2009年武汉同济医院细菌耐药性监测

目的分析我院2009年临床分离常见病原菌对常用抗菌药物的耐药情况。方法E试验法检测肺炎链球菌对青霉素和头孢曲松以及葡萄球菌对万古霉素的MIC,其他抗菌药物采用纸片扩散法进行药敏试验。根据CLSI2008年M100-S18判定耐药性。结果收集本院2009年5791株临床分离细菌,其中革兰阴性杆菌占59．8％（3465／5791）,革兰阳性球菌占28．9％（1676／5791）,真菌10．9％（630／5791）。住院患者中常见的分离菌依次为大肠埃希菌、不动杆菌属、肺炎克雷伯菌、金葡菌和铜绿假单胞菌;门诊患者则依次为大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌和金葡菌。金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）中MRSA和MRCNS的检出率分别达到62．9％（350／556）和83．4％（399／478）,检出万古霉素和（或）替考拉宁耐药的肠球菌属6株;青霉素不敏感肺炎链球菌（PISP＋PRSP）的分离率为30．1％（非脑脊液标本）;4株脑脊液分离菌株均为青霉素耐药肺炎链球菌（PRSP）。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,但耐药菌株亦已出现。产ESBLs大肠埃希菌和产ESBLs克雷伯菌属的检出率分别高达78．3％（626／800）和49．8％（311／625）。不动杆菌属中耐亚胺培南和美罗培南株占50％以上;耐亚胺培南和美罗培南的铜绿假单胞菌分别为20．3％和11．2％;嗜麦芽窄食单胞菌对左氧氟沙星、磺胺甲嗯唑-甲氧苄啶、米诺环素的敏感性较好（77．3％～92．4％）。结论我院常见病原菌仍以革兰阴性杆菌为主,细菌多重耐药现象严重,尤其对万古霉素耐药肠球菌属和碳青酶烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌增多。应及早进行检测并采取有效控制措施。     

抗菌药临床用药情况调查

目的：了解本院临床抗菌药应用现状，为药品研究、生产、流通和宏观控制提供参考。方法：统计分析同济医院2000～2003年各类抗菌药的临床应用数量及销售金额，应用频度。结果：β-内酰胺类药、喹诺酮类药近年来用量急剧增长。临床用量明显增长的主要品种有：头孢他啶、头孢呋辛、左氧氟沙星等。氨基糖苷类及其他抗菌药的用量则有所下降。结论：本院近年来抗菌药使用情况基本符合抗菌药发展规律，与国内其他医院情况基本类似：临床应加强抗菌药使用管理，提倡科学合理使用抗菌药。     

血液科病房感染致病菌分布特点及药物敏感性分析

为了了解本院近两年血液科病房致病菌临床分布特点及其对抗生素的药物敏感性，按常规方法从标本中对致病菌进行分离和培养。细菌药敏试验采用Kirby-Bauer法，真菌药敏试验应用ATBFUNGUS药敏条。结果显示，从所有送检标本中分离出致病菌共102株，其中革兰阳性菌(G 菌)占42．2％，革兰阴性菌(G-菌)占34．3％，真菌占3．5％。58．8％致病菌分离自恶性血液病患者，27．5％来自不明原因的发热(FUO)患者。此外，在患者处于粒细胞缺乏或者白细胞减少时分离出的致病菌就占到51．0％。分离出的真菌大多对抗真菌药物敏感，而G 菌对万古霉素(vancomycin)最敏感，G-菌对亚胺培南(imipenem)最敏感，多数细菌呈多重耐药性。结论：血液科病房感染与患者自身抵抗力低下、白细胞减少或粒细胞缺乏、肿瘤负荷过重等多种因素有关。临床上及时进行微生物学检查和药敏试验，对合理选择抗生素、降低感染发生率和死亡率以及减少耐药菌株产生均有重要价值。     

肺炎链球菌的分布及耐药性分析

目的 了解肺炎链球菌的临床分布及耐药特点,为临床合理用药提供依据.方法 采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验.E-test法检测分离株对青霉素及头孢由松的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentrations,MIC).结果 2009年共收集到肺炎链球菌118株,主要分离自呼吸道标本,其次为血液及脑眷液.呼吸道感染和血流感染的青霉素不敏感肺炎链球茼(PNSSP)为30.1%(34/113);4株脑脊液分离菌株均为青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP).肺炎链球菌对克林霉素及红霉素高度耐药,敏感性不足10%,且儿童分离株敏感性明显低于成人(P＜0.05);所有茸株对莫西沙星及左氧氟沙星敏感性良好,均在90%以上,未发现耐万古霉素茸株.结论 肺炎链球菌对红霉素和克林霉素耐药性相当高,尤其是儿童分离菌株;呼吸道PNSSP也较高,达30%左右,临床应结合药敏试验结果 合理选择抗菌药物.     

