细胞衰老过程中P16表观遗传学修饰研究

目的 检测体外培养的人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程及细胞早衰阶段中P16的表观遗传学调控作用.方法 在细胞复制性衰老过程(同步培养的22 PDL正常人胚肺成纤维细胞于约50%融合度时进行400μmol/L H2O2处理,每天用H2O2染毒工作液染毒1次,每次2 h,持续4 d)中,将正常人胚肺成纤维细胞分为年轻细胞组(22 PDL)、中年细胞组(35 PDL)、复制性衰老细胞组(49 PDL);将经400μmol,L H2O2染毒4 d的22 PDL人胚肺成纤维细胞继续培养7 d,设为早衰细胞组.荧光定量PCR检测P16的mRNA表达水平,甲基化特异PCR检测其肩动子区-846～-639 bp的甲基化水平,染色质免疫沉淀结合定量PCR检测其相应启动子区组蛋白修饰情况,包括组蛋白H3、H4乙酰化和H3(Lvs4)及H4(Lvs20)甲基化修饰.结果 与年轻细胞组相比,中年细胞组P16的mRNA表达降低,复制性衰老细胞组和早衰细胞组P16的mRNA表达升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).在P16启动子区,第一外显子上游-1 000 bp内,其CpG岛片段长度为995 bp,甲基化特异性PCR(MSP)扩增片段位于CpG岛内-84～-639 bp之间,长度为208 bp.中年细胞组、复制性衰老细胞组、早衰细胞组甲基化引物扩增产物的相对含量分别为0.42、0.34、0.47,未甲基化引物扩增产物的相对含量分别为0.61、0.96、0.79.在P16 IP1启动子区(-685～-489 bp),复制性衰老细胞组及早衰细胞组以组蛋白H4(Lys20)甲基化修饰为主;在P16 IP2启动子区(-229～-60bp),复制性衰老细胞组受组蛋白H3、H4乙酰化和H4(Lys20)甲基化联合修饰,早衰细胞组以H3、H4乙酰化修饰为主.结论 细胞衰老过程中,P16启动子区的组蛋白修饰联合调控其mRNA表达,复制性衰老与早衰的调控机制存在差异.     

Legumain在荷瘤与正常小鼠脾细胞中的差异性表达

背景与目的:已知新发现的半胱氨酸蛋白酶legumain可能参与肿瘤的发生发展.本研究检测了legumain在荷瘤组织及荷瘤与正常小鼠免疫细胞如脾脏T、B和巨噬细胞中的差异表达,为研究legumain在抗肿瘤免疫中的作用提供基础数据.方法:取正常和4T1荷瘤的雌性BALB/c小鼠的肿瘤组织或脾细胞,分离巨噬细胞和T、B淋巴细胞,检测legumain的基因表达水平.结果:在荷瘤小鼠的肿瘤组织和淋巴器官均检测到高表达的legumain,而且随着肿瘤进展,其表达水平相应提高;legumain除高表达于巨噬细胞外,脾脏中的淋巴细胞,特别是T淋巴细胞,与正常小鼠相比其legumain的表达水平显著升高.结论:荷瘤小鼠的肿瘤组织及其脾脏巨噬细胞和T细胞中高表达legumain,并且与肿瘤的发生发展呈正相关.     

中药青葙子及其混淆品的PAGE鉴别

中药青葙子及其混淆品的ＰＡＧＥ鉴别湖北中医学院中药系（４３００６１）陈振江，金涛，袁和平武汉铁路中心医院检验科（４３００６４）徐薇本文应用聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳技术，对青葙子及混淆品进行鉴别分析，所得电泳图谱有明显的差异，可作为青葙子真伪品鉴别的一种...     

婴儿暖箱贮水槽充水湿化对箱内细菌污染影响的研究

目的:观察暖箱贮水槽充水湿化对箱内细菌污染的影响。方法:将使用暖箱的72例早产儿随机分为观察组和对照组,比较相同条件下暖箱常规充水湿化与否对箱内物体表面和空气的细菌培养合格情况。结果:观察组的暖箱内物体表面、空气细菌培养合格率比对照组明显增高(P<0.05)。结论:暖箱不宜常规充水湿化;使用婴儿暖箱应监测箱内湿度,当湿度过低时才充水湿化。     

综合治疗腰椎间盘突出症330例临床疗效观察

目的:探讨腰椎间盘突出症的治疗方法。方法:观察治疗330例临床疗效。分析其发生机理与治疗机理。结果:治愈率达95.5%,好转率达97.3%,结论:三维多功能牵引加手法配合自制中药“痹证散”治疗腰椎间盘突出症疗效好,费用低。     

