肽核酸阻断PYR复合体与DNA位点结合对γ-珠蛋白基因表达的影响

目的:探讨肽核酸(peptide nucleic acid,PNA)阻断PYR复合体(polypyrimidine complex)与DNA序列结合对γ-珠蛋白基因表达的影响。方法:设计并合成PYR-PNA、β-PNA和RS-PNA(随机序列PNA),以阳离子脂质体lipofectamine 2000为载体,将PNA转染到K562细胞中。用RT-PCR和Western blot技术分别在转录水平和蛋白翻译水平检测K562细胞在转染24、48和72 h后γ-珠蛋白基因的表达情况。结果:PYR-PNA组在转染24、48和72 h后γ-珠蛋白基因mRNA和蛋白表达水平均显著高于RS-PNA组和空白对照组(P0.05),其中以转染48 h后的表达上调最为明显,分别为空白对照组的2.0和2.5倍。结论:PYR-PNA可显著上调K562细胞中γ-珠蛋白基因的表达;本研究为β-地中海贫血基因治疗提供了新的研究思路。     

舒利迭联合噻托溴铵治疗对慢性阻塞性肺疾病患者肺功能影响

目的探讨舒利迭联合国产噻托溴铵吸入剂治疗对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能及血气指标的影响。方法将90例COPD患者随机分成观察组与对照组,对照组予以单独应用舒利迭(50μg沙美特罗/500μg氟替卡松)2次/d,早晚各吸入1次;观察组在对照组治疗的基础上加用噻托溴铵18μg,1次/d,在上午吸入。2组疗程均为半年,治疗3个月时,比较2组临床疗效、肺功能指标变化、急性发作次数、血气指标、呼吸困难评分及医疗费用。结果观察组总有效率明显高于对照组(P0.05),观察组肺功能指标、血气分析指标明显优于对照组(P均0.05),呼吸困难评分与急性发作次数明显低于对照组(P均0.05)。观察组医疗费用高于对照组,但差异未见统计学意义。结论舒利迭联合国产噻托溴铵能够显著改善COPD患者的肺功能及血气指标,可提高治疗效果,建议在临床上推广应用。     

贵阳市532例新生儿脐血α-地中海贫血筛查

目的:了解贵阳地区人群中α-地中海贫血(α-地贫)的发生率,探讨应用新生儿脐血筛查α-地贫的意义。方法:采用Sebia全自动电泳仪对贵阳本地出生的新生儿脐血进行Hb Bart’s定量检测。结果:在532份脐血样本中共有14份检出Hb Bart’s,检出率为2.63%,其中标准型12例,静止型和中间型各1例,未检出重型α-地贫。结论:贵阳地区α-地贫的发生率为2.63%;新生儿Hb Bart’s含量检测能有效的检出α-地贫患儿,对本地开展α-地贫的早期筛查、遗传咨询有重要的指导意义。     

农村学校体育现状及发展对策

农村学校体育教育观念陈旧,场地器材缺乏,教师文化素质偏低,体育经费不足等现状都严重制约着农村学校体育工作的发展,制约着农村学生体质和健康水平的提高.针对这种现状应加强对农村学校体育教育各项工作的支持力度;增加体育经费的投入,提高体育教师的待遇;为体育教师提供接受继续教育的机会,从而改善农村学校体育教育工作的水平.     

贵州地区β-地中海贫血基因诊断

目的:探讨β-地中海贫血基因诊断的临床应用价值。方法:采用反向点杂交技术,对84例可疑β-地中海贫血患者进行基因分析。结果:84例患者中检出49例β-地中海贫血,检出率为58.3%。共检出8种突变基因型,其中CD17杂合子占46.9%,CD41-42杂合子占22.5%;检出的5种突变等位基因按发生频率由大到小排列为:CD17、CD41-42、CD71-72、IVS-Ⅱ-654、βE(CD26),其中CD17(A→T)的发生频率为51.7%。结论:反向点杂交技术是临床确诊β-地中海贫血的一种准确可靠的基因诊断方法;CD17(A→T)是贵州地区最常见的β-地中海贫血基因突变类型。     