肺炎克雷伯菌质粒介导的β-内酰胺酶的筛选及其耐药性检测

目的 了解对头孢类抗生素耐药的肺炎克冒伯菌(Kpn)中超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和AmpC酶的分布及其对抗生素的敏感性，寻求检测肺炎克雷伯菌质粒β-内酰胺酶的最佳方法。方法 收集临床分离的肺炎克雷伯菌182株，采用双纸片协同试验和三维试验检测ESDL，表型筛选法和头孢西丁三维试验检测AmpC酶。结果 双纸片协同试验检测出产ESDL株78株，占42．85％(78／182)，三维试验显示产ESBL株82株，占45．05％(82／182)，两者相比总符合率为95．12％(78／82)。AmpC酶表型筛选法结果显示可疑产AmpC酶株9株，占4．9％(9／182)。三维试验显示产AmpC酶为7株，占3．8％(7／182)；同时产ESBL和AmpC酶菌株为2株，占1．1％(2／182)。产酶株对三代头孢高度耐药，对喹诺酮类、复方新诺明交叉耐药率也很高，对氨基糖苷类抗生素有一定敏感性，尚未发现亚胺培南耐药株。结论 双纸片协同试验为检测ESDL最常用方法，AmpC酶表型筛选法只可作为初步筛查．确证时采用三维试验。产ESDL和(或)AmpC酶的Kpn对多种抗生素耐药，需及时监测药敏结果。     

2000-2009年同济医院肺炎链球菌的耐药性分析

目的 了解肺炎链球菌的耐药情况及变化趋势.方法 收集同济医院2000年1月1日至2009年12月31日分离的753株肺炎链球菌,主要分离自呼吸道标本,其次为血液和脑脊髓液标本.采用E-test法检测分离株对青霉素及头孢曲松的MIC,其余采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验.结果 10年来总的非脑膜炎来源PNSSP占23.8%(93/392),儿童PNSSP占26.4%(47/178),成人PNSSP占16.8%(36/214),差异具有统计学意义(χ2=7.642,P＜0.01).10株脑膜炎标本来源肺炎链球菌均为PRSP.莫西沙星、左氧氟沙星对肺炎链球菌仍然保持着良好的敏感性,敏感率分别为96.9%(720/743)和90.5%(672/743),未发现万古霉素和美罗培南耐药菌株.肺炎链球菌对大多数抗菌药物的耐药性均有不同程度升高,尤其是青霉素、红霉素及克林霉素敏感性下降尤为明显.2006年PNSSP仅19%(19/99),2009年上升为30%(35/114);2000年红霉素敏感性为22%(28/125),至2009年仅为3%(3/114);2004年克林霉素的敏感性为40%(13/32),至2009年仅为4%(5/114).结论 2000-2009年同济医院分离的肺炎链球菌对青霉素、红霉素及克林霉素的耐药性呈上升趋势,尤其是儿童对此3种抗菌药物的耐药性明显高于成人分离株.临床应结合药敏试验结果合理选择抗菌药物.

