新型冠状病毒肺炎风险人群在线监测及全流程随访——华西模式构建与实践

新型冠状病毒肺炎疫情防控形势严峻,为减少高危人群的暴露,同时帮助风险人群开展居家防护,四川大学华西医院积极探索"在线监测及全流程随访模式",组建风险人群跟踪随访工作团队,制定标准化工作模式和流程,建立在线标准化随访信息登记表收集随访数据,并通过反复核查、反复督促来把控过程质量。在新型冠状病毒肺炎疫情期间,在线监测及全流程随访的华西模式在疫情阻击战中发挥了积极的支撑作用,推广此模式对各医疗机构有一定的借鉴价值。     

在体电穿孔辅助基因转染视网膜色素上皮细胞层和光感受器细胞层的实验研究

目的　探讨在体电穿孔辅助基因转染视网膜色素上皮（RPE）细胞层和光感受器（PR）细胞层的可行性。方法　147只健康雄性Spragne-Dawley(SD)大鼠根据电穿孔刺激模式电压值分为5、10、15、20、25、30、35 V组,右眼视网膜下腔注射增强型绿色荧光蛋白（EGFP）真核表达质粒pEGFP N1为实验眼,左眼注射TE Buffer 为对照眼。各组根据不同转染方向再分为RPE和PR两个亚组。各组除电压不同外,其余参数均为脉宽99 ms,脉冲间期0.5 s,连续5个脉冲。将带有负电荷的质粒在电场作用下,拟转染到RPE细胞层,反向置电极,拟转染到PR细胞层。转染后7 d 取各组视网膜铺片,荧光显微镜下观察EGFP表达强弱、范围及荧光细胞计数分析;采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）、实时逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）半定量观察EGFP蛋白和mRNA的表达。结果　转染后7 d,荧光显微镜观察发现,各组RPE亚组对照眼RPE细胞层内均未见特异性荧光表达,实验眼可见绿色荧光表达;各组RPE亚组对照眼视网膜铺片均未见荧光表达,实验眼视网膜铺片均可见转染了EGFP的RPE细胞。Western blot检测显示,随电压增加,EGFP蛋白与β-肌动蛋白条带灰度相对比值呈上升趋势。RT-PCR检测显示,各组均产生阳性扩增条带,随电压增高,EGFP mRNA与GADPH mRNA扩增条带灰度相对比值逐渐增高。结论　在体电穿孔方法可以有效辅助基因转染大鼠RPE细胞层。      

扶正祛邪方联合肿瘤深部热疗治疗晚期肺癌的临床观察

目的观察扶正祛邪方联合肿瘤深部热疗对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的治疗作用。方法将76例NSCLC患者随机分为对照组(单纯中药制剂组)和治疗组(对照组加扶正祛邪方与热疗),各38例。比较两组患者近期疗效、KPS、ECOG、CEA、CY211。结果两组临床疗效评价,治疗组有效率虽高于对照组,但差异无显著统计学意义(P>0.05),治疗组稳定率(86.84%,33/38)高于对照组(44.74%,76/38),有显著统计学意义(P<0.05)。两组KPS、ECOG评分,治疗组比对照组有更显著的改善(P<0.01),提高了生活质量。两组肿瘤标志物,治疗组治疗后CEA水平下降(P<0.01),对照组治疗后CEA水平升高(P<0.01)。治疗组治疗后CY211水平下降(P<0.05),对照组治疗后CY211水平升高(P<0.05)。结论热疗配合扶正祛邪方治疗晚期非小细胞肺癌与单纯中药制剂组对比,效果独特,更能够稳定瘤体,降低CEA,CY211指标,提高患者生活质量,增加中药治疗的有效利用率,值得进一步深入研究。     

TNF-α对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1皮质醇合成的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1皮质醇合成及其合成过程中的关键基因StAR的变化.方法 50U/ml的TNF-α或(和)10-9mol/L促肾上腺皮质激素(ACTH)在不同作用时间处理小鼠肾上腺皮质细胞系Y1.台盼蓝拒染法检测细胞数目,放免法检测细胞皮质醇合成水平,RT-PCR检测类固醇急性调节蛋白相关基因(StAR)的表达变化.结果 50U/ml TNF-α或(和)10-9mol/L ACTH处理Y1细胞不同时间,发现TNF-α和ACTH共同作用后,皮质醇合成水平明显下降(P＜0.05),StAR mRNA表达明显下降(P＜0.05);而TNF-α单独作用时对皮质醇合成的抑制作用不明显,StAR mRNA表达也无明显改变(P＞0.05);ACTH单独作用时Y1细胞皮质醇的合成明显升高(P＜0.05);StAR mRNA表达明显升高(P＜0.05).结论 TNF-α与ACTH共同作用通过抑制StAR表达进而抑制皮质醇合成能力;而TNF-α单独作用无明显抑制作用,ACTH单独作用后其表达量则明显升高.     