血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶对肝癌诊断价值的探讨

目的检测血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（GPDA）并探讨其对肝癌的诊断价值。方法采用连续监测法分别对30例原发性肝癌、胆石症、肺癌、肝硬化、慢性肝炎及15例胃癌患者血清GPDA进行测定。结果原发性肝癌患者的GPDA活性和阳性率比胆石症、肺癌、肝硬化、慢性肝炎及胃癌患者显著增高（P〈0．01）。结论血清GPDA活性测定对原发性肝癌有一定辅助诊断价值。     

SYBR Green I实时荧光PCR检测VTKORC1和CYP2C9基因型

目的 建立一种检测维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)和细胞色素P450 2C9(CYP2C9)基因型的SYBR GreenI实时荧光PCR法.方法 提取134例心脏瓣膜置换术患者的外周血基因组DNA.针对VKORC11173C>T和CYP2C9 1075A>C两个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别设计一套等位基因特异性引物.PCR反应体系中加入荧光染料SYBR Green I,样本经扩增后结合熔解曲线分析,确定每个样本的基因型.结果 VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C两个SNP位点的不同基因型具有不同的熔解曲线峰型.134例患者中,VKORC1 1173C>T基因型TT、TC和CC分别有111例、21例和2例,各占82.8%、15.7%和1.5%;CYP2C9 1075A>C基因型*1/*1和*1/*3分别有121例和13例,各占90.3%和9.7%,未检出纯合子*3/*3基因型.结论 基于荧光染料SYBR Green I的实时荧光PCR分型方法操作简便、价格低廉、结果准确可靠,适于临床实验室对VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C的基因分型.     

EPHX1基因多态性与华法林稳定剂量关系的研究

目的:探讨环氧化物水解酶基因(EPHX1)rs4653436(G>A)基因多态性位点与个体间华法林稳定剂量差异的关系。方法:采用聚合酶链反应/变性高效液相色谱技术,检测217例已获得华法林稳定剂量患者的rs4653436(G>A)位点基因型;比较不同基因型患者华法林稳定剂量的差异。结果:217例患者中,基因型GG、GA和AA分别有141、72和4例,各占65.0%、33.2%和1.8%,G和A等位基因的频率分别为81.6%和18.4%。GG、GA和AA基因型患者的华法林稳定剂量分别为(2.84±1.19)、(2.91±1.09)和(2.66±1.29)mg/d,3组之间差异无统计学意义(F=0.155,P=0.856)。结论:EPHX1 rs4653436(G>A)基因多态性可能不是影响华法林个体间用量差异的遗传因素。     

贵阳地区1143例孕妇地中海贫血筛查及基因检测结果分析

目的了解贵阳地区孕妇人群的地中海贫血(简称地贫)发生情况,并探讨地贫产前筛查的临床意义。方法采用红细胞指数分析和血红蛋白电泳对孕妇进行地贫表型分析,表型阳性者进一步做地贫基因诊断。分析贵阳地区孕妇人群地贫基因型的分布情况。结果 1 143例孕妇筛查出地贫表型阳性68例(5.95%),基因诊断确诊为地贫63例(5.51%),其中α-地贫23例(2.01%),β-地贫40例(3.50%)。α-地贫基因型以--SEA/αα最多,占60.9%;β-地贫基因型以CD17/N最多,占45.0%。结论贵阳地区是地贫高发区;对孕妇开展产前筛查可有效防止重型地贫患儿的出生。     

自制糖化血红蛋白质控物的实验探讨

目的 自制糖化血红蛋白质控物,用于全自动生化分析仪测定糖化血红蛋白的内部质量控制,并评价其稳定性.方法 采集混合新鲜健康人全血,灭活,加入叠氮钠防腐,分装,低温保存.连续5个月在奥林巴斯AU5400生化分析仪上分析质控品的HbA1c的结果及其标准差和CV.结果 贮存于-70 ℃自制的糖化血红蛋白的质控品复溶后,在奥林巴斯AU5400全自动生化分析仪上所测得的HbA1c值5个月均值都很稳定,每个月的CV值都小于5%,各个月的检测结果对比差异无统计学意义(P>0.05).这5个月的总的HbA1c值变异低于5%.结论 自制糖化血红蛋白质控物基本上符合临床使用的要求,是良好的室内质量监测的质控品.