种新的可能导致B3变异型的ABO等位基因.     

浙江汉族Kidd血型基因分型

?Kidd血型的鉴定多采用间接抗人球蛋白试验,且抗血清价格不菲.1994年,Oliv es等[1,2]克隆了编码尿素转移因子的HUT11 cDNA,并证实此即为编码Kidd血型系统抗原的Jk 基因.Jk基因位于18q12～21,Jka和Jkb在基因水平为G838A 变异,在蛋白质水平为Asp28 0Asn变异.笔者根据这一多态性,应用基因分型方法对浙江汉族Kidd血型基因频率进行了调查,现报道如下. 1 材料与方法     

一种新的B3变异型相关的B糖基转移酶基因M142T突变研究

目的 研究中国人个体ABO血型系统中具有混合外观凝集特征的B3变异型的分子遗传背景.方法 血型血清学方法鉴定2例ABO血型疑难样本的红细胞表型,应用连续凝集方法和13个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点检测法,排除外源性或内源性DNA嵌合的可能.对ABO基因第6、7外显子和部分内含子进行聚合酶链反应和DNA序列分析,并进一步通过克隆测序法鉴定2个样本的ABO基因单倍型.结果 2个无关个体红细胞与抗-B和抗-AB发生混合外观凝集,连续凝集法和STR检测排除了样本的外源性DNA污染和内源性遗传嵌合子,根据血清学特征确定这2个个体红细胞均为A183血型.单倍型序列分析发现2个样本为A1B杂合子,其中B等位基因与B101相比,差异仅在第7外显子的425T>C错义突变,导致B糖基转移酶多肽链M142T替换.结论 在中国人群中发现一种新的可能导致B3变异型的ABO等位基因.     

一种新的B3变异型相关的B糖基转移酶基因M142T突变研究

目的 研究中国人个体ABO血型系统中具有混合外观凝集特征的B3变异型的分子遗传背景.方法 血型血清学方法鉴定2例ABO血型疑难样本的红细胞表型,应用连续凝集方法和13个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点检测法,排除外源性或内源性DNA嵌合的可能.对ABO基因第6、7外显子和部分内含子进行聚合酶链反应和DNA序列分析,并进一步通过克隆测序法鉴定2个样本的ABO基因单倍型.结果 2个无关个体红细胞与抗-B和抗-AB发生混合外观凝集,连续凝集法和STR检测排除了样本的外源性DNA污染和内源性遗传嵌合子,根据血清学特征确定这2个个体红细胞均为A183血型.单倍型序列分析发现2个样本为A1B杂合子,其中B等位基因与B101相比,差异仅在第7外显子的425T>C错义突变,导致B糖基转移酶多肽链M142T替换.结论 在中国人群中发现一种新的可能导致B3变异型的ABO等位基因.