当归芍药散及煎剂对异丙肾上腺素所致大鼠心肌缺血的影响

目的:观察当归芍药散对实验性心肌缺血动物模型的影响。方法:采用大剂量连续注射ISO复制大鼠心肌缺血模型。观察心电图、血清心肌酶、心肌超微结构、心肌SOD、MDA等变化。结果:与模型组相比,当归芍药散高、低剂量组心电图阳性反应动物数显著减少(P<0.05,P<0.01),GOT、LDH、CPK活性显著降低(P<0.05,P<0.01),心肌SOD活性明显升高(P<0.05,P<0.01)、MDA含量明显降低(P<0.05,P<0.01)、心肌病理改变明显减轻。结论:该方通过抗氧化作用,防治大鼠心肌缺血过程中脂质过氧化反应所造成的心肌细胞损伤,保护心肌细胞。     

CVB3感染对固有免疫识别受体MDA-5表达的影响及其意义

目的研究柯萨奇B3病毒(coxsackievirus group B type3,CVB3)感染对固有免疫识别受体—黑色素瘤分化相关基因5(melanoma differentiation-associated gene-5,MDA-5)表达的影响及其意义。方法采用RT-PCR扩增CVB3正负链以确证感染成功,CVB3感染正常HeLa细胞后用RT-PCR的方法检测MDA-5和IFN-β的表达变化,RT-PCR检测CVB3感染IFN-α处理过细胞MDA-5的表达情况,将细胞分为对照组(转染空载体)和MDA-5组(转染MDA-5表达质粒pEF-BOS-MDA-5),将空载体或pEF-BOS-MDA-5质粒与IFN-β启动子荧光报告质粒和作为内参照的pc MV-lacZ质粒瞬时转染进两组细胞,CVB3感染8h后收集细胞检测IFN-β启动子活性变化。结果与未感染组相比,CVB3感染下调固有免疫识别受体MDA-5及IFN-β的表达;IFN-α可明显上调MDA-5的表达,而CVB3感染抑制IFN-α的这种上调作用;CVB3感染下调MDA-5介导的IFN-β启动子的活化。结论CVB3感染能下调固有免疫识别受体MDA-5的表达并抑制MDA-5对IFN-β启动子的活化,从而下调IFN-β的表达,这可能是病毒性心肌炎中病毒逃逸机体免疫应答的机制之一。     

经阴道超声诊断治疗卵巢子宫内膜异位囊肿及子宫腺肌病

目的探讨经阴道超声诊断治疗卵巢子宫内膜异位囊肿及子宫腺肌病。方法对218例卵巢子宫内膜异位囊肿及子宫腺肌病患者的声像图进行回顾性分析。术前均行经阴道超声检查，常规血清CA125测定，部分患者并经阴道超声引导穿刺、无水乙醇注人治疗。结果阴道超声检查卵巢子宫内膜异位囊肿符合率94．9％；子宫腺肌病符合率96．8％；卵巢子宫内膜异位囊肿合并子宫腺肌病符合率92．8％。结论阴道超声可做为较准确诊断卵巢子宫内膜异位囊肿合并子宫腺肌病的首选方法之一。     

复治难治肺结核中结核菌-L型感染调查

目的 了解结核菌-L型在复治难治(复难治)肺结核患者中所占的比例,以及对结核病疫情的影响.方法 选择复难治肺结核患者现场拍摄X光胸片,晨痰作结核菌和结核菌-L型培养.结果 在260例复难治肺结核患者痰标本中,检出结核菌阳性92例;92例结核菌阳性患者中,检出结核菌-L型阳性32例,检出率为34.8%.168例结核菌阴性患者中检出结核菌-L型阳性45例,检出率为26.8%.结核菌和结核菌-L型均阳性的患者,其X光胸片病变范围比结核菌和结核菌-L型均阴性的患者广泛(x2=6.44,P＜0.05);其肺部空洞也明显增多(x=31.63,P＜0.01).结论 无论是菌阳还是菌阴结核病患者,都可检出结核菌-L型;结核菌和结核菌-L型合并感染,可导致患者双侧肺病变加重、空洞增多.     

三种调味品的果蝇伴性隐致性死试验

桂皮(Cinnamomum japonicum),茴香(Illicium verum)和花椒(Zanthoxylumbumgeanum(是人们普遍喜用的几种调味品(Flavouring)。为了对它们的安全性作出正确的评价,我们用黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)的野生型原种Oregon K品系和突变原种Basc(Muller-5)品系作为生物材料,测试了这三种调味品对生殖细胞三个发育阶段(成熟精子,精细胞和精母细胞)的伴性隐性致死(sex-linked recessive lethal,简称TLRL)诱变性。三种调味品均用其水煎原液(250mg/ml)。经用Kasstenbaum-Bowman方法对所有测试数据进行统计分析,结果如下: