乙型肝炎病毒PreS1抗原与HBV感染和复制的相关性研究

目的研究血清前S1抗原（PreS1）与乙型肝炎病毒（HBV）感染和复制的相关性。方法同时测定458例乙型肝炎患者和35例健康对照者血清HBV—DNA载量、PreS1和HBeAg。以HBV-DNA载量为标准,进行PreS1和HBeAg比较。结果HBV-DNA载量小于10^3拷贝／ml的223例中PreS1阳性102例（45．74％）,HBeAg阳性16例（7．17％）;PreS1和HBeAg与HBV-DNA载量等级的线性相关系数分别为0．9329和0．9718;PreS1和HBeAg诊断乙型肝炎病毒感染的敏感性分别为72．77％、52．34％,特异性分别为54．26％、92．82％,阳性预测值分别为62．64％、88．49％,阴性预测值分别为65．41％、64．89％,准确率分别为63．76％、72．05％。结论随HBV—DNA载量的升高,HBeAg的检出率显著提高,PreS1的检出率次之;PreS1与HBV-DNA有一定相关性,但其相关程度不及HBeAg。     

前房形态动态裂隙摄像测量系统的研制

目的 :设计制作一种前房形态动态裂隙摄像测量系统,对其精密度及可重复性进行检测 ,并应用其定量分析浅前房者在暗室俯卧试验过程中前房形态的变化。方法 :自行设计制作了前房形态动态裂隙摄像测量系统 ,然后用同一摄像系统拍摄标准米尺1张 ,测量计算其精密度。通过同一人对同一眼连续摄像测量10次及同一人对同一前房图像连续测量10次计算其可重复性。选取浅前房22例22只眼在暗室俯卧试验前后用本前房形态动态摄像测量系统摄像 ,并测量计算试验前后的前房深度及虹膜曲率半径。结果 :本摄像测量系统的精密度为0.035mm。变异系数为1.21%～3.69 %。22只浅前房眼在暗室俯卧后的前房深度小于暗室俯卧前 ,有统计学显著性差异 (P<0.01) ,试验后虹膜曲率半径小于试验前 ,差异有统计学显著性 (P<0.01)。结论 :本装置具备检测暗卧过程中晶体虹膜隔前移量及瞳孔阻滞力增加引起的虹膜膨隆程度改变量的能力 ,可为进一步研究瞳孔阻滞性闭角型青光眼的发病机制提供线索和依据     

中央角膜厚度对24h眼压波动的影响

目的:探讨中央角膜厚度(central corneal thickness,CCT)对24h眼压波动的影响。方法:使用Goldmann眼压计测量39例78眼未治疗的青光眼患者和44例88眼年龄匹配的正常对照眼的24h眼压波动(5am,7am,10am,2pm,6pm,10pm),并用超声测厚仪测量CCT。结果:青光眼组和对照组的平均眼压分别为21.33±2.91和16.19±2.33mmHg(t=12.615,P=0.000);峰值分别为24.67±2.72和18.55±2.45mmHg(t=12.613,P=0.000);波动值分别为6.63±3.26和4.72±1.60mmHg(t=4.709,P=0.000);CCT分别为544.44±32.11和537.16±27.66μm(t=1.569,P=0.119)。CCT与青光眼组的眼压波动值无显著相关性(r=0.140,P=0.222);CCT与对照组的眼压波动值亦无显著相关性(r=0.050,P=0.642)。以CCT<545μm为薄角膜组,CCT≥545μm为厚角膜组进行对比分析,青光眼组和对照组的平均眼压、峰值、波动值的差异无显著性(P>0.05)。结论:CCT与24h眼压波动无显著相关性。     

血清甲胎蛋白对原发性肝癌诊断值的探讨

目的 探讨血清甲胎蛋白(AFP)对原发性肝癌的诊断值.方法 病理确诊的原发性肝癌104例与肝硬化及肝炎144例作对照,AFP测定采用放免法或化学发光法.将AFP测定值连续划分为9个数据段,按四格表计算敏感度、特异度、准确度、阳性似然比、阴性似然比及诊断优势比;用MetaDiSc1.4绘制受试者工作曲线(ROC),确定最适合的临界值.结果 AFP切割值为20μ/L时的敏感度最高,400μg/L时特异度最高,150μg/L或200μg/L时准确度、阳性似然比、诊断优势比最高,ROC曲线左上角最上方点对应的切割值为150μg/L,最适合临界值为150μg/L.结论 ROC曲线确定AFP为150μg/L时对原发性肝癌诊断效能最高,优于400μg/L.     

条件性Smad4基因敲除鼠模型的建立和鉴定及初步表型

目的：利用Cre/LoxP系统建立眼组织特异性Smad4基因敲除小鼠并进行初步表型分析。

方法：通过PAX6启动子驱动的Cre转基因小鼠(Le-Cre)作为介导敲除的工具鼠,将其与Smad4条件基因小鼠(Smad4fl/fl)结合获得Le-Cre特异性Smad4基因敲除小鼠或变异小鼠(Le-Cre; Smad4fl/fl)。为了证实条件性基因敲除的特异性及有效性,通过PCR技术对小鼠或鼠胚进行了相关基因分析,特定组织绿色荧光蛋白(GFP)的表达及Smad4蛋白的检测,同时利用ROSA26报导基因小鼠藉LacZ染色显示Le-Cre在眼组织的表达; 并对Smad4变异小鼠的表型进行了观察。

结果：早在E10.0左右,鼠胚晶状体位置及眼周外胚层发现强荧光的GFP表达,表明Le-Cre明确出现在特定的靶组织。通过小鼠基因型分析,确定了小鼠或鼠胚是否携带Cre重组酶基因、Smad4条件性等位基因和/或Rosa报导基因,对小鼠晶体DNA的基因分析也证实Smad4基因在某些特异性眼组织内得到剔除。通过在Cre转基因小鼠导入报导基因,并籍LacZ染色对Cre重组酶的表达进行检测,显示了Cre重组酶的时空表达及其表达的组织特异性。Smad4免疫组化染色显示,在正常发育胚鼠眼可见广泛的Smad4表达,早期主要存在于胞浆,随着胚眼发育向核内转移; 而在Smad4变异鼠胚眼,结果表明Smad4在Cre重组酶所表达的组织内缺乏表达。观察发现Smad4变异鼠可以顺利存活,但表现出眼球缩小、眼窝凹陷、眼睑畸形开放、闭合不能及眼周毛发脱失的外观。

结论：通过基因和蛋白水平的检测证实了Le-Cre; Smad4基因敲除鼠的建立及Smad4在变异小鼠中表达的缺乏。Smad4在眼组织的敲除导致了眼及附属器的明显异常,为深入了解眼球发育及Smad4对其影响的机制提供了一个可信的动物模型。     

视网膜神经节细胞培养的新进展

着重介绍视网膜神经节细胞 (RGCs)的培养、分离、鉴定及影响因素等方面的新进展。RGCs的培养分为视网膜外植块培养、分离的RGCs细胞培养。培养基有含血清及无血清两种。在作RGCs培养前 ,需对培养皿、培养瓶等进行处理。在细胞鉴定方面 ,采用活细胞观察、Thy 1抗体标记、荧光素标记、免疫组化标记等方法。影响RGCs培养的因素有上丘提取液、温度、胶质细胞层及缺氧、兴奋性毒素等。     

血清I型前胶原放免法的建立和诊断肝纤维化的初步应用

目的 建立测定血清Ｉ型胶原（ｐｒｏｃｏｌｌａｇｅｎｔｙｐｅＩ，ＰＣＩ）放射免疫分析法（放免法）应用于诊断肝纤维化。方法 从流产的人胎皮中提纯Ｉ型前胶原（ｈｕｍａｎｐｒｏｃｏｌｌａｇｅｎｔｙｐｅＩ，ｈＰＣＩ），免疫兔获特异性抗血清，用改良的氨胺Ｔ法将＾１２５Ｉ标民ｈＰＣＩ抗原，建立双抗体ＰＥＧ法，用此法测定了１００例正常人和１４５例各种肝病患者血清ＰＣＩ。结果 建立的放免法标准曲线竞争抑制关系良好，     