Abstract：

Objective To investigate antibiotic resistance and resistant trend of Streptococcus pneumonia. Methods To investigate 753 Streptococcus pneumoniae isolated from Tongji Hospital in recent 10 years from January 1st 2000 to December 31st 2009, most of them were from respiratory tract specimens,followed by blood and cerebrospinal fluid. The MIC to penicillin & cefatriaxone were determined by E-test,and other antimicrobial susceptibility were tested by Kirby-Bauer method. Results For non-cerebrospinal fluid specimen, the total rate of PNSSP was 23.8%( 93/392 ), it was significant different between the rate of PNSSP from children ( 26. 4%, 47/178 ) and adults ( 16. 8%, 36/214, χ2 = 7. 642, P ＜ 0. 01 ). All of 10 strains isolated from cerebrospinal fluid were PRSP. Most isolates were high-susceptive to moxifloxacin and levofloxacin, and the rate of susceptibility were 96. 9% ( 720/743 ) and 90. 5% ( 672/743 )respectively. None of Streptococcus pneumonia was resistant to vancomycin and meropenam. The resistant rate of most tested antibiotics increased in different degree year by year, especially penicillin, erythromycin and clindamycin. The rate of PNSSP was only 19%( 19/99 )in 2006 ,but in 2009 the rate increased to 30%( 35/114 ). The susceptibility rate of erythromycin was 22% ( 28/125 )in 2000, but only 3% ( 3/114 )in 2009 ;and the susceptibility rate of clindamycin decreased from 40% ( 13/32 ) in 2004 to 4% (5/114) in 2009. Conclusions From 2000 to 2009, Streptococcus pneunoniae was more likely resistant to penicillin,erythromycin and clindamycin year by year, especially those isolates recovered from children. It was suggested that antibiotics should be chosen to use according to antimicrobial susceptibility test results.     

流感嗜血杆菌的分布及耐药性分析

目的了解我院流感嗜血杆菌的分布及耐药性,给临床合理用药提供依据。方法收集2009年临床分离的流感嗜血杆菌,用Kirbry-Bauer法进行药敏试验,按CLSI2008M100-S18判断结果,以头孢硝噻吩纸片检测β-内酰胺酶。结果共收集到流感嗜血杆菌134株,主要来自儿科病房、门诊以及呼吸科病房。90%以上分离自呼吸道标本。流感嗜血杆菌对复方磺胺甲噁唑的敏感率最低,仅29.6%;对氨苄西林的敏感性也只有60%左右。但对头孢呋新、头孢噻肟、阿奇霉素、环丙沙星和左氧氟沙星的敏感性均在85%以上。成人分离株对氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦及复方磺胺甲噁唑敏感性明显高于儿童分离株;但对喹诺酮类及阿奇霉素,儿童分离株的敏感性高于成人分离株。β-内酰胺酶检出率29.3%,其中儿童分离株产酶检出率(46.2%)明显高于成人分离株(15.5%)。结论流感嗜血杆菌主要分离自呼吸道标本,大多数抗菌药物对流感嗜血杆菌仍然保持较好的抗菌活性,但该菌对复方磺胺甲噁唑的敏感性最低,不足30%,已不适宜用于流感嗜血杆菌感染的经验治疗。     

胆汁细菌学检验及其对抗生素的耐药情况

为了解胆道感染性疾病患者细菌感染的耐药情况,对1995年6月～1998年12月间外科住院患者胆汁进行了培养,并对阳性的菌群分布及其抗生素的耐药状况进行了分析(不包括厌氧菌)。结果发现标本培养阳性率为69．76％(143／205),其中大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌占大多数,分别为31．74％和18．56％。其次,肠杆菌属、肺炎克雷伯氏菌和肠球菌属也较为常见。所有病原菌对常用抗生素均产生了不同程度的耐药性。     

铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD2缺失和金属β-内酰胺酶与亚胺培南耐药的关系

目的了解临床分离耐亚胺培南铜绿假单胞菌中外膜蛋白OprD2的缺失和金属β-内酰胺酶(MBLs)的情况。方法2-巯基丙酸协同试验筛选产MBLs菌株,MBLs序列特异性引物PCR扩增和克隆含MBLs基因,亚胺培南为水解底物测定MBLs活性;Western印迹分析检测亚胺培南耐药株外膜蛋白的表达。结果128株亚胺培南耐药株中有17株(13.3%)产生MBLs,其中有7株(5.4%)和10株(7.8%)分别产VIM-2和IMP-1型MBLs,β-内酰胺酶活性测定显示这些菌株产生的β-内酰胺酶可水解亚胺培南,其水解活性可被EDTA所抑制;实时定量RT-PCR和Western印迹分析检测显示,106株(83.3%)表现为外膜蛋白OprD2的表达缺失,10株(7.8%)表现为外膜蛋白OprD2的表达降低,其余12株(9.3%)的OprD2的表达正常。结论临床分离对耐亚胺培南铜绿假单胞菌大多存在外膜蛋白OprD2的表达缺失或降低,产生VIM-2和IMP-1型MBLs菌株在本地区有一定的流行。