UPLC-PDA同时测定柴胡中8种多炔类化合物的含量

建立柴胡中多炔类化合物定量测定方法。采用Waters BEH C_(18)柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),甲醇-水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 m L·min~(-1),检测波长315 nm,柱温40℃。采用传统提取分离方法,制备得8种多炔类化合物,其中化合物7和8为新化合物。在线性范围内8种多炔类化合物线性良好(r0.999 0);日内精密度和日间精密度均小于1.9%;平均回收率范围在93.21%~108.4%。同时,对收集到的17个柴胡药材样品进行定量测定,发现不同种属、不同产地柴胡中所含多炔类成分种类及含量差异较大。建立的含量测定方法具有良好的精密度、准确度、重复性,可用于柴胡中多炔类化合物的定量测定及质量控制,为选择多炔类成分较多的柴胡药材提供一种简便方法。     

非编码RNAs对甲状腺乳头状癌的分子调控机制研究进展

甲状腺乳头状癌是甲状腺癌中最常见的亚型。虽然通过甲状腺切除术、微波消融术、放射性碘和激素替代治疗甲状腺乳头状癌能达到一定治疗效果,但仍然无法有效地降低其发病率、死亡率和复发率。因此,寻求甲状腺乳头状癌发生发展的分子机制,为甲状腺乳头状癌患者提供有效的早期诊断、精确的治疗以及较好的长期预后显得尤为重要。本文通过总结非编码RNAs及其相关信号通路对甲状腺乳头状癌发生发展的分子调控机制,以期为甲状腺乳头状癌生物标志物的进一步研究提供新思路。     

徐州地区1021例遗传咨询者细胞染色体核型分析

目的探讨徐州地区遗传咨询者外周血染色体异常核型出现的类型、发生率及与先天愚型、不良孕史、不孕不育和发育异常等疾病的相关性。方法对2014年10月至2017年6月期间我院1021例遗传咨询者,抽取外周血,培养淋巴细胞,进行G显带核型分析,分析其异常核型发生率,探讨其与疾病的发生关系。结果检出染色体核型异常74例,异常率为7.25%;其中常染色体数目异常8例,性染色体数目异常16例;常染色体结构异常共48例,性染色体结构异常2例,染色体多态性24例。结论先天愚型、精子生成障碍、不孕不育和习惯性流产的患者染色体异常比率较高,临床中此类人群非常有必要做染色体核型分析。     

脑源性神经营养因子-绿色荧光蛋白融合基因载体的构建、鉴定及初步应用研究

目的 构建脑源性神经营养因子(BDNF)绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,观察其融合蛋白的特性.方法 将BDNF cDNA片段插入pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO真核表达质粒,使其与GFP同处一个阅读框架中,测序鉴定后,转染培养的雪旺细胞,用免疫组织化学和蛋白质印迹(Western botting)观察外源性目的 蛋白的表达情况,并用该质粒活体转染视神经切断的大鼠模型,观察所表达外源性蛋白的神经保护作用.结果 测序证实质粒构建成功.Western botting结果 显示.BDNF-GFP融合蛋白表达一相对分子质量为41×103大小条带.荧光显微镜下可见BDNF-GFP转染的细胞发出绿色荧光,免疫组织化学染色后,可见绿色荧光与红色荧光完全重合.转染BDNF-GFP质粒和GFP质粒的大鼠视神经切断术后7d存活视网膜神经节细胞(RGC)分别为(1201±286)、(482±151)个/mm2,存活百分比分别为(51.39±12.24)%和(20.62±6.46)%;28 d时存活的RGC分别为(715±71)、(112±24)个/mm2,存活百分比分别为(30.59±3.04)%和(4.79±1.03)%.两组存活百分比比较,差异有统计学意义(t=3.144,11.378;P<0.01).结论 BDNF-GFP融合表达载体可以转录翻译为一融合蛋白,该蛋白可自发绿色荧光,并具有BDNF的生物学活性.