眼轴长度对健康成年人24h眼压波动的影响

目的　探讨眼轴长度对健康成年人２４ｈ眼压波动的影响。方法　使用Ｇｏｌｄｍａｎｎ眼压计测量５７例（１１４眼）健康成年人２４ｈ眼压波动（５００ａｍ、７００ａｍ、１０００ａｍ、２００ｐｍ、６００ｐｍ、１０００ｐｍ）;采用超声测厚仪测量其眼轴长度,按照眼轴长度分为正常眼轴组（２３．０～２５．０ｍｍ）、长眼轴组（＞２５．０ｍｍ）及短眼轴组（＜２３．０ｍｍ）。使用ＳＰＳＳ１３．０统计软件对测量值进行统计分析。结果　所有观察对象眼轴长度为（２３．７７±１．４２）ｍｍ,其中正常眼轴组２２例４４眼眼轴长度为（２３．９１±０４９）ｍｍ、长眼轴组１７例３４眼眼轴长度为（２５．４１±０．２８）ｍｍ,及短眼轴组１８例３６眼眼轴长度为（２２．２３±０．６１）ｍｍ。正常眼轴组、长眼轴组及短眼轴组的眼压分别为（１４．８８±３．０１）ｍｍＨｇ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）、（１７．１７±３．８８）ｍｍＨｇ和（１８．７８±５．０８）ｍｍＨｇ,３组眼压两两比较差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）;３组２４ｈ眼压波动值分别为（４．１４±１．１７）ｍｍＨｇ、（４．０９±１２４）ｍｍＨｇ和（４．８６±１．８１）ｍｍＨｇ;３组２４ｈ眼压波动值两两比较,短眼轴组眼压波动值大于正常眼轴组（ｔ＝２．０７５,Ｐ＝００４２）及长眼轴组（ｔ＝２．０９６,Ｐ＝０．０４０）,但正常眼轴组与长眼轴组间差异无统计学意义（ｔ＝０．１７５,Ｐ＝０８６１）。Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析结果显示,眼轴长度与２４ｈ眼压波动值呈显著负相关（ｒ＝－０．２５４,Ｐ＝０．００６）。结论　眼轴长度与健康成年人２４ｈ眼压波动值呈负相关关系,眼轴越短眼压波动值越大。     

血清Ⅰ型前胶原放免法的建立和诊断肝纤维化的初步应用

目的建立测定血清Ⅰ型胶原（ｐｒｏｃｏｌａｇｅｎｔｙｐｅⅠ，ＰＣⅠ）放射免疫分析法（放免法），应用于诊断肝纤维化。方法从流产的人胎皮中提纯Ⅰ型前胶原（ｈｕｍａｎｐｒｏｃｏｌａｇｅｎｔｙｐｅⅠ，ｈＰＣⅠ），免疫兔获特异性抗血清，用改良的氨胺Ｔ法将１２５Ⅰ标记ｈＰＣⅠ抗原，建立双抗体ＰＥＧ法。用此法测定１００例正常人和１４５例各种肝病患者血清ＰＣⅠ。结果建立的放免法标准曲线竞争抑制关系良好，与ＰＣⅢ、ＣⅣ无交叉反应，各种质量指标均达到放免法标准要求。两组肝硬化血清ＰＣⅠ显著升高，而其他各组均无显著升高，血清ＰＣⅠ与ＰＣⅢ水平不相关（ｒ＝０１７２，Ｐ＞００５）。结论用此法测定血清ＰＣⅠ对判断肝纤维化发展至肝硬化有诊断价值。     

瞳孔阻滞的研究与进展

简要回溯了自Curran提出瞳孔阻滞概念至今70年的研究概况,早期的临床观察确立了瞳孔阻滞是原发性闭角型青光眼发病的重要病理生理因素之一;Mapstone等建立了计算瞳孔阻滞力的数学方法;Tiedeman则用简明的数学模型描述了瞳孔阻滞所致的虹膜轮廓